诱导动物细胞融合的方法有哪些
在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。 病毒诱导融合 病毒是*早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒*常用。用作融合剂的病毒必须事先用紫外线或β-丙内酯灭活,使病毒的感染活性丧失而保留病毒的融合活性。 用灭活的仙台病毒诱导细胞融合的 优点:融合率较高,对各种动物细胞都适宜,且仙台病毒能在鸡胚中大量繁殖,容易培养; 缺点:仙台病毒不稳定,在保存过程中融合活性会降低,并且制备过程比较烦琐。此外,病毒引进细胞后,可能会对细胞的生命活动产生干扰。 聚乙二醇PEG诱导融合 聚乙二醇PEG具有强烈的吸水性以及凝聚和沉淀蛋白质的作用,能够有效地促进植物原生质体和动物细胞的融合。在不同种类的动物细胞混合液中加入聚乙二醇,就会发生细胞凝集作用;在稀释和除去聚乙二醇的过......阅读全文
细胞融合的融合过程介绍
细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个相互
细胞融合技术电融合法
在直流电脉冲的诱导下,细胞膜表面的氧化还原电位发生改变,使异种细胞粘合并发生质膜瞬间破裂,进而质膜开始连接,直到闭和成完整的膜,形成融合体。优点:融合率高、重复性强、对细胞伤害小;装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察融合过程;免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控性强。
什么叫融合基因-融合基因介绍
1、所谓融合基因,是指将两个或多个基因的编码区首尾相连。置于同一套调控序列控制之下,构成的嵌合基因。融合基因的表达产物为融合蛋白。根据构成融合基因的种类,可以将融合基因分为...1、所谓融合基因,是指将两个或多个基因的编码区首尾相连。置于同一套调控序列控制之下,构成的嵌合基因。融合基因的表达产物为融
细胞融合技术电融合法
在直流电脉冲的诱导下,细胞膜表面的氧化还原电位发生改变,使异种细胞粘合并发生质膜瞬间破裂,进而质膜开始连接,直到闭和成完整的膜,形成融合体。优点:融合率高、重复性强、对细胞伤害小;装置精巧、方法简单、可在显微镜下观察或录像观察融合过程;免去PEG诱导后的洗涤过程、诱导过程可控性强。
动物细胞培养
动物细胞培养 基本练习 2.2 无菌技术I:吸取与移液 练习2 细胞培养介绍 2.2 无菌技术I:吸取与移液 练习3无菌技术II:准备培养基 练习4:单层细胞的换液 练习5:玻璃器皿的清洗和灭菌 练习
细胞融合技术的融合方法介绍
同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。仙台病毒法融合①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和Mg2+,最适PH为8.0
原生质体融合的融合过程介绍
将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理,得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B,运用物理方法或是化学方法诱导融合,形成杂种细胞,再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。①杂交时间:植物细胞杂交是从细胞融合开始,到培育成的新植物体结束。a.原生质体制备:用酶解法去除细胞壁(纤维素酶和
乳牙融合及其继承恒牙融合病例分析
融合牙(fused teeth)是一种发病率较低的牙齿发育异常类疾病。常见于乳牙,国外报道其发生率为0.5%~4.95%,国内报道为2.31%~3.04%;而发生于恒牙者更少见,有研究报道年轻恒牙融合牙的发生率在0.14%~0.17%。乳牙为融合牙者常并发其中一颗继承恒牙先天缺失,而继承恒牙亦为融合
细胞融合的融合方法有哪些?
同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。仙台病毒法融合①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和Mg2+,最适PH为8.0
动物细胞培养和动物细胞培养的区别有哪些?
1、培养基不同:植物细胞(固体培养基),动物细胞(液体培养基)。 2、培养基的成分不同:动物细胞培养必须利用动物血清,植物组织培养则不需要,而需要加入植物生长素。 3、产物不同:植物组织培养最后一般得到新的植物个体,而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性,因此得到的是只含同一种的细
培养两栖动物细胞与哺乳动物细胞区别
1.培养两栖动物细胞与哺乳动物细胞区别在培养液上,也就是血浆的不同,其它的一样;2.培养两栖动物体细胞比哺乳动物细胞难养,原因在于两栖动物个体都较小,血浆制备较难;3.原代培养的话,两栖动物细胞用两栖动物的血浆,哺乳动物细胞用哺乳动物的血浆,(同物种个体上取下的血浆,最好自体上取下的)和其它营养物质
细胞融合技术仙台病毒法融合
仙台病毒法融合①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和Mg2+,最适PH为8.0一8.2;③细胞膜连接部穿通,周边连接部修复,此时需Ca2+和ATP;④融合成巨大细胞,仍需ATP。
动物细胞培养1
动物细胞的培养对(1)动物体外细胞实验较体内实验便利可多次使用具有广泛的用途(2)药物和病毒等的机制研究(3)临床前实验等的研究。实验材料动物细胞试剂、试剂盒水磷酸盐缓冲液PH试纸仪器、耗材移液管细胞培养基紫外灯玻璃器皿
动物细胞培养7
无Ca2+和Mg2+的 Dulbecco 磷酸盐缓冲液(D-PBSA)的制备与灭菌实验方法原理目的在常压下使用的等渗盐溶液的制备。应用用于稀释浓缩液.如稀释2.5%腆蛋白酶;胰蛋自酶消化前的预漂洗,收集细胞或换试剂时的清洗溶液。因为它不含Can+和Mg汁,NaHCO3或葡萄糖,所以不适合长时间孵育。
动物细胞的的作用
