SWATH技术常见问题与解答

SWATH(Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra)采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX(全球领先的生命科学分析技术公司)的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术,科学家有史以来首次可以获得单独蛋白质组学样品分析中每个肽段的数据。Q: SWATH技术的原理是什么?A: SWATH是MS/MSALL技术的扩展,其采集模式是一种新型的MS/MS扫描技术,将扫描范围划分为以25Dalton为间隔的一系列区间,通过超高速扫描来获得扫描范围内全部离子的所有碎片信息。Q: SWATH技术有哪些特点?A:灵敏度高——SWATH技术继承了MRM的数据采集模式,结合高分辨率的Triple-TOF 5600 plus质谱系统,具有与MRM相当的灵敏度;可重现性高——重复样品间的定量相关性可达到0.99以上;定量准确度高——定量准确度......阅读全文

质谱鉴定常见问题解答

1. 一级质谱和二级质谱有什么区别?什么时候做一级,什么时候做二级? 答:一级质谱鉴定的方式主要指胎指纹图谱(PMF),即利用质谱仪精确测量酶解片段的分子量并搜库比较实现蛋白质的鉴定,二级质谱是在一级质谱的基础上再选择部分肽段做进一步的破碎并对碎片进行深入分析和比较,鉴定出该肽段的序列并结合PMF

PCR原理及常见问题解答

  PCR (Polymerase Chain Reaction),中文翻译为聚合酶链式反应,是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制。 由1983年美国Mullis首先提出设想,1985年由其发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,意味着PCR技术的真

定氮仪常见问题解答

  1、凯氏定氮仪在蒸馏时翻滚剧烈,对操作者构成危险吗?  答:不危险,凯氏定氮仪在蒸馏时翻滚剧烈,是水蒸气大量进入消化管液体翻滚,并非剧烈反应造成;而且仪器有超压保护装置,可以保持管路内部常压,避免危险。  2、凯氏定氮仪工作中对水质有什么要求?  答:凯氏定氮仪的蒸馏水桶内要装蒸馏水或纯水,机器

双向电泳常见问题解答

1. 出现垂直拖尾是什么原因? 答:有可能是蛋白没有被SDS充分包裹,适当延长平衡时间可以解决这个问题;另外也有可能是多余的DTT或者灰尘所致。 2. 为什么出现横向条纹? 答:有可能是聚焦不完全,需要根据胶条长度和PH范围以及上样量选择合适的聚焦时间;另外也有可能是样品提取及溶解和水化不完全的缘

进口PCR仪的常见问题详细解答

  1. 进口PCR仪cDNA产量的很低  可能的原因:  *RNA模板质量低  *对mRNA浓度估计过高  *反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足  *同位素磷32过期  *反应体积过大,不应超过50μl  2. 进口PCR仪扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅  *zui常见的原因在于

实验常见问题解答汇集(一)

   实验常见问题解答汇集(一)   BSP甲基化扩增得到的PCR产物可否直接测序,为什么需要构建TA克隆后测序?   由于基因组DNA的每个CG位点甲基化程度各不相同,未发生甲基化的C会被重亚硫酸盐修饰成为U,而C若发生甲基化则不变,这样如果进行PCR产物测序就有可能在原有的C位点得到双峰图,

免疫沉淀常见问题及对应解答

免疫沉淀是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。免疫沉淀要求抗原的纯度尽可能提高。降低本底,用不与待检抗原结合的非特异性抗体预处理,可以从抗原溶液中除去非特异性结合蛋白,即此法次是用非免疫抗体降低本底,第二次再用所研究的抗体,这样进行二次免疫沉淀是达到纯化免疫沉淀物*有效的方法。今天上海劲马

质谱鉴定常见问题解答

   1. 一级质谱和二级质谱有什么区别?什么时候做一级,什么时候做二级?  答:一级质谱鉴定的方式主要指胎指纹图谱(PMF),即利用质谱仪精确测量酶解片段的分子量并搜库比较实现蛋白质的鉴定,二级质谱是在一级质谱的基础上再选择部分肽段做进一步的破碎并对碎片进行深入分析和比较,鉴定出该肽段的序列并结合

