TLC爬板为什么有时会爬歪?

(1)可能是板子没有放平;(2)可能是板子一边贴到展缸壁,造成了虹吸现象,一边爬的快,一边慢,扩散后就变歪了。......阅读全文

原位TLCFTIR法

该方法是采用红外漫反射光谱(DRIFTS)测定法对TLC板上的色谱斑点进行直接检测,最初是在1975年由Percival和Griffiths报道的。傅里叶红外光谱仪的漫反射装置见图11-6-25。一般在未点样前先测得薄层板背景光谱图,点样层析后再测得同样位置的分离谱带的红外光谱图,前后谱图经差谱可得

TLC的原理是什么

薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。一方面适用于小量样品(几到几十微克,甚至0.01μg)的分离;另一方面若在制作薄层板时,把吸附层加厚,将样品点

TLC洗脱剂(流动相)

洗脱剂(流动相)以硅胶TLC片来说,洗脱剂的强度比较为:全氟烷(最弱)<己烷<戊烷<四氟化碳<苯/甲苯<二氯甲烷<乙醚<乙酸乙酯<乙腈<丙酮<2-丙酮/正丁醇<水<甲醇<三乙胺<乙酸<甲酸(最强)而对于C18覆盖的TLC板,其顺序完全相反。在应用中,若使用乙酸乙酯/庚烷的混合溶剂作为流动相,乙酸乙酯

TLC的通用显色方法

TLC的通用显色方法理想的显色希望灵敏度高,斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好,斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比,在样品组成并不完全已知的情况下,通用显色方法显得尤为重要,通用显色方法主要有:1)、紫外照射法:方便、不破坏样品;2)、碘蒸气法:通用性强,与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用;

TLC薄层色谱法

薄层色谱法,又简写为TLC,常用于中药成方制剂中有效成分的定性鉴别。由于该方法鉴别专属性强,使用设备简单,易于操作,故应用广泛,在目前的药品质量标准定性鉴别中(如中国药典和食品药品监督管理局标准),已大大地超过了显微鉴别、理化鉴别和光谱鉴别。

TLC中干法装柱

干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧(湿法也要敲的,效果好点),至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实(一般柱子不敢用油泵抽,怕把柱子抽裂了)。接着是用淋洗剂"走柱子",一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一

TLC中湿法装柱

湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压(土方法可以用养鱼的氧气泵加压或是用氮气,当然不加压也可以)用淋洗剂"走柱子",本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡。 (我一般都用湿法装柱)

TLC基本参数

基本参数1.比移值(Rf)=原点至组分点中心的距离/原点至流动前沿的距离。如图:组分A的Rf=a/l;组分B的Rf=b/l。2.相对比移值,即相对某一物质X的Rf值,用Rx表示。其定义为:Rx=组分的Rf值/物质x的Rf值,组分A相对于物质B的“相对比移值” RB =a/b

细胞爬片可以重复使用吗

不建议重复使用,处理起来较为麻烦。师兄用的晶安生物12孔板细胞爬片还可以,希望可以帮到您。

盖玻片能替代细胞爬片吗

不可以,细胞爬片是处理过的,

细胞爬片免疫荧光实验步骤

第一天:1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min(细胞膜上表达的抗原省略此步骤);4. PBS浸洗玻片3次,每次3 min

薄层层析(TLC)方法(二)

薄层层析是将吸附剂或者支持剂(有时加入固化剂)均匀地铺在一块玻璃上,形成薄层。把欲分离的样品点在薄层上,然后用适宜的溶剂展开,使混合物得以分离的方法。由于层析在薄层上进行故而得名。  薄层层析是一种微量、快速的层析方法。它不仅可以用于纯物质的鉴定,也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。还可以通过薄

TLC显色试剂及配方大全

显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。l.通用显色剂 ①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mo

薄层层析(TLC)方法(一)

  薄层层析是将吸附剂或者支持剂(有时加入固化剂)均匀地铺在一块玻璃上,形成薄层。把欲分离的样品点在薄层上,然后用适宜的溶剂展开,使混合物得以分离的方法。由于层析在薄层上进行故而得名。  薄层层析是一种微量、快速的层析方法。它不仅可以用于纯物质的鉴定,也可用于混合物的分离、提纯及含量的测定。还可以通

薄层色谱法(TLC)简介

简介   1.定义:薄层色谱法(Thin Layer Chromatography,TLC)通常指以吸附剂为固定相的一种液相色谱法。即将固定相在玻璃、金属或塑料等光洁的表面上均匀地铺成薄层,试样点在薄层的一端,流动相借毛细作用流经固定相,使被分离的物质展开。    2.原理:薄层色谱是吸附色谱,展开

TLC展开剂的选择

TLC与HPLC相比,一个突出的优点就是流动相的选择具有更大的灵活性,流动相的选择的目的是使绝大部分样品的Rf值位于0.1-0.7之间并达到较好的分离,与此对应的是流动相要有适当的强度和组成。流动相强度越大,溶质Rf值越大,但很可能降低分离能力;另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物、根据相似相溶原理,

