正相硅胶反相洗脱色谱仪固定相和流动相简介
正相硅胶反相洗脱色谱仪对碱性药物的保留主要是离子交换机理,不需反相液相色谱仪中复杂的处理手段,碱性药物保留时间大大缩短,拖尾改善,峰形对称,能同时分析极性范围很大的一类药物。一、固定相:采用未改性的原形硅胶为固定相。以普通硅胶作固定相简单方便,不需HPLC众多的键合相就能达到满意的分离效果。在高PH值(PH>8)的水-有机溶剂混合液中,固定相稳定,硅胶不溶于高浓度极性有机溶剂和高pH值的流动相中,可使用数月不影响柱效。二、流动相:以水性溶液作流动相。常用的流动相为甲醇-水相缓冲液和乙腈-水相缓冲液。合适的缓冲剂有三乙胺、甲酸铵-氨水、高氯酸铵-氨水、醋酸铵-氨水和磷酸氢二铵-磷酸等。由于正相硅胶反相洗脱色谱仪利用被测组分与硅醇基相互作用,因此不需要加硅醇基掩蔽剂等特殊添加剂,仅用一两种洗脱液就能对大范围内的碱性药物进行分离分析。由于流动相中含的三乙胺会吸附在硅醇基上,很难用甲醇清洗,所以每次做完样品,先用0.1%冰乙酸冲洗15~......阅读全文
正相硅胶反相洗脱色谱仪固定相和流动相简介
正相硅胶反相洗脱色谱仪对碱性药物的保留主要是离子交换机理,不需反相液相色谱仪中复杂的处理手段,碱性药物保留时间大大缩短,拖尾改善,峰形对称,能同时分析极性范围很大的一类药物。一、固定相:采用未改性的原形硅胶为固定相。以普通硅胶作固定相简单方便,不需HPLC众多的键合相就能达到满意的分离效果。在高PH
正相硅胶反相洗脱色谱仪固定相和流动相简介
正相硅胶反相洗脱色谱仪对碱性药物的保留主要是离子交换机理,不需反相高效液相色谱仪中复杂的处理手段,碱性药物保留时间大大缩短,拖尾改善,峰形对称,能同时分析极性范围很大的一类药物。一、固定相: 采用未改性的原形硅胶为固定相。 以普通硅胶作固定相简单方便,不需HPLC
正相硅胶反相洗脱色谱仪保留机理
正相硅胶反相洗脱色谱仪对碱**物的保留主要是离子交换机理。在高PH值的条件下,硅胶表面弱酸性的硅羟基存在一定的离子化特征,硅胶在高PH值的情况下可作为阳离子交换剂。许多碱性化合物在高PH值(PH = 10)时也能部分质子化。非解离中性脂类和阴离子成分不被硅胶柱保留,在溶剂前沿被洗脱。只有在色谱条件下
正相硅胶反相洗脱色谱仪保留机理
正相硅胶反相洗脱色谱仪对碱性药物的保留主要是离子交换机理。在高PH值的条件下,硅胶表面弱酸性的硅羟基存在一定的离子化特征,硅胶在高PH值的情况下可作为阳离子交换剂。许多碱性化合物在高PH值(PH = 10)时也能部分质子化。非解离中性脂类和阴离子成分不被硅胶柱保留,在溶剂前沿被洗脱。只有在色谱条件下
影响正相硅胶反相洗脱色谱仪保留值的因素
影响正相硅胶反相洗脱色谱仪保留值的因素:一、色谱流动相保持一定的PH值和离子强度。随着流动相中水的比例增加,洗脱能力减小。 二、流动相中三乙胺浓度升高,对含碱性基团组分的洗脱能力提高,保留时间缩短。三乙胺为阴离子竞争离子,用于竞争硅羟基,以消除硅羟基对生物间的吸附。三、碱性组分的保留随缓冲盐浓度的增
正相,反相色谱中固定相,流动相极性有何特点
在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流动相
正相,反相色谱中固定相,流动相极性有何特点
在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流动相
反相键合相色谱仪固定相和流动相的选择
在反相键合相色谱仪中, C18是常用的键合固定相,水是常用的流动相弱组分,重要的是选择流动相的强组分,常用的强组分有甲醇、乙腈和四氢呋喃。反相键合相色谱仪流动相的选择规则如下:一、若样品中含有两个以下氢键作用基团(如-COOH、-NH2和-OH等)的芳香烃邻、对位或邻、间位异构体,可选用甲醇-水为流
正相固相萃取简介
固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)是一种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术。SPE是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。因其具有安全、回收率高,重现性好、
正相和反相色谱仪的用途
正相和反相色谱仪的用途:一、正相色谱:流动相极性小于固定相极性的液相色谱。用于分离溶于有机溶剂的极性和中等极性的分子型物质,用于分离含有不同官能团的物质。二、反相色谱:流动相极性大于固定相极性的液相色谱。用于分离非极性和中等极性的分子型物质。
洗脱正相和反相吸附剂有什么不同?
