细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始(二)

要想达到细胞培养用水的水质要求,纯水机的配置非常关键,带有消毒模块的纯水水箱、终端过滤器、取水水质的实时监测等配置都关系着产水水质是否达标。纯水的储存对保持纯水的质量是至关重要的,由于周围环境和空气中的二氧化碳更容易使水污染改变其pH,所以储存水的容器要尽量密封,避免和外界过多接触,抑制微生物生长。如Genie纯水设备可以提供的纯水水箱带有紫外消毒模块和去除二氧化碳的过滤器,能够最大限度的保证水箱内的纯水水质。水箱空气过滤器(含CO2吸附剂)200/350L 水箱空气过滤器主控屏显示水箱水循环状态终端滤器可用于去除纯水中特定类型的污染物,满足不同实验的应用需求。对于细胞体外培养可以选用RephiBio Filter 纯水终端过滤器,安装在乐枫超纯水系统的出水口,可有效去除水中的热原(内毒素)、核酸酶、细菌等杂质,制备符合细胞培养用水要求的超纯水(无热原、无DNase、无RNase、无菌)。对于超纯水而言需要格外注意终端水质的TO......阅读全文

肿瘤细胞体外传代培养及保种

肿瘤细胞体外传代培养及保种可应用于:(1)研究癌变机理;(2)抗癌药检测;(3)癌分子生物学研究。实验方法原理肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,是比较容易培养的细胞。癌细胞形态不规则,细胞界限清晰,对营养要求不高,在体外培养可无限制传代而不凋亡。体外培养的细胞一旦建立细胞系就需要进行一系列细胞生物

视神经少突胶质细胞体外培养纯化及鉴定

1.材料和方法 1.1 DMEM/F12条件培养液(亚硒酸钠40μg·L-1,腐胺16.2 mg·L-1,转铁蛋白100 mg·L-1,胰岛素234U·L-1,甲状腺素0.4μg·L-1,黄体酮0.62 mg·L-1,谷氨酰胺3g·L-1)。DMEM/F12培养基、小牛血清购自Hy

Nature-|-胚胎干细胞悬浮培养首次构建体外类囊胚

  哺乳动物的发育起源于受精卵,受精卵通过分裂,经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚(Morula)再到囊胚(Blastocyst)阶段,称之为着床前胚胎(pre-implantation)。随后胚胎植入子宫壁,诱导子宫内膜蜕膜化(decidualization)预示着成功着床(i

Nature-|-胚胎干细胞悬浮培养首次构建体外类囊胚

  哺乳动物的发育起源于受精卵,受精卵通过分裂,经历了2-cell、4-cell、8-cell、桑葚胚(Morula)再到囊胚(Blastocyst)阶段,称之为着床前胚胎(pre-implantation)。随后胚胎植入子宫壁,诱导子宫内膜蜕膜化(decidualization)预示着成功着床(i

在体外为干细胞培养搭建新型“阳光房”

  通常干细胞获取比较困难,数量也极其有限。为了获取足够数量的干细胞,必须进行体外扩增。但随着扩增代数的增加,干细胞的生物学功能会逐渐减弱,干细胞可用代次受限,导致干细胞资源稀缺和成本高昂。  随着人类在生命科学领域探索的不断深入,干细胞研究和应用已经成为科学界和全球生物医药行业关注的热点之一。尽管

体外培养的黑色素细胞(melanocyte,MC)的鉴定方法

  MassonFontana氨银法  主要用于鉴定黑色素颗粒和嗜银颗粒。黑色素是一种非脂溶性、非血色素性的色素颗粒,呈黑褐色,存在于头发、皮肤、视网膜、虹膜及中枢神经系统的某些部分。嗜银颗粒分布在类癌组织。染色后嗜银颗粒和黑色素均呈黑色,细胞核呈粉红色,细胞浆呈淡红色。  Dopa染色法  黑色素

体外细胞原代培养和传代培养实验步骤(2)注意事项

三、实验结果计算1.一只小鼠可获得(1~2.5)×108个脾细胞。2.细胞接种后一般几小时内就能贴壁,并开始生长,如接种的细胞密度适宜,5天到一周即可形成单层。3.一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。四、注意事项1.取材要求新鲜,无菌

红细胞裂解液法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞

骨髓间充质干细胞是存在于骨髓腔内具有很强增殖 能力及多向分化潜能的一类成体干细胞,在一定条件下其不仅可以分化为同源于中胚层的间质细胞,还可以诱导分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、上皮样细胞、 心肌细胞、肝细胞等。近年来随着组织工程技术的快速发展,骨髓间充质干细胞的体外分离、培养及其增殖特 性的相关研

