遗传变异如何影响蛋白表达变化
蛋白质是生命活动的主要承担者,其表达调控对于正常发育和疾病的发生发展至关重要。根据中心法则,我们知道信息的传递过程:DNA→RNA→蛋白。然而研究表明mRNA水平和蛋白水平并不完全一致,表明其中存在某种未知机制,介导mRNA水平的遗传变异对蛋白水平的影响。来自哈佛医学院和Jackson实验室的研究人员解决了这一谜题,研究结果发布在《Nature》杂志上 (PMID: 27309819)。应用RNA-Seq和LC-MS/MS分别分析组织表达谱和蛋白谱研究人员从8个祖系小鼠繁殖广泛遗传变异的多样性远交系小鼠/DO小鼠(指来自随机交配亲本、个体间遗传背景各异的小鼠)。通过测序和质谱技术比较了192个多样性远交系繁殖小鼠肝脏的mRNA和蛋白水平。进一步结合基因分型,进行eQTL(表达数量性状位点,指控制mRNA表达水平的位点)和pQTL(蛋白数量性状位点,指影响蛋白丰度的位点)定位,以探讨mRNA和蛋白表达水平之间的关系,见图1。图1 ......阅读全文
气候变化如何影响中国?诺奖得主这样说
4月28日,世界著名环境能源专家、诺贝尔和平奖获得者、美国劳伦斯-伯克利国家实验室(LBNL)资深研究员马克·列文 (Mark D. Levine)在中国科学院深圳先进技术研究院分享了以《气候变化的影响与中国机遇》为题的学术报告。马克·列文分享主题报告 深圳先进院供图他首先回顾了2016年至2018
Cell:通过QTL分析发现基因调控变异
在高等生物中,许多重要生理性状及复杂疾病都是数量性状,如农作物的产量和人类的高血压、糖尿病等,这些复杂性状受到多个基因和环境因素的控制。为了有效地研究多基因控制的复杂性状,数量性状基因座(QTL)分析技术在20世纪90年代应运而生,有效地将控制数量性状的众多主效基因定位在相应的染色体上。 表达
初学者如何做好蛋白表达?古朵技术@
重组蛋白表达技术可以用来分析基因调控以及研究蛋白质结构和功能。无论是体内功能研究还是用于结构研究的大规模生产,以及生物治疗领域的药物开发都需要用到蛋白表达技术。1、蛋白质通用合成路径DNA —>mRNA—> 蛋白实际操作流程为:1. 克隆或合成目的基因2. 载体构建3. 蛋白表达与纯化4. 蛋白的大
表达蛋白检测实验
免疫印迹法 免疫沉淀法 点印迹法 实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后,免疫印迹可用于鉴定重组蛋白,并检测其是否有预期的大小以及是
膜蛋白的表达
常用于重组膜蛋白的表达系统有真核表达系统、原核表达系统和近些年来发展的无细胞表达系统。其中以大肠杆菌(E.coli)为代表的原核表达系统因为操作简单、成本相对低廉、遗传背景清楚、方便同位素标记,以及有大量可利用的表达载体和宿主菌株等原因,是当下获取重组膜蛋白的最主要途径。对于一些膜蛋白而言,采用增加
表达蛋白检测实验
实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后,免疫印迹可用于鉴定重组蛋白,并检测其是否有预期的大小以及是否从感染细胞中分泌。下面的步骤是介绍检测非分泌性(细胞内)蛋白的,如果重组蛋白是分泌到培养基中的,可按注解中的步骤操作。实验材料 生长至汇片的单层 BS-C-1 细胞重组痘苗病毒储液试剂、试剂盒
做免疫荧光如何看蛋白是在细胞核表达还是胞浆表达
复染细胞核,常规用过的是DAPI进行细胞核复染(蓝色)。目的是为了鉴别目的蛋白的位置是胞核表达,还是胞质表达或胞膜表达。一般来讲,如果是胞核表达,会和蓝色的细胞核颜色重叠;胞质或胞膜表达则不会重合,单独看目的蛋白的表达,会看到有个黑色的空洞的,尤其细胞图像更为明显。从楼主的图片看,貌似是在胞核表达(
Science:新研究揭示短串联重复序列如何影响基因表达
几十年来,科学家们已经知道,“垃圾 DNA(junk DNA)”实际上起着至关重要的作用:尽管基因组中的蛋白编码基因提供了构建蛋白的蓝图,但是基因组中的一些非编码部分,包括以前被认为是 “垃圾DNA”的基因组区域,似乎可以提高或降低这些基因的表达。但人们一直不清楚某些非编码区域如何影响基因表达水
关于蛋白表达系统—昆虫表达系统的介绍
昆虫表达系统是一类应用广泛的真核表达系统,它具有同大多数高等真核生物相似的翻译后修饰加工以及转移外源蛋白的能力。昆虫杆状病毒表达系统是国内外十分推崇的真核表达系统。利用杆状病毒结构基因中多角体蛋白的强启动子构建的表达载体,可使很多真核目的基因得到有效甚至高水平的表达。它具有真核表达系统的翻译后加
关于蛋白表达系统—植物表达系统的介绍
植物能够表达来自动物、细菌、病毒以及植物本身的蛋白质易于大规模培养和生产,且在基因表达与修饰及安全性方面有特别的优势,因此利用植物生产外源蛋白质的研究展现了极其诱人的前景。多种抗体、酶、激紊、血浆蛋白和疫苗等都已通过基因工程的手段在植物的叶、茎、根、果实、种子以及植物细胞和器官中得到表达,然而提
无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音
1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河,这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此,体外蛋白表达开始为科学界所关注,不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差,使其未能得到进一步发展。 到80年代中期Sp
无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音
1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河,这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此,体外蛋白表达开始为科学界所关注,不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差,使其未能得到进一步发展。到80年代中期Spirin等对其进
如何筛选和鉴定生物标本中差异表达的蛋白分子
目前筛选差异表达基因的方法主要有差异显示PCR方法 (differentialdisplayRT PCR ,DDRT PCR)、消减杂交法 (subtractivehybridization ,SH )、基因芯片技术 (DNAchiptechnique)和基因表达的系统分析 (serialanaly
气候变化的影响
据世界气象组织宣布,1998年至2007年是有记载以来最暖和的十年。没有人知道气候变化的影响在多大程度上才能算是“安全”,但我们却清楚知道全球气候变化为人类及生态系统带来的灾难:极端天气、冰川消融、永久冻土层融化、珊瑚礁死亡、海平面上升、生态系统改变、旱涝灾害增加、致命热浪等等。现在,不再是科学
研究称环境影响基因表达
