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影响DNA分子在琼脂糖凝胶电泳仪中泳动度的因素

影响DNA分子在琼脂糖凝胶电泳仪中泳动度的因素有DNA分子性质、琼脂糖凝胶浓度、电场强度和缓冲液离子强度等。一、DNA分子性质:DNA分子性质包括DNA分子电荷数、大小和空间构型等。1、DNA分子电荷数:一般来说,分子的电荷密度越大,泳动度越大。但不同核酸分子的电荷密度大致相同,因此对泳动度影响不大。在中性或碱性时,单链DNA与等长的双链DNA的泳动度大致相同。2、、DNA分子大小:对于线形分子,分子量的常用对数与泳动度成反比。用标准样品进行电泳并测定其泳动度,然后用DNA分子长度(bp)的负对数对泳动距离作标准曲线,可测定未知分子的长度。3、DNA分子空间构型:DNA分子空间构型对泳动度影响很大。如质粒分子的泳动度大小顺序为共价闭环DNA>直线DNA>开环双链DNA。二、琼脂糖凝胶浓度:不同浓度的琼脂糖凝胶构成的分子筛的网孔大小不同。选择不同浓度的凝胶,可分离不同大小的DNA分子。琼脂糖凝胶适合分离长度为200bp~50kb的......阅读全文

分子生物学常用实验技术(page 1)

第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定 第二章DNA 酶切及凝胶电泳 第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第六章基因组DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技术 第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第九章分

DNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和操作步骤

一、实验目的琼脂糖凝胶电泳是常用的检测核酸的方法,具有操作方便、经济快速等优点。本实验学习DNA琼脂糖凝胶电泳的使用技术,掌握有关的技术和识读电泳图谱的方法。 二、实验原理 琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法,这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物,利用DNA分子在

琼脂糖凝胶电泳实验

【实验目的】学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA 的方法和技术。【实验原理】琼脂糖凝胶电泳技术是DNA 分子片段的分子量测定和分子构象研究以及DNA 分离纯化的重要实验手段。DNA 分子在琼脂糖凝胶电泳中泳动时受到电场驱动力和凝胶的摩擦阻力。一般情况下,单位长度双链DNA 带有几乎相等的电荷,故在

琼脂糖凝胶电泳

   学习琼脂糖凝胶电泳的基本原理;  (2) 掌握使用水平式电泳仪的方法;  (3)掌握核酸琼脂糖凝胶电泳的基本操作  2实验原理  琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小

DNA的琼脂糖凝胶电泳实验

电泳法             实验方法原理 DNA琼脂糖凝胶电泳的基本原理是利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷

DNA的琼脂糖凝胶电泳实验

DNA电泳可用于:(1)分离不同大小的DNA片段;(2)鉴定目的DNA片段;(3)纯化和回收DNA片段。实验方法原理DNA琼脂糖凝胶电泳的基本原理是利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电,在电场中向正极移动,且相同数量的双链

电泳技术

电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。    电泳技术的

琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA

【实验目的】 通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA的原理与方法。 【实验原理】 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种杂聚多糖,是由D型和L型半乳糖以α-1,3和β-1,4糖苷键相连形成的线状高聚物(如下图所示)。琼脂糖遇冷水膨胀,溶于热水成溶胶,冷却后成为孔径范围从50nm到

琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量

一.原理带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。其中,凝胶电泳由于其操作简便、快速、灵敏等优点,使它成为分离、鉴定和提纯核酸的首选标准方法。与蛋白质分子类似,核酸分子也是两性解离分子。在pH3.5时,碱基上的氨基基团解离,而三个磷酸基团中只有第一个磷酸解离,整个分子带正电荷,在电场中向负极泳动;在p

分子生物学常用实验技术(page 3)

分子杂交技术    互补的核苷酸序列通过Walson-Crick 碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA 分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DN

总DNA质量检测及酶切实验

实验目的是了解掌握检测DNA 质量的方法以及DNA定量的方法;了解影响DNA在琼脂糖凝胶中泳动速率的因素;训练DNA的琼脂糖凝胶电泳操作及DNA的限制性内切酶操作。来源:《遗传学实验教程》实验方法原理在pH值为8.0~8.3时,核酸分子碱基几乎不解离,磷酸全部解离,核酸分子带负电,在电泳时向正极移动

DNA指纹图谱分析[DNA Fingerprinting ]

一. 实验目的1. 掌握DNA指纹图谱技术的概念、原理和基本操作过程2. 学习DNA的限制性酶切的基本技术3. 掌握琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术,学习利用琼脂糖凝胶电泳测定DNA片段的长度,并能对实验结果进行分析。二. 实验原理1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的

质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)

带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多,应用非常广泛,它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点,已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的:掌握琼脂糖凝胶电泳的原理,学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料:质粒DNA、BAC、植物总DN

DNA的琼脂糖凝胶电泳

带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多,应用非常广泛,它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点,已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的:掌握琼脂糖凝胶电泳的原理,学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料:质粒DNA、BAC、植物总DN

DNA的琼脂糖凝胶电泳

带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多,应用非常广泛,它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点,已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的:掌握琼脂糖凝胶电泳的原理,学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料:质粒DNA、BAC、植物总DN

DNA的琼脂糖凝胶电泳实验

实验方法原理 在pH值为8.0~8.3时,核酸分子碱基几乎不解离,磷酸全部解离,核酸分子带负电,在电泳时向正极移动。采用适当浓度的凝胶介质作为电泳支持物,在分子筛的作用下,使分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大的差异,从而达到分离核酸片段检测其大小的目的。核酸分子中嵌入荧光染料(如EB)后,在

电泳仪的这些常识你知道吗?

电泳仪的这些常识你知道吗?*节  电泳原理第二节  常用电泳方法第三节  常用电泳仪的基本结构及技术指标       第四节  常用电泳仪简介第五节  毛细管电泳第六节  电泳仪的