iTRAQ技术常见问题与答疑

1、什么是iTRAQ? iTRAQ技术,即同位素相对标记与绝对定量技术。该技术可对复杂样本、细胞器、细胞裂解液等样本进行相对和绝对定量研究,具有较好的定量效果、较高的重复性。由于其能够同时对多达8种样品进行标记分析,故在生命科学的各个领域得到了广泛的应用。2、iTRAQ的原理是什么? iTRAQ的检测可以做这样的比喻,蛋白被打成肽段后,被平均的铺在了一个有384个孔的平板上,然后机器会从每个孔中选取浓度在前5名的蛋白进行鉴定和比对,所以,如果假设每个一个样本中有100个蛋白,他们的浓度均为1%,那么得到的结果就是蛋白的得分低,但是鉴定的蛋白数量会很多,可以达到90以上;如果一个样本中有100个蛋白,有3个蛋白的含量分别为30、20、10、其他的97钟蛋白为剩下的50%,那么这三种蛋白的得分高,但是鉴定出的蛋白数量会比较少,也许只有50或者60个。因为......阅读全文

iTRAQ技术常见问题与答疑

1、什么是iTRAQ?    iTRAQ技术,即同位素相对标记与绝对定量技术。该技术可对复杂样本、细胞器、细胞裂解液等样本进行相对和绝对定量研究,具有较好的定量效果、较高的重复性。由于其能够同时对多达8种样品进行标记分析,故在生命科学的各个领域得到了广泛的应用。2、iTRAQ的原理是什么?   

眼科标本培养常见问题答疑

问:眼科标本中分出的细菌虽然第一位是表葡,但是这里真正致病菌的比例大概有多少?眼部标本表葡实验室需要做药敏还是提示即可?答:除了个别医院或实验室百分之七八十都是表葡值得怀疑外,大部分不能算污染,眼科医生或实验室人员认为眼部细菌感染菌谱构成比中一半左右算是可以接受,我院在近年统计中显示约占百分之三四十

蛋白质定量技术――iTRAQ

摘要:同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术是近年来最新开发的一种新的蛋白质组学定量研究技术,具有较好的定量效果、较高的重复性,并可对多达四种不同样本同时进行定量分析。研究人员采用iTRAQ蛋白质定量技术加速蛋白质的定量研究,当然这门新兴的工具仍然需要进一步的完善。    仅仅知道蛋白质的身

iTRAQ技术研究植物胁迫

Comparativeproteomic analysis of the shoot apical meristem in maize between aZmCCT-associated near-isogenic line and its recurrent parent.文献来源:htt

瓷珠菌种保存法常见问题答疑

   1、菌种保存管能保存霉菌及酵母菌吗?   答:可以。对于霉菌等真菌需培养7 天进行保存,而酵母菌需培养三天将孢子洗脱下来进行保存,保存管中的小瓷珠可以作为介质来吸附孢子和菌丝,相当于砂土保存法中砂土作为载体起到的作用。   2、所有的菌都能保存吗?如果不是的话,什么样的菌可以保存?什么样

血栓与止血检验答疑

第一个问题:   “APTT延长纠正试验和狼疮抗凝物中的混合血浆试验(1:1),需要考虑病人血浆加入对照血浆造成稀释引起的误差吗?如果做1:4的稀释是否可减少这种误差?”——高铭建,泰安医院    你好,我理解你主要是想问患者血浆与正常混合血浆1:1混合这个操作,是否影响试验对狼疮抗凝物的检出敏感度

原子吸收常见问题答疑第111120问

  111、用5ml硝酸消解1.0g左右的水产品,消解比较完全,但是消解后稀释定容到25ml那样的硝酸浓度有20%....好象太高了 ,对石墨炉也不好。可稀释太多检测浓度又太低。是一个样品微波消解后,同时用来测定铅;镉;汞。  答  1. 只要酸度有影响测定前就要赶酸。  2. 要赶酸影响仪器和测定