滴定仪常见问题解答

1、电位滴定仪主要应用在哪些行业?答:自动电位滴定仪属于实验室通用基础设备,使用非常广泛,可应用在食品、药检、疾控、商检、水处理、石油、化工、海洋、电力、环保、新能源、教学、科研等相关领域。2、电位滴定仪主要有几种滴定方式?答:(1)酸碱滴定;(2)氧化还原滴定;(3)沉淀滴定;(4)络合滴定;(5

双向电泳常见问题解答

随着人类基因组草图完成,蛋白质组研究全面展开。作为经典蛋白质组学分离技术,双向电泳越来越被科研人员所熟知。但要想得到漂亮的双向电泳谱图,却并不那么容易。我们将针对双向电泳过程中常出现的问题进行总结,希望能给您的实验带来帮助。 本期我们重点关注双向电泳图谱中常出现的水平条纹。双向电泳水平条纹的产生主要

HIV抗体检测常见问题及解答

  1、怀疑感染了艾滋病应做哪些检查?怎么确定一个是否感染了艾滋病?  如果有了高危行为怀疑感染了HIV,则需要做HIV抗体检测,任何人都不能仅凭艾滋病初期症状,如:发热、肺炎、乏力、鹅口疮等就断定感染了HIV或得了艾滋病,这些同样是其它传染病常见的症状,艾滋病临床表现没有特异性,确定一个人是否感染

回路测试常见问题megger为您解答

  Megger设计及制造便携式电力测量设备。Megger的产品可协助您和您的客户安装和改善电力设备及其效率,降低成本以及延长设备的寿命。回路测试常见问题megger为您解答。   什么是回路,为何要对其进行测试?   答:如果电气系统中出现故障,我们必须确保电路阻抗足够低以允许充足的电路流动

细胞分离的常见问题解答

原代细胞(Primary cells):是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。这里的组织主要指:组织器官、外周血及胚胎等。 原代细胞培养:由于原代细胞生长缓慢,繁殖一定的代数停止生长(一般10代以内)。所以一般认为:培养的原代的第1和传代到第10代以内的细胞统

PCR原理及常见问题解答

PCR (Polymerase Chain Reaction),中文翻译为聚合酶链式反应,是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制。 由1983年美国Mullis首先提出设想,1985年由其发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,意味着PCR

腺病毒系统常见问题解答

1.什么是Adeno-associated virus (AAV) &重组AAV(rAAV) & helper free rAAV?腺相关病毒(AAV)属于微小病毒科,是一类小的、二十面体、无包膜病毒。AAV是一种复制缺陷病毒,复制依赖于其他辅助病毒,如腺病毒和疱疹病毒。AAV不编码自己的聚合酶,因

固体核磁常见问题解答

  1.对样品量的要求  要求不少于 0.2g 样品,跟样品的密度和状态也有关系。  2.对样品状态的要求  样品状态要求固体粉末为最佳,片状、颗粒状或能够研磨剪碎成细小颗粒的也可以测试。样品颗粒越小,测试效果越好。  凝胶及其他粘稠状样品不能进行固体核磁测试。  3.对磁性和导电性的要求  有磁性

气相色谱常见问题解答

  问题1:为什么有些峰出现拖尾?   答:①这可能是由于进样口或色谱柱不干净,或色谱柱切割不正确。冷却进样口、关闭气流并更换或清洁进样口部件,包括进样口衬管和金密封垫。取出色谱柱。切掉一段色谱柱以清除不挥发性残留物、隔垫碎屑和密封圈碎片。这段色谱柱的长度可以是1英寸到1米,如果需要的话,可以更

粗糙度仪常见问题及解答

 粗糙度仪常见问题   1、粗糙度仪的生产厂家有啊些?① 国外主要有英国泰勒、易高、德国马尔、霍梅尔表面粗糙度仪,瑞士泰萨以及日本三丰等。②国内生产厂家主要有广州兰泰,北京时代,哈量粗糙度仪,宁波联合、上海泰明等。2、兰泰粗糙度同其它厂家生产的粗糙度仪相比有哪些优势?①同国外进口仪表相比,有明显的价

细胞培养(cell-culture)的一些常见问题与解答2

6、血清的有关问题:新生牛血清:新出生牛5天内取血制成小牛血清:小牛出生16周以内采血制成。胎牛血清:(进口血清)要求剖腹取胎制成。国内厂家往往不能做到,经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为:(1)特级胎牛血清:40纳米过滤,内毒素含量≤10EU,血红蛋