洗脱正相吸附剂吸附的目标组分时,一般选用非极性有机溶剂(如正己烷、四氯化碳等);洗脱反相吸附剂吸附的目标物质时,一般选用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈、一氯甲烷等);对于离子交换吸附剂,常采用的洗脱剂是高离子强度的缓冲液。
液固吸附色谱仪流动相简介
液固吸附色谱仪中使用的流动相为有机溶剂,主要是非极性的烃类(如己烷和庚烷等),某些有机溶剂(如二氟甲烷、甲醇和三乙胺等)作为缓和剂加入以调节流动相的溶剂强度、极性和PH值。一、正相色谱:液固吸附色谱是正相色谱。流动相溶剂极性越大,洗脱能力越强,溶质保留越小。流动相溶剂极性越小,洗脱能力越弱,溶质保留
液固吸附色谱仪流动相简介
液固吸附色谱仪中使用的流动相为有机溶剂,主要是非极性的烃类(如己烷和庚烷等),某些有机溶剂(如二氟甲烷、甲醇和三乙胺等)作为缓和剂加入以调节流动相的溶剂强度、极性和PH值。一、正相色谱:液固吸附色谱是正相色谱。流动相溶剂极性越大,洗脱能力越强,溶质保留越小。流动相溶剂极性越小,洗脱能力越弱,溶质保留
正相型和反相型固相萃取中常用溶剂的性质
正相型和反相型固相萃取中常用溶剂的性质极性溶剂强度溶剂是否溶于水非极性 极性 强反相 弱反相 弱正相 强正相正己烷否异辛烷否四卤化碳否三卤甲烷否二卤甲烷否二卤甲烷是乙醚否乙酸乙酯差丙酮是乙腈是异丙醇是甲醇是水是乙酸是
固相萃取反相固相萃取
反相固相萃取反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较弱的,主要是靠非极性-非极性相互作用,是范德华力或色散力。
正相色谱中固定相,流动相极性有何特点
在正相色谱中,一般采用极性键合固定相,硅胶表面键合的是极性的有机基团,键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-cn)、氨基(-nh2)、二醇基(diol)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂,如烃类溶剂,或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等),以调节流动相
化学键合相色谱仪分离机理
化学键合相色谱仪的固定相是通过化学反应将各种不同的有机基团以共价键连接到色谱柱载体表面上,形成均一、牢固的单分子薄层。化学键合相色谱仪有正相键合相色谱仪和反相键合相色谱仪。一、正相键合相色谱仪分离原理:正相键合相色谱仪使用的是极性键合固定相。极性键合固定相是全多孔型或表面多孔型微粒硅胶载体经酸活化处
化学键合相色谱仪分离机理
化学键合相色谱仪的固定相是通过化学反应将各种不同的有机基团以共价键连接到色谱柱载体表面上,形成均一、牢固的单分子薄层。化学键合相色谱仪有正相键合相色谱仪和反相键合相色谱仪。一、正相键合相色谱仪分离原理:正相键合相色谱仪使用的是极性键合固定相。极性键合固定相是全多孔型或表面多孔型微粒硅胶载体经酸活化处
固相萃取正相固相萃取
正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的.取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用,其中包括了氢键,π—π键相互作用,偶极-偶极相互作用和偶极-诱导偶极相互作用以及其他的极性-极性作用。
反相键合相色谱法常见的固定相和流动相是什么
在反相色谱法中共价结合到载体上的固定相是一些极性很弱的直链碳氢化合物,如正辛基等。在反相色谱中的流动相极性要很强,而水是极性最强的溶剂。所以常常用水和不同浓度的、可以与水混溶的有机溶剂混合,以得到不同强度的流动相,这些有机溶剂称为修饰剂。反相色谱中最常用的有机溶剂有甲醇和乙腈,此外,乙醇、四氢呋喃、