SWATH技术常见问题与解答

   SWATH(Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra)采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX(全球领先的生命科学分析技术公司)的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术,科学家有史以来首次可

SWATH技术常见问题与解答

SWATH(Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra)采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX(全球领先的生命科学分析技术公司)的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术,科学家有史以来首次

【Sci-Rep-IF5.228】iTRAQ技术研究植物胁迫

  associated near-isogenic line and its recurrent parent.   文献来源:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27468931   研究背景:ZmCCT,是影响植物光周期反应非常重要的一个基因。对于玉米而

OB免疫及化学检测方法中的常见问题及答疑

    1、为什么说“半定量双联法”是检测便隐血的最佳方法?如何进行结果判断?    答:可分别参见表1和2表1免疫法化学法特异性高低灵敏度(ug/g stool)高(0.1)较高(50)对上消化道出血的漏检(检出率)会(约60%)不会(100%)钩状效应(Hook’s效应)有无半定量不能能检测成本

检测实验室常见问题答疑,干货都在这里!

  1. 企业内部实验室通过CNAS认可,可否作为第三方对外出具证书报告?  答:CNAS认可,是对实验室能力的认可,可否作为第三方机构对外出具证书报告,还要符合国家法律法规的要求。例如国家计量法规定作为第三方检测机构对外出具检测报告要通过计量认证。  2. 如何定义“多地点实验室”?同城,但试验场

基于iTRAQ技术鉴定梭子蟹中与生长相关的差异表达蛋白

  梭子蟹广泛分布在韩国,日本,中国和东南亚的沿海水域。这种物种栖息在河口和沿海水域。 在中国,它是一种主要的食用蟹种和重要的渔业资源,也是中国重要的养殖物种。目前关于梭子蟹的研究已经很广泛,但关于其遗传背景信息的研究亟待深入。目前为止,关于梭子蟹蛋白质组学的研究比较少。  在这项研究中,中国水产科

定量蛋白质组表达谱分析技术——iTRAQ/TMT

iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags)技术是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术。这两种技术采用2-10种稳定同位素标签,通过特异性 标

定量蛋白质组表达谱分析技术iTRAQ/TMT

  iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags)技术是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术。这两种技术采用2-10种稳定同位素标签,通过特异性 标记多肽的

刚刚!中国器审发布2项技术答疑

  【问】定性检测试剂的干扰试验结果是否可仅采用阴阳性表示?  【答】干扰试验一般采用配对比对的方式,比较含有高浓度干扰物质的样本与不含或含正常浓度干扰物质样本(对照)检测结果的差异。对于可给出量值数据(如OD值、Ct值等)或计数结果的定性检测试剂,建议对数值进行差异分析,不可仅采用阴阳性表示干扰试

噬菌体展示技术常见问题与解答

  1、在噬菌体展示技术的应用中,M13噬菌体与其他噬菌体比有什么优点?    M13噬菌体和与其密切相关的丝状噬菌体fd和f1均为非裂解性噬菌体,它们在增殖期间均不裂解宿主菌。这就极大地简化了每轮淘选过程之间的中间噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法就足以将噬菌体与其他所有污染的细胞蛋白分开

PCR技术(五):常见问题分析与对策

PCR产物的电泳检测时间  一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带  PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。  模板:①模板中含有杂蛋白质,②模

免疫荧光技术常见问题与解答

1、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项? 参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是: (1)选取一抗时要来源于两种不同的动物,我用的是来源于rabbit和rat的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是donkey anti-rabbit-F

免疫组化技术要点与常见问题

在免疫组化过程中,为了更好的说明问题和查找原因,最好设置阳性对照片(已知的高表达相应抗原的组织)和阴性对照组织片(不加一抗但是加二抗系统/不加任何 抗体两组),所有操作过程应完全一致。 染色弱或者没有染色(按照先后顺序,先排除一些简单的原因):