Nat-Commun:体外细胞培养系统促进慢性乙肝药物的研发

  最近,来自普林斯顿大学分子生物学系的研究者们成功地建立了HBV慢性感染的细胞培养模型,这将为HBV感染相关的研究提供有力的工具。相关文章发表在最近一期的《Nature communications》杂志上。这一工具的问世将促进HBV病毒学的研究以及加快临床上抗病毒药物的开发进程。  HBV是一类

人体外周血淋巴细胞培养及染色体制片

实验概要学习和掌握人体微量血液体外培养制备染色体标本的方法。实验原理人体的1ml 外周血中一般含有约1-3×106个小淋巴细胞,通常它们都处于间期的GO和G1期。在培养条件下给予药物刺激时,经过53-72小时可在培养物中获得大量的有丝分裂细胞,供染色体标本制备和分析之用。这种外周血培养方法是在1

细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始(二)

要想达到细胞培养用水的水质要求,纯水机的配置非常关键,带有消毒模块的纯水水箱、终端过滤器、取水水质的实时监测等配置都关系着产水水质是否达标。纯水的储存对保持纯水的质量是至关重要的,由于周围环境和空气中的二氧化碳更容易使水污染改变其pH,所以储存水的容器要尽量密封,避免和外界过多接触,抑制微生物生长。

细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始(一)

细胞体外培养用水中水的质量要求提起细胞体外培养实验,每个经历过的实验者都会有这样的领悟吧,细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。明明小心翼翼的操作,细胞总会莫名其妙的被污染了!莫名其妙的挂掉啦!到底怎么回事呢?其实造成细胞污染的因素不单单是微生物,培养环境中所掺杂的物质也可能会影响细胞的生长。水是细胞赖以

细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始(一)

细胞体外培养用水中水的质量要求提起细胞体外培养实验,每个经历过的实验者都会有这样的领悟吧,细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。明明小心翼翼的操作,细胞总会莫名其妙的被污染了!莫名其妙的挂掉啦!到底怎么回事呢?其实造成细胞污染的因素不单单是微生物,培养环境中所掺杂的物质也可能会影响细胞的生长。水是细胞赖以

基于人类多功能干细胞的微流体体外培养模型

  密西根大学傅剑平教授团队设计了一种基于人类多功能干细胞的微流体体外培养模型。在该模型中,人类多功能干细胞可以非常近似的模拟人类胚胎着床早期的若干关键阶段的发育,并且具有高度的可控性及重复性。相关研究结果发表在Nature杂志,论文标题为“Controlled modelling of human

细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始(二)

终端滤器可用于去除纯水中特定类型的污染物,满足不同实验的应用需求。对于细胞体外培养可以选用RephiBio Filter 纯水终端过滤器,安装在乐枫超纯水系统的出水口,可有效去除水中的热原(内毒素)、核酸酶、细菌等杂质,制备符合细胞培养用水要求的超纯水(无热原、无DNase、无RNase、无菌)。 

开发出在体外长期培养成体干细胞的方法

在一项新的研究中,来自美国麻省总医院(MGH)等机构的研究人员开发出的一种新方法可能引发成体干细胞培养领域变革。研究人员描述了获得来自在日常治疗肺部疾病期间收集的各种组织样品中的气道干细胞(airway stem cell),并对它们进行增殖。这种方法似乎也可用于几种其他的组织,如皮肤、胃肠道内壁和

体外细胞原代培养和传代培养实验步骤(1)冻存和复苏

一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做再培养, 即将培养的细胞分散后,从一个容器以1:2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养,为传代培养,传代培养的累积次数就是细胞的代数。细胞冻存及复苏的基

未来人们将体外培养婴儿?

  几十年来,在体外培养婴儿的想法一直是小说和电影的灵感来源;最近,来自世界多个研究小组的科学家们正在探索人工体外妊娠的可能性,比如,有研究人员在人工子宫中培育出了一只羊羔(为期4周),来自澳大利亚的研究人员对羔羊和鲨鱼进行了人工妊娠实验,最近几周,来自荷兰的研究人员获得了290万欧元用于开发妊娠早

科学家利用胚胎干细胞培养出“体外卵泡”

  在繁殖过程中,卵泡为卵母细胞提供了一个充满液体的囊性生殖环境,并提供生殖细胞所需的减数分裂和生长信号。近年来,使用多能干细胞重建生殖细胞发育即体外配子技术,已在哺乳动物物种(包括小鼠和人类)中得到应用。在小鼠中从多能干细胞衍生的原始生殖细胞样细胞 (PGCLC)培育出功能性卵母细胞,这对于应用于