流动相-固定相
流动相 ——色谱分离过程中携带组分向前移动的物质。固定相 ——色谱分离过程中不移动的具有吸附活性的固体或是涂渍在载体表面的液体。
高效液相色谱流动相和固定相
液相色谱有正反之说,所以流动相和固定相也有类似的分类。1.先说流动相:a.反相流动相:有机相甲醇、有机相乙腈、水相缓冲盐。缓冲盐的范围实在是太广了,磷酸盐缓冲液,醋酸盐缓冲液等等b.正相流动相:乙醇、四氢呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱b.正相:氨基柱、氰
气相色谱术语(固定相和流动相)
1、 固定相:stationary phase 色谱柱内不移动的、起分离作用的物质。2、 吸附剂:adsorbent 具有吸附活性并用于色谱分离的固体物质。3、 固定液:stationary liquid 固定相的组成部分,指涂渍于载体表面上起分离作用的物质,在操作温度下是不易挥发的液体。4、 载体
何谓正相色谱和反相色谱
1、正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱内保留时间的差异,使不同物质得到分离。应用特点:正相色谱一般用来分离中性化合物和离
关于SPE正相和反相萃取
固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE),也称固相提取,是一种基于液-固色谱分离,对目标化合物可以进行选择性吸附、选择性洗脱的前处理技术。根据其保留机制,作用力主要分为非极性相互作用、极性相互作用、离子交换作用(静电吸引力)。离子交换小柱针对的是可解离的带电物质,在农残、
反相高效液相色谱的固定相是什么,流动相有什么
反相高效液相色谱的固定相是非极性溶剂,常见的固定相是十八烷基键合硅胶,流动相是极性溶剂,常见的流动相是甲醇,乙腈。反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶,
反相键合相液相色谱仪流动相概述
反相键合相液相色谱仪流动相溶剂极性越低,洗脱能力越强。一、常用流动相:1、甲醇-水。2、乙腈-水。3、四氢呋喃-水。溶剂强度为水<甲醇<乙腈<四氢呋喃。系统2较系统1好,原因如下:系统2的粘度较系统1小,柱效好。粘度降低,柱压降低,传质阻力降低(溶质扩散阻力降低), 柱效升高。乙腈的紫外末端吸收较甲
固相萃取技术保留和洗脱
保留和洗脱在固相萃取中最通常的方法是将固体吸附剂装在一个针筒状柱子里,使样品溶液通过吸附剂床,样品中的化合物或通过吸附剂或保留在吸附剂上(依靠吸附剂对溶剂的相对吸附)。“保留”是一种存在于吸附剂和分离物分子间吸引的现象,造成当样品溶液通过吸附剂床时,分离物在吸附剂上不移动。保留是三个因素的作用:分离
液相色谱仪流动相和固定相选择标准
色谱柱是色谱仪分析系统中的核心,色谱柱分离度会影响到检测结果的速率和准确性。美国药典对色谱法规定较严,它规定了色谱柱的长度,填料的种类和粒度,填料分类也较详细,这样使色谱图易于重现;而中国药典仅规定填料种类,未规定柱的长度和粒度,这使检验人员难于重现实验,在某些情况下还浪费时间和试剂。因此,在液相色
固相萃取柱的三个特性
固相萃取柱可分为以下三类及特性: 1、正相固相萃取 固定相(填料):极性物质。 分离对象:极性、中等极性、非极性 流动相(洗脱剂):非极性、中等极性 吸附剂与化合物间作用力:氢键,π—π键等 常用正相固相萃取柱:①极性官能团键合硅胶;②极性吸附物质 2、反相固相萃取 固定相:非极性