细胞核 :是细胞的控制中心,在细胞的代谢、生长、分化中起着重要作用,是遗传物质的主要存在部位。尽管细胞核的形状有多种多样,但是它的基本结构却大致相同,即主要是由核膜、染色质、核仁和核骨架构成。 高尔基体:主要功能将内质网合成的蛋白质进行加工、分类、与包装,然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌
动物细胞培养方法
体外培养的动物细胞可分为原代细胞与传代细胞。原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞,进行传代培养后的细胞即称为传代细胞。 任何动物细胞的培养均需从原代细胞培养开始。动物很多组织的细胞,如幼年动物的肾、肺、卵巢、精巢、肌肉及肿瘤等组织的细胞较易培养,而神经细胞等则较难培养。原代细胞培养步骤如下:首先取
细胞电融合
细胞电融合的优势在于(1)融合率高(2)无毒性(3)操作简便(4)融合后的细胞继续培养成活率高等。动物的游离细胞以及植物成微生物去壁后的原生质体,在电刺激下进行细胞融合,是细胞工程手段的又一进展。实验方法原理将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,
细胞电融合
实验方法原理 将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,造成细胞之间相互连接,如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用时间过长,则细胞连接成串珠状,应适当控制以上条件,尽量使两细
细胞融合
一、原理 细胞融合(Cell fusion),即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。人工诱导的细胞融合,在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合,也能产生种间细胞的融合,因此细胞融合技术目前被广泛应用于细胞生
细胞电融合
实验方法原理 将制备的游离细胞或原生质体,置于电融合室中,在高频交流电场的作用下,细胞被极化,成为偶极子,造成细胞之间相互连接,如果施加的高频交流电压(即正弦波的p-p值)过高或作用时间过长,则细胞连接成串珠状,应适当控制以上条件,尽量使两细
细胞融合
一、原理 细胞融合(Cell fusion),即在自然条件下或用人工方法(生物的、物理的、化学的)使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的过程。人工诱导的细胞融合,在六十年代作为一门新兴技术而发展起来。由于它不仅能产生同种细胞融合,也能产生种间细胞的融合,因此细胞融合技术目前被广泛应用于细胞生
细胞融合技术仙台病毒法融合法
①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和Mg2+,最适PH为8.0一8.2;③细胞膜连接部穿通,周边连接部修复,此时需Ca2+和ATP;④融合成巨大细胞,仍需ATP。
细胞融合的融合过程及研究进展
融合过程 细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-
生物与信息融合(BT与IT融合)重点专项启动
近日,由暨南大学附属第一医院教授张水兴牵头承担的国家重点研发计划“生物与信息融合(BT与IT融合)”重点专项——“基于多尺度跨时空异构数据构建肿瘤乏氧数字孪生系统”项目启动仪式暨实施工作方案论证会在广州召开。中国工程院院士、暨南大学校长邢锋在致辞时表示,学校对项目的开展予以高度重视,将在人才团队构建
体细胞融合实验——悬浮培养细胞的融合
实验材料细胞试剂、试剂盒PEG1000仪器、耗材离心管实验步骤1. 从无血清培养基中沉淀杂交前体细胞。2. 倒尽上清。3. 用手指弹拨管底或双手搓转离心管,使细胞重新悬浮。4. 加入 1 ml PEG1000,待 2 分钟。5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培养基稀释 PEG。于室温,20
体细胞融合实验——单层培养细胞的融合
实验材料细胞试剂、试剂盒PEG-1000仪器、耗材培养基实验步骤1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度(80% 汇合率)。2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基,加 2 ml 50% PEG-1000,轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。3. 往培养皿或瓶中
动物细胞培养——基本练习
实验方法原理这部分是一名实习生或学生应当首先接触的内容。大部分是简单易懂并易于操作的,为了使实验比较有趣,操作方案和备选方案以相互参考的方式详细列出。每一个操作方案中材料部分的指定数量见操作说明,但可以按比例调节。表2.1中黑体部分的练习是必需的。首先有必要参观介绍组织培养的设施,这可以使实习生.见
论动物细胞的灌注培养
动物细胞的培养技术自上世纪初出现以来,经历了一个多世纪的发展,获得了很大的进步。不仅建立了许多细胞系和培养了许多类型的原代细胞,而且开发了人工合成培养基和无血清培养基,并且出现了细胞工程,哺乳动物细胞的大规模培养获得了工业化的应用,用于生产重组蛋白、单克隆抗体等生物药、载体病毒、病毒性疫苗等。开发了
动物细胞培养的简介
在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。 ⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。 ⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用
动物细胞大规模培养介绍
所谓动物细胞大规模培养技术(large-scale culture technology)是指在人工条件下(设定pH、温度、溶氧等),在细胞生物反应器(bioreactor)中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。目前可大规模培养的动物细胞有鸡胚、猪肾、猴肾、地鼠肾等多种原代细胞及人二倍