高分辨TEM答疑

1.TEM-EDS与XPS测试时采样深度的差别?    XPS采样深度为2-5nm,我想知道EDS采样深度大约1um。 1.jpg   2.Z衬度像是利用STEM的高角度暗场探测器成像,即HAADF。能否利用普通ADF得到Z衬度像?   原子分辨率STEM并不

高分辨TEM答疑

  1.TEM-EDS与XPS测试时采样深度的差别?   XPS采样深度为2-5nm,我想知道EDS采样深度大约1um。  2.Z衬度像是利用STEM的高角度暗场探测器成像,即HAADF。能否利用普通ADF得到Z衬度像?  原子分辨率STEM并不是HAADF的ZL,ADF或明场探头也可以做到,只是可

技术答疑:放免和酶联免疫试验的区别

先说区别:(1)放射免疫分析(RIA)通过放射活性分子共价交联至抗体或抗原上,免疫反应后测定放射活性分子的放射信号来定量检测相应抗体或抗原等,可用于测定包括病毒、细菌、寄生虫、肿瘤以及小分子药物等的多种抗原和抗体。由于该方法特异性好,灵敏度高,且仪器自动化,操作简便,样品制备简单等,因而自50年代末

利用蛋白质组学技术(iTRAQ)研究不同育性的油松胚胎

   【APT出品】做组学,发文章 so easy!   Differential proteomic analysis revealing the ovule abortion inthe female-sterile line of Pinustabulaeformis Carr.   

利用蛋白质组学技术(iTRAQ)研究不同育性的油松胚胎...

利用蛋白质组学技术(iTRAQ)研究不同育性的油松胚胎在蛋白质层面的表达差异Differential proteomic analysis revealing the ovule abortion inthe female-sterile line of Pinustabulaeformis Car

“BCEIA金奖”申报答疑

   分析测试百科网讯  2017年6月27日,BCEIA金奖负责人汪正范老师通过分析测试百科网Webinar平台,向各企业负责人解答了企业关于BCEIA申报的流程规则、材料填报的诸多疑问,点击图片查看视频:   有更多的问题请及时联系负责人:      联系人:翟若木、汪正范   电 话:010-

液氮罐是否需要检查答疑

液氮罐是否需要检查答疑我们经常接触的液氮罐,无论是哪一种类型,经常使用都需要经常检查、清洗、维护,但有些怕麻烦的用户,会说不检查行不行?对罐子有没有影响?答:液氮罐不管是使用,还是不使用,都要经常检查罐体,真空度,颈塞等方面。液氮罐的罐体:我们可以用手触摸感觉罐体外表温度,如果发现罐口周围的金属部分

农药残留检测操作答疑

  Q:在部分的蔬菜前处理中,样品提取液的颜色较深或比较浑浊对检测结果会有影响吗?应该如何处理?  A:一般情况下,绝大部分的蔬菜瓜果的样品提取液均为有少量颜色的澄清液,此种情况对检测结果无影响;但也有小部分样品的提取液会出现色素较多或较浑浊的情况,对于此部分样品,建议用户向样品提取液添加少量活性炭

欧盟CEP认证相关问题答疑

  问:由于药典上没有杂质定量的分析方法,所以公司自行开发了分析方法以控制杂质,并进行了验证。但就在验证后,药典论坛公布了新的杂质定量控制方法,并与EP6.7共同公布实施。   于是,公司做了10个批次产品两种分析方法的对比实验,请问这是否算交叉实验?如果两种方法都能有效控制杂质,申报材料中是否需

拉曼光谱答疑总结(二)

  十一、1 红外分析气体需要多高的分辨率?  2 拉曼光谱仪是否可分析纯金属?  3 红外与拉曼联用,BRUKER和NICOLET哪个好些?  1,分析气体时理论上最高只需0.5cm-1。实际应用上绝大部分情况下4cm-1已足够。对于气体,还是希望分辨率高一些好,一般都用1cm-1一下,这样对气体