Nat-Methods:白血病干细胞体外培养获得重大突破

  最近,加拿大蒙特利尔大学免疫学研究和癌症研究所(Institute for Research in Immunology and Cancer,IRIC)和魁北克Maisonneuve-Rosemont医院的白血病细胞银行(Quebec Leukemia Cell Bank)进行合作,发

科学家利用胚胎干细胞培养出“体外卵泡”

  在繁殖过程中,卵泡为卵母细胞提供了一个充满液体的囊性生殖环境,并提供生殖细胞所需的减数分裂和生长信号。近年来,使用多能干细胞重建生殖细胞发育即体外配子技术,已在哺乳动物物种(包括小鼠和人类)中得到应用。在小鼠中从多能干细胞衍生的原始生殖细胞样细胞 (PGCLC)培育出功能性卵母细胞,这对于应用于

基因枪介导pVaxDsredIRESEGFP质粒转染体外培养细胞

  [摘要]   目的:建立基因枪子弹制备以及转染体外培养cos-7细胞系的方法,观察基因枪介导真核表达质粒pVax-Dsred-IRES-EGFP在细胞内的表达情况。   方法:亚精氨、氯化钙沉淀法制备子弹,利用原子力显微镜观察子弹制备(DNA+金颗粒)情况;以基因枪的方法分别转染对照组和实

正常兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养

正常兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养 实验材料: 1.实验动物:5月龄兔; 2.清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2; 3.完全培养液:DMEM培养液,补充10%胎牛血清、青霉素100

ITS和ITSE等无血清培养基添加物在细胞体外培养的应用

我们知道,细胞体外培养时需要在培养基中加入血清,以维持细胞的生长和存活。血清,尤其是牛血清,因成分复杂、批间差大和存在病原体污染的可能性等原因广为人们所诟病,而无血清培养基添加物却日益受到科研和生物制药用户的青睐。BioGems(PeproTech旗下品牌)为您提供多种无血清培养基添加物 (见下

利用体外培养干细胞能够重建鼻腔的组织结构与嗅觉功能

  塔夫茨大学医学院的一组研究人员开发了一种培养嗅觉干细胞的方法,然后用于恢复鼻腔组织。这一发现使人们希望未来的治疗方法可以用来恢复因受伤或退化而受损的个体的嗅觉。这种被称为水平基底细胞(HBC)的干细胞在移植到受损组织中时可以重新填充所有嗅上皮(OE)细胞类型,包括感觉神经元。  相关结果发表在《

THP1细胞体外培养时健康的标准或主要特点

通常通过提高MOI值来提高病毒的转染效率,必要时可以在培养基中加入polybrene(5-10 μg/ml)来提高病毒的感染效率。同时,目的细胞良好的生长状态是获得正常感染效率的保证。

正常大兔骨间充质前体细胞的体外成软骨培养

实验材料:1. 实验动物:5月龄兔;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3. 完全培养基:DMEM培养液,补充10%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml4. 化学限定性培养液:基础培养基为DMEM

常见体外肝细胞损伤模型

1.四氯化碳体外损伤肝细胞模型原代培养的正常大鼠肝细胞培养24h(贴壁良好)后,置培养皿于一密闭的塑料盒,内置四氯化碳0.4M容积,37度90min,造成肝细胞损伤的模型,后转入正常培养,进行下一步实验。(即熏蒸法)肝细胞培养12h后,吸弃上清,更换培养液并加入CCL4 8mM(事先用DMSO溶解,

体外培养大肠肿瘤将助力癌症研究

  日本庆应义塾大学20日说,该校一个研究小组开发出体外培养大肠肿瘤组织的新技术,这将有助于对肿瘤组织进行体外实验,加快相关药物研发。   对患者的肿瘤组织进行体外培养极为困难,这成为制约开发新的治疗药物和方法的瓶颈。   庆应义塾大学发表的新闻公报说,该校医学部一个研究小组将6种不同生长因子以不同

体外培养人脑组织需作伦理考量

  17位著名的科学家、伦理学家和哲学家25日在《自然》杂志上发表评论文章指出,现在需要对培养或维持人脑组织的行为作出伦理考量。倘若有一天可以在实验室内创造出能产生意识经验的脑模型,其很可能会引发关于所有权、管理、权限、处置和数据保护方面的一系列问题。  借助于干细胞,人类已经成功培育出多种组织。为