PCRSSP法在HLAB27检测中的应用
人类白细胞抗原B27(HLA-B27),是诊断强直性脊柱炎的指标之一,对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风湿关节炎的鉴别诊断起着极其重要的作用。以前国内大多采用血清学方法对HLA-B27进行检测,近来国内外有报道应用PCR技术对HLA-B27进行检测,具有简便快速,灵敏度高,特异性好,准确等特点。2001年3-6月,我科对全部进行HLA-B27检测的病人运用PCR-SSP法进行检测的同时,也进行了血清学检测,现报告如下:1. 材料与方法1. 1材料1.1.1引物特异性引物有2个。B27引物序列为:P1 51-CAG,TCT,GTG,CCT,TGG,CGT,TGC;P251-GGC,TAC,GTG,GAC,ACG,CT.PC产物为144bp.51-TCA,CGG,ATT,TCT,GTT,GTG,TTT,PCR产物429 bp.以上引物由美国G&T Biotecli公司提供。1.1. 2......阅读全文
PCRSSP法在HLAB27检测中的应用
人类白细胞抗原B27(HLA-B27),是诊断强直性脊柱炎的指标之一,对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风湿关节炎的鉴别诊断起着极其重要的作用。以前国内大多采用血清学方法对HLA-B27进行检测,近来国内外有报道应用PCR技术对HLA-B27进行检测,具有简便快速,灵敏度高,特异性好,准确等特点
PCRSSP法在HLAB27检测中的应用
摘要 应用序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对181例临床标本进行HLA-B27检测,同时作血清学试验。结果:PCR方法和血清学方法分析结果基本相符,PCR分型无假阳性及假阴性,血清学方法1例假阳性及1例假阴性,表明PCR方法灵敏度高、特异性好、准确、较之血清学方法更适合于临床。 关健
PCRSSP法在HLAB27检测中的应用
人类白细胞抗原B27(HLA-B27),是诊断强直性脊柱炎的指标之一,对强直性脊柱炎的早期诊断和预后以及对类风湿关节炎的鉴别诊断起着极其重要的作用。以前国内大多采用血清学方法对HLA-B27进行检测,近来国内外有报道应用PCR技术对HLA-B27进行检测,具有简便快速,灵敏度高,特异性好,准确等特点
HLAB27检测方法的分析与对比
王向东江苏南通良春中医医院随着网络及媒体的发展,强直性脊柱炎(AS)也越来越多地出现在我们的视野中。从一些著名的演艺明星,到一些普通的患者,都在经历着病痛的折磨。HLA-B27(人类白细胞抗原B27),是强直性脊柱炎(AS)实验室检查的重要指标,在强直性脊柱炎患者中阳性率高达90%。今天,我们从检验
HLA基因分型方法:PCR-SSP法
PCR-SSP法1)提取DNA同前RFLP法 2)PCR扩增操作方法基本同PCR-RFLP,但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物,主要是针对第二外显子区域的多态性,用SSP扩增出来的产物具等位基因特异性。 3)凝胶电泳取PCR扩增的产物与上样缓冲液混合,加入2%琼脂糖凝胶加样孔中,其内
PCRSSP分析实验
根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端第一个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物,在PCR 反应过程中,只有引物3′端第一个碱基与决定特定等位基因的碱基互补时才能实现DNA 片段的完全复制,根据PCR 产物的有无进行等位基因的分型。
HLAB27浅谈
HLA-B27是人体白细胞抗原,属于HLA-B位点之一。HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(MajorHistocompatibility Complex, MHC)的表达产物,在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应,调节免疫应答的功能。根据HLA抗原结构,功能与组织分布的不同,可分
PCRSSP分析实验原理和步骤
PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。 [实验原理] 根据决定某等位基因的碱基性质,
PCRSSP分析实验原理和步骤
PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端第一
PCRSSP分析实验原理和步骤
PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端
HLAB27是什么?
临床上,病友因为腰背痛就诊风湿免疫科,医生一般都会叫病友抽血查B27,那么B27是到底是一个什么样的东西呢?B27—一种组织相容性复合物B27全称是HLA-B27,是HLA家族的一个成员。想要了解它还得从HLA家族说起。HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(Major Histocompatibil
HLAB27表达的检测
实验步骤 展开
HLAB27表达的检测
实验步骤 展开
HLAB27表达的检测
实验步骤展
关于HLAB27的症状概述
HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex, MHC)的表达产物,在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应,调节免疫应答的功能。根据HLA抗原结构,功能与组织分布的不同,可分为三类:Ⅰ类分子为HLA-A、-B、-C系列抗原,
HLAB27与脊柱关节病
脊柱关节病(SpA)属于风湿性疾病的范畴,它是以中轴、外周关节炎以及关节周围组织慢性进展性炎症为主要特点的一组疾病,主要包括强直性脊柱炎(AS)、银屑病关节炎、炎症性肠病关节炎、反应性关节炎和未分化SpA五个亚型。AS是脊柱关节病的最主要疾病,在风湿性疾病中它的发病率(0.3%左右)仅次于干燥综合征
外周血白细胞HLAB27的表达
实验材料 CD3 单抗 HLA-B27 单抗 全血 试剂、试剂盒 溶血剂 多聚甲
HLAb27阴性、阳性与AS的关系
HLA-b27“阴性”“阳性”与AS的关系 据多项研究调查结果显示,强直性脊柱炎患者HLA-B27阳性率高达90%,而普通人群中HLA-B27阳性率仅为4%-9%;HLA-B27阳性者强直性脊柱炎发病率为10%-20%,而普通人群发病率为千分之一到千分之二,相差约100倍。根据国内已有的调查显示,强
关于HLAB27的检测方法介绍
常规检测HLA抗原的方法为Terasaki 和McClelland提出的微量细胞毒实验。单克隆抗体和荧光素的开发使得流式细胞仪在各个领域得到空前的发展,多参数同时测定使得流式细胞术得以快速,灵敏,特异地检测某一特定细胞群中某一特异性抗原的表达。与传统方法相比,用流式细胞仪来检测HLA-B27的表
外周血白细胞HLAB27的表达
实验材料 CD3 单抗HLA-B27 单抗全血试剂、试剂盒 溶血剂多聚甲醛仪器、耗材 流式细胞仪实验步骤 1. 取荧光素 PE 标记的 CD3 单抗及 FlTC 标记的 HLA-B27 单抗 30 μl、EDTAK3 抗凝的全血 50 μl,混匀后室温染色 15 min ( 或 20 min)。2.
