快速了解maxanGilbert化学修饰法
实验方法原理用化学试剂 处理具有末端放射性标记的DNA片段 ,造成碱基的特异性切割并产生一组具有不同长度的DNA链降解产物,经凝胶电泳分离和放射自显影后,可直接读出待测DNA片段的核苷酸序列。实验材料DNA试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材电泳仪实验步骤一、取待测DNA片段,既可以是单链也可以是双链。 此法又叫化学切割法,或化学降解法,切割之前先对待测片段作末端标记。用放射性P32-磷酸集团标记链的末端之一。 二、将标记完的样品,分成四份。分别采用不同的化学试剂对所得样品,进行修饰进而切割(切割就是利用特异的化学试剂,修饰DNA分子中不同的碱基,使被修饰的碱基之间的连接变得不稳定,发生断裂,而产生各种长度的DNA片段。) 【四组切割的方法,在G、G+A、T+C、C处切割】 "+就是同时切割,有点讨厌的是这点,能修饰A,使其糖苷键不稳定的甲酸,同时也会使G的不稳定,所以无奈就有了G+A并......阅读全文
Conic圆锥法
本方法运用二次曲线方程式来拟合液滴的轮廓形状,从而计算出接触角。程序采用了独特的精致算法,以保证几乎对任意的液滴都能达到zui佳的曲线拟合结果。 由于此方法未对液滴的形状作任何假定,所以其适用范围不受液滴形状的限制,不但可用于轴对称的液滴,也同样可用于不符合轴对称的液滴。适用的角度范围是所有方
Tangent-切线法
处的液/固-界面切线间的角度,即接触角。 与上面提到的所有其它的方法都不同,切线法是一局部液滴法。在计算时考虑的不是整个液滴的轮廓形状,而只是三相接触点附近的局部一段轮廓,所以当液滴的形状受到其它物体干扰时,如针管置于液滴内,并不会影响本方法的准确性。另外它也未对液滴的形状作任何假定,所以其适
靶向克隆法
靶向克隆法是一种新的基因克隆方法,该克隆方法的特点是:在基因克隆过程中不使用已有的DNA Ligase,而是使用新开发的靶向克隆酶。靶向克隆酶能够使末端序列相同的双链DNA(14bp-18bp)同源重组,从而达到克隆基因的目的。LP Recco酶,中文名:靶向克隆酶,无需传统基因克隆所需要的限制性内
足迹法(Footprinting)
Footprinting Procedures· DNase I Footprinting (Mike A. Dyer)· DNase I footprintingDetermining the site of binding for a protein on a D
PEI-转染法
材料: 质粒DNA 指数生长的真核细胞 PEI (聚乙烯亚胺) 1×HBS (pH7.4) 配方: PEI 储存液(100 μM):称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS (pH7.4)中, 0.2 μm 滤膜过滤,储存于4℃备用。 1×HBS (pH7.4): 将8.76 g
PEI-转染法
材料:质粒DNA指数生长的真核细胞PEI (聚乙烯亚胺)1×HBS (pH7.4)配方:PEI 储存液(100 μM):称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS (pH7.4)中, 0.2 μm 滤膜过滤,储存于4℃备用。1×HBS (pH7.4): 将8.76 g NaCl 溶解
ELISA法介绍
经典的化学分析方法(如滴定分析、重量分析、分光光度法)能对化学体系组分进行常量或微量分析,而对复杂生物体系的微量成分的测定往往力不从心。在此背景下,科学家研发了一系列测定生物体系成分含量的方法,其中免疫化学法(如酶联免疫法、免疫荧光法、放射免疫法)因具有高特异性、超微量分析生物体有机成分的特点而得到
白金板法
表面/界面张力仪的操作方式:样品台自动升降,全自动测量 技术参数:产品型号BZY-1BZY-2测量方法铂金板法(铂金环法)测试范围mN/m0-4000-200去皮范围mN/m0-4000-200分辨率mN/m±0.1±0.01标准误差mN/m±0.1±0.02重复性±0.1±0.02数据显示LED显
层析法分类
1.凝胶层析又称分子筛过滤或排阻层析等。固定相是多孔凝胶,各组分的分子大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度(移动速度)也不同。优点:所用凝胶属于惰性载体,吸附力弱,操作条件温和,不需要有机溶剂,对高分子物质有很好的分离效果。常用的凝胶有Sephadex G(葡聚糖凝胶)系列。凝胶层析可用于脱盐、分离提
直接ELISA法
实验概要ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的
MTT法简介
MTT法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,可作用于活细胞线粒体中的呼吸链,在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下,外源性MT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒( Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫
软琼脂法
软琼脂法是一种克隆化的方法。克隆化是指使单个细胞无性繁殖而获得该细胞团体的整个培养过程。
液体石蜡法
亦称矿物油保藏法,定期移植保藏法的辅助方法。是指将菌种接种在适宜的斜面培养基上,最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡,使其覆盖整个斜面,再直立放置于低温(4~6℃)干燥处进行保存的一种菌种保藏方法。操作步骤如下: 1 液体石蜡的准备 选用优质化学纯液体石蜡,将液体石蜡分装加塞,用牛皮
直接-ELISA法
实验概要ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的