随环境改变“脾气”的小蜜蜂 几年前,美国伊利诺斯大学阿巴纳香槟分校昆虫学系的吉恩·E·鲁滨逊教授,请墨西哥南部的伙伴帮他捕获了1000只新生的小蜜蜂——500只性情温和的意大利蜜蜂和500只生性凶猛的非洲蜜蜂。这两个蜜蜂亚种在基因上相似得几乎难以分辨,但后者却在领地防御上厉害很多。 鲁滨逊
重组蛋白表达系统
选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。 目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用
重组蛋白表达系统
选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用。在这里,我
蛋白的表达与纯化
蛋白表达纯化已经是非常经典简单的实验了,没有LSS说的那么吓人。说说我的蛋白表达纯化以及下面的单抗制作工作总体设计概要吧:1首先要知道你要纯化蛋白的编码DNA序列,查阅相关文献,看目的基因在那些细胞或者组织中高表达,进而设计该基因的引物,扩增出目的DNA片段的ARF。这一布叫目的基因片段的获取2构建
蛋白的表达与纯化
蛋白表达纯化已经是非常经典简单的实验了,没有LSS说的那么吓人。说说我的蛋白表达纯化以及下面的单抗制作工作总体设计概要吧:1首先要知道你要纯化蛋白的编码DNA序列,查阅相关文献,看目的基因在那些细胞或者组织中高表达,进而设计该基因的引物,扩增出目的DNA片段的ARF。这一布叫目的基因片段的获取2构建
重组蛋白表达系统
选择合适的蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。 目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用
影响杆状病毒表达系统的表达因素介绍
在杆状病毒系统中,要获得蛋白质的有效表达,首先要选择合适的转染载体。依据表达的蛋白质属融合型或非融合型,选择单启动子型或多启动子型。另外目的基因的选择要注意以下因素: ①该目的基因应不含内含子; ②去除其mRNA 5′端非编码区的异源序列; ③翻译启始密码子AUG应处于适当的序列之间(如K
如何掌控温度变化
在种植行业,特别是一些四季气候变化比较大的地域,控制植物生长温度十分重要。虽然已经有了大棚种植技术,但是对于气候温度要求比较高的植物来说,温度控制也是需要谨慎对待的。自记式温度计不但可以实时检测温度,它还可以每隔一段时间自动记录目标环境内的温度变化。从温度记录数据上可以看到昼夜不同时间的温度变化从
包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性
蛋白的复性是一个世界性的难题,没有通用的方法,甚至没有靠得住的规律,只能试。可以参考以下文章。该文出处已经忘了,如果有人知道原创作者或网上出处,请补充。包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性包涵体:包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。包涵体的组成与特性:一般含有50%以
包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性
蛋白的复性是一个世界性的难题,没有通用的方法,甚至没有靠得住的规律,只能试。可以参考以下文章。该文出处已经忘了,如果有人知道原创作者或网上出处,请补充。包涵体表达的蛋白的复性包涵体表达的蛋白的复性包涵体:包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。包涵体的组成与特性:一般含有50%以
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变,会影响其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如镰状细胞贫血,就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸,从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸,降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度,使
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变,会影响其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如镰状细胞贫血,就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸,从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸,降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度,使
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变,会影响其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如镰状细胞贫血,就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸,从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸,降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度,使
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变,会影响其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如镰状细胞贫血,就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸,从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸,降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度,使
Cell:构建人类免疫细胞图谱,确定遗传变异对基因影响
比较任何两个人的DNA,你会发现他们的遗传密码中的数百万个位点存在着不同。如今,在一项新的研究中,来自美国拉霍亚免疫学研究所(LJI)的研究人员分享了大量数据,这些数据对于破译这种自然遗传变异如何影响免疫系统保护我们健康的能力至关重要。相关研究结果于2018年11月15日在线发表在Cell期刊上
如何避免非蛋白氮影响测定结果
一、测定原理 硫酸铜在碱性溶液中,可将蛋白质沉淀,且不溶于热水,过滤和洗涤后,可将纯蛋白质和非蛋白质含氮物分离,再用凯氏定氮法测定沉淀中的蛋白质含量。 二、仪器设备 (1)烧杯:200mL。 (2)定性滤纸。 (3)其它设备与粗蛋白质测定性相同。 三、试剂及配制 (1) 100g/L硫酸铜溶液:分析