外周血白细胞HLAB27的表达
实验材料 CD3 单抗 HLA-B27 单抗 全血 试剂、试剂盒 溶血剂 多聚甲
读懂风湿检查:HLAB27-的那些事儿
HLA 及 HLA-B27 的发现HLA(human leukocyte antigen,人类白细胞抗原)是人类主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility Complex,MHC)的表达产物,根据 HLA 抗原结构、功能及组织分布的不同,分为 I 类、II 类、III 类
关于HLAB27的基本信息介绍
HLA-B27是人体白细胞抗原,属于HLA-B位点之一。HLA-B27基因属于Ⅰ型MHC基因,基本上表达在机体中所有有核的细胞上,尤其是淋巴细胞的表面有丰富的含量。 HLA-B27阳性的健康者与脊柱病病人可能有遗传差别,例如所有HLA-B27个体都有一个恒定的HLA-B27M1抗原决定簇,针对
外周血淋巴细胞HLAB27表达检测
试验原理 HLA-B27属于1型MHC基因。基本上表达在机体所有有核细胞上,特别是淋巴细胞表面有丰富的含量。使用荧光定量标准微球,校正HLA-B27实验条件后,测定样本中T淋巴细胞HLA-B27表达水平。若HLA-B27表达水平大于标准微球设定MARK,则为阳性结果;若HLA-
PCRSSP在造血干细胞移植配型中的应用
人类白细胞抗原(HLA)系统是一组组成和结构都非常复杂的基因复合体。HLA分型首先采用血清学方法,现在DNA分型是常规方法。我们采用序列特异性引物(PCR-SSP)技术对HLA-Ⅰ类基因进行分型,现报告如下。 1 材料与方法 1.1 样本 青岛地区拟进行造血干细胞移植的20例恶
人类血小板抗原1~4系统基因分型
关键词: PCR-SSP;人类血小板抗原;基因分型 摘要 目的:建立人类血小板抗原1~4系统序列特异性引物(PCR-SSP)分型方法。方法:合成14条引物,采用PCR-SSP方法对25名健康献血者的HPA-1~4系统进行基因分型;分型结果与采用等位基因特异性寡核苷酸点杂交(PCR-ASO)获得的
基因芯片技术在肾移植组织配型中的应用
为了比较基因芯片和特异性聚合酶链反应(PCR-SSP)两种HLA-DR分型方法,探讨适用于肾移植供、受者分型的新方法。研究者对60份肾移植供、受者的DNA样本同时采用基因芯片和PCR-SSP进行HLA-DR分型,并进行分析比较。结果60例样本的两种分型方法结果完全一致56份,相同率达93%。结果不相
典型的强直性脊柱炎浅析(二)
病理病因 AS的病因目前尚未完全阐明,大多认为遗传、感染、免疫环境因素等有关。 1、遗传 遗传因素在AS的发病中具有重要作用。据流行病学调查,AS病人HLA-B27阳性率高达90%~96%,而 强直性脊柱炎 普通人群HLA-B27阳性率仅4%~9%;HLA-B27阳性者AS发
人类血小板抗原1~4系统基因分型
迄今,国际上已报道了9个血小板特异性抗原系统,包括人类血小板抗原(HPA)系统1~8以及Naka抗原。这些抗原都是在血小板输注和怀孕介导的同种免疫过程中被发现的。在现代临床输血工作中,为了能给新生儿同种免疫血小板减少症(NAITP)、输血后紫癜(PTP)以及血小板输注无效(PTR)等患者提供正确、及
强直性脊柱炎与HLAB27的关系
HLA是3个英语单词的大写字头,H代表人(Human),L代表白细胞(Leuc ocyte),A代表抗原(Antigen),即人类白细胞抗原(简写为HLA)。HLA是组织细胞上受遗传控制的个体特异性抗原,最早是在白细胞和血小板上发现的,现在发现该抗原广泛分布于皮肤、肾、脾、肺、肠和心等组织器官有核细