TLC显色试剂及配方大全

显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。 l.通用显色剂 ①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1

酶标板、培养板、pcr板、深孔板、血清板,各种板的用法比较

1.酶标板酶标板是一种配在酶标仪上做酶联免疫实验用的板子,常用的为96孔,主要是为了配合酶标仪所设计,另外还有48孔的,但不常用。在酶联免疫实验中,抗原、抗体和其它生物分子通过多种机制吸附至酶标板表面,然后于受检样本和酶标抗原或抗体按不同的步骤进行反应,通过酶标仪来进行检测。2.培养板培养板是用来培

细胞爬片全过程经验总结

1.  爬片可用一般的盖玻片,也可用爬片; 2.  应用盖玻片,可根据自己的需要剪裁成合适的大小,以备置于 6 孔板、12 孔板或 24     孔板;裁剪时可用前护士输液用于打开玻璃安瓶的小沙轮,或者是口腔科的那种小沙轮,轻轻划一下后,稍用力一掰就分开了。 如果接种大皿的话,我一般不将盖玻片切开,

关于细胞爬片的一些小知识

么叫细胞爬片?细胞爬片就是让玻片浸在细胞培养基内,细胞在玻片上生长,主要用于组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等.LANSO细胞爬片特点:1.TC处理(细胞贴壁处理,利于细胞贴壁),双面均可使用.2.γ射线灭菌,保证无菌.3.使用便捷,只需打开包装,将爬片放入孔板内,将细胞悬液滴到爬

TLC柱层析中硅胶的使用

 硅胶的使用初做柱层析很容易把柱子装得长了或短了,有时还会有大量的硅胶剩余,浪费硅胶,这主要是对硅胶等固定相的使用的量没有掌握。柱层析用的硅胶一般是 100-200 目,100 毫升硅胶的质量在47 克左右,如果装一个直径是 2.8 厘米的柱子,可以装 18 厘高。为了避免浪费硅胶和溶剂,最初学习装

肺总量(tlc)的临床意义

  异常结果:  增加:见于肺气肿,老年肺。  降低:导致限制性通气障碍的各种情况使肺总量明显降低。  注意:肺总量正常不一定代表肺功能正常,因肺活量和残气量的增减可互相弥补。  需要检查人群:  有紫绀,呼吸异常症状的病者。  结果偏高可能疾病:阻塞性肺气肿 、 肺气肿。

什么叫TLC检测反应历程

薄层色谱 薄层色谱 又叫 薄板层析 ,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发

如何减少TLC的边缘效应?

  增加层板缸中溶剂蒸气浓度,在层板缸内壁贴上浸湿展开剂的滤纸或选择内径和长度适宜的层析缸进行层析;选择适宜的单一溶剂代替混合溶剂;采用共沸溶剂代替一般混合溶剂。

肺总量(tlc)的注意事项

  检查前要求:  在检查前两天,需停用一切 支气管扩张的药物,如舒喘灵、帮备、美普清、氨茶碱、舒弗美葆乐辉、阿斯美、爱喘乐等,否则会影响检查结果。  检查时注意:  告知医生服药史及病史。  不适宜人群:  哮喘患者需要咨询医生意见。

TLCFTIR联用技术的应用

Yamamoto等人于1991年报道了成功应用自动洗脱物转移接口装置分析了咖啡因,非那西汀和那可汀混合物的实例,所用谱仪为配备漫反射附件的Shimadzu 4200 FTIR光谱仪。图11-6-28中(a)为TLC分离的各组分(对应不同比移值Rf)的UV色谱图(220nm),(b)为转移后的

TLC柱层析上样的技巧

上样的技巧上样也有湿法和干法之分: 湿法一般用淋洗剂溶解样品, 也可以用二氯甲烷、 乙酸乙酯等, 但溶剂越少越好。再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁缓慢地均匀加入。在不用海沙的情况下, 尽量不要破坏硅胶面。加样后, 打开柱底活塞, 让固定相充分地吸附所加样品。然后再加入一些洗脱剂,再充分地吸

如何减少TLC的边缘效应

增加层板缸中溶剂蒸气浓度,在层板缸内壁贴上浸湿展开剂的滤纸或选择内径和长度适宜的层析缸进行层析;选择适宜的单一溶剂代替混合溶剂;采用共沸溶剂代替一般混合溶剂。

薄层层析(TLC)实验操作步骤

薄层色谱(TLC )是一种非常有用的跟踪反应的手段,还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶,它们是极性很大(标准)或者是非极性的(反相)。流动相则是一种极性待选的溶剂。在5.301中以及大多数实验室实验中,都将使用标准硅胶板。将溶液中的反应混合物点在薄板上,然后利用

TLC中展开剂的选择

展开剂的选择TLC与HPLC相比,一个突出的优点就是流动相的选择具有更大的灵活性,流动相的选择的目的是使绝大部分样品的Rf值位于0.1-0.7之间并达到较好的分离,与此对应的是流动相要有适当的强度和组成。流动相强度越大,溶质Rf值越大,但很可能降低分离能力;另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物、根据相