微生物培养与药敏流程详述及常见问题解答

微生物培养、药敏试验的流程及意义微生物培养及药敏试验的总述微生物培养就是使用体外试验的方法检测可能导致感染的病原菌,并给以药敏结果,为临床医生针对某一特定的临床感染提供依据。而药敏试验则是承接微生物培养的一项工作,即对于培养得到的病原菌进行体外试验检测细菌对于抗菌药物的耐药性,来预测抗菌药物的临床治

微生物培养与药敏流程详述及常见问题解答

微生物培养、药敏试验的流程及意义微生物培养及药敏试验的总述微生物培养就是使用体外试验的方法检测可能导致感染的病原菌,并给以药敏结果,为临床医生针对某一特定的临床感染提供依据。而药敏试验则是承接微生物培养的一项工作,即对于培养得到的病原菌进行体外试验检测细菌对于抗菌药物的耐药性,来预测抗菌药物的临床治

细胞培养(cell-culture)的一些常见问题与解答1

1、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0, 温度37 ℃其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一

细胞培养(cell-culture)的一些常见问题与解答1

1、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0, 温度37 ℃其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一

细胞培养(cell-culture)的一些常见问题与解答2

6、血清的有关问题:新生牛血清:新出生牛5天内取血制成小牛血清:小牛出生16周以内采血制成。胎牛血清:(进口血清)要求剖腹取胎制成。国内厂家往往不能做到,经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为:(1)特级胎牛血清:40纳米过滤,内毒素含量≤10EU,血红蛋

PCADP-常见问题解答(二)

能同时使用底跟踪和脉冲相干模式吗?不可以。要么在标准模式下使用装有底跟踪的ADP(底跟踪功能需激活),要么在静止应用中使用脉冲相干模式。两种不能同时使用。能在运动状态或浮标上使用PC-ADP吗?建议仅在仪器被固定的状态下使用PC-ADP。能将底跟踪与倾斜角设为15度的PC-ADP换能器一同使用吗?是

水分测定仪常见问题解答

常见问题解答:阳极电解液颜色不呈亮黄色,而是介于棕色和暗黄色之间颜色过深,是电极对电解液的响应能力降低。可以用纸巾清洁双铂针电极去除表面的吸附物;检查测量电极是否正常连接;测量电极可能发生故障。预滴定新鲜的阳极电解液,漂移太高?滴定系统内存在残留的水份。可以更换干燥管内的分子筛和硅胶;检查滴定台各电

免疫沉淀(IP)的常见问题及解答

1. 用于一般免染的抗体是否都可以用作免疫沉淀实验? 答:抗体的性质对免疫沉淀实验影响很大。抗体不同,和抗原以及Protein G或Protein A的结合能力也就不同。所以一般免染能结合的抗体未必能用于IP反应。 一般来说,多抗是沉淀反应最好的选择。另外,纯化的单抗、腹水和杂交瘤上清液也可用于免疫

使用液氮罐的常见问题解答

使用液氮罐的常见问题解答当人们在平时使用液氮罐的时候,会出现一些比较常见的问题,对于这些问题我们不懂,下面我们负责人为您分析发生这种现象的两种情况:液氮罐价格  大家在使用液氮罐的时候,有时候会碰到一些不懂的问题,当用户对这些情况不了解的,只能通过一些表面现象判断液氮容器是否完好。比如客户在很多地方

使用液氮罐的常见问题解答

当人们在平时使用液氮罐的时候,会出现一些比较常见的问题,对于这些问题我们不懂,下面我们负责人为您分析发生这种现象的两种情况:液氮罐价格使用液氮罐的常见问题解答  大家在使用液氮罐的时候,有时候会碰到一些不懂的问题,当用户对这些情况不了解的,只能通过一些表面现象判断液氮容器是否完好。比如客户在很多地方

COD环境监测常见问题解答

1.水质环境监测指标COD能简要作一些介绍吗?    化学需氧量(Chemical Oxygen Demand,简称COD)是指水体中易被强氧化剂氧化的还原性物质所消耗的氧化剂的量,结果折成氧的量,以mg/L 计。它是表征水体中还原性物质的综合性指标。除特殊水样外,还原性物质主要是有机物,组成有机化