Tangent-切线法
处的液/固-界面切线间的角度,即接触角。 与上面提到的所有其它的方法都不同,切线法是一局部液滴法。在计算时考虑的不是整个液滴的轮廓形状,而只是三相接触点附近的局部一段轮廓,所以当液滴的形状受到其它物体干扰时,如针管置于液滴内,并不会影响本方法的准确性。另外它也未对液滴的形状作任何假定,所以其适
液体石蜡法
亦称矿物油保藏法,定期移植保藏法的辅助方法。是指将菌种接种在适宜的斜面培养基上,最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡,使其覆盖整个斜面,再直立放置于低温(4~6℃)干燥处进行保存的一种菌种保藏方法。操作步骤如下: 1 液体石蜡的准备 选用优质化学纯液体石蜡,将液体石蜡分装加塞,用牛皮
白金板法
白金板法作为表面张力仪测量方法的一种,在使用时有一定的重要环节需特别注意: 1、测量过程中样品台的上升或下降均会影响到表面张力值,上升时减小,下降时增加。两者都是误差的表现之一。 2、本仪器已经对密度作了一定的修正。如果需要保证测试的结果的更精确,请参考附件中的修正表进行修正。 3、当白金板或
Western印迹法
这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体,并以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。Western使用的探针是抗体,它与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行鉴别和鉴定。仪器:高压锅、玻璃匀浆
沥青取样法
T0601-2011沥青取样法概述:沥青取样法适用于在生产厂、储存或交货验收地点为检查沥青产品质量而采取的试验用代表性样品的方法,本方法主要参照国家行业标准《石油沥青取样法》GB/T11147-89及美国ASTM D 140-93《沥青材料取样法》并结合我国公路工程的实际情况而订制的试验方法。仪器器
沥青取样法
T0601-2011沥青取样法概述:沥青取样法适用于在生产厂、储存或交货验收地点为检查沥青产品质量而采取的试验用代表性样品的方法,本方法主要参照国家行业标准《石油沥青取样法》GB/T11147-89及美国ASTM D 140-93《沥青材料取样法》并结合我国公路工程的实际情况而订制的试验方法。仪器器
重铬酸钾法
一. 方法概述 以重铬酸钾作滴定剂的氧化还原滴定法在碱性溶液中: Cr2O72 -+14H+ +6e ⇌ 2Cr3+ +7H2O (1mol/LHCl 中) 二. 方法特点 1. K2Cr2O7 容易提纯,可直接准确称量配制成标准溶液,不用标定 2. K2Cr2O7
层析法介绍
一、纸层析纸层析创立于1944年,和薄层层析一样,纸层析不仅可以用来分离、检识、测定中药中复杂的有效成分,而且可以于少量成分的提取精制。它是一种以滤纸上吸附的水为固定相,滤纸作为支持剂的分配层析法。纸层析应用较广,其主要用途是为分配薄层及分配柱层析摸索条件。虽然纸层析比较费时,易产生拖尾、不耐腐蚀性
氯法齐明
性状本品为棕红色至红褐色的结晶或结晶性粉末;无臭。本品在三氯甲烷中溶解,在乙醚中微溶,在乙醇中极微溶解,在水中不溶熔点本品的熔点(通则0612)为211~215℃,熔融时同时分解。鉴别(1)取本品约10mg,加硫酸5ml,振摇使溶解,溶液显紫红色,加水稀释后显樱红色。(2)取本品约15mg,置100
沉淀重量法
一. 沉淀重量法的基本步骤 例:沉淀形式与称量形式相同 沉淀形式与称量形式不同: 二. 沉淀重量法对沉淀的要求 (一)对沉淀形式的要求 1. S 要小:溶解损失小于称量误差; 2. 沉淀要纯净; 3. 沉淀易于过滤、洗涤(尽可能生成晶型 ¯ )。
叶绿素乙醇法
无水乙醇提取是将叶绿体中的叶绿体溶解出来,进入溶液,并不能起到分离色素的效果。乙醇提取只是提取方法,不是分离方法。分离是要靠色谱法等方法进行分离。(补充资料):叶绿素提取高等植物体内的叶绿体色素有叶绿素和类胡萝卜素两类,主要包括叶绿素a (C55H72O5N4Mg)、叶绿素b(C55H70O6N4M
生物吸附法
生物吸附法(biosorptionprocess)又称接触稳定法或吸附再生法,是活性污泥法之一种。其运行特点是将活性污泥对有机物的降解的两个过程(吸附和代谢降解)分别在各自的反应器(吸附池和再生池)内进行。这种方法可以充分提高活性污泥的浓度,降低有机营养物和微生物之比,是利用活性污泥的物理作用(吸附
NBB检测法
NBB检测法: 1、在用细胞因子处理靶细胞以后倾去培养液,倒置培养板于吸水纸上吸干培养液。再用100μl磷酸缓冲盐水小心洗去死细胞,用吸水纸吸干培养液。 2、每孔加100μl NBB染液,室温中染色30分钟。轻轻染液。用吸水纸吸干染液。 3、每孔加100μl福尔马林固定液固定15分
随机引物法
此法系可用于从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA 的放射性标记 ( Feinberg 和 Vogelstein 1983,1984)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理此法系可用于从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA 的放射性标记 ( Feinberg 和 Vogelstein 1
间接-ELISA法
实验概要Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA。指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测
MPN法简介
The Most Probable Number Method In the following example, a set of 3 tubes of an all purpose broth medium is inoculated from each of the ten-fold