DNA&RNA寡聚核苷酸的准确分子质量测定(一)
1. 前言随着人们对核酸结构和功能的深入了解,特异性结合或者裂解致病基因的核酸药物也逐渐成为了药物研究的新热点, 核酸药物的作用效率高、应用范围广,可以对传统药物进行补充,并且在前期的临床诊断中也可以起到重要的指示作用。核酸药物主要是指各种具有不同功能的寡聚核糖核苷酸(RNA)或者寡聚脱氧核糖核甘酸(DNA),主要作用于基因水平,在信息流传递的上游阶段起作用,效率比较高,且通过结合或者裂解特异性的致病基因,而对其它基因没有任何影响。在信息流的传递过程中,信号逐级放大,一个基因可以转录出多个 mRNA,一个 mRNA 又可以翻译出多个蛋白质,所以与作用于信息流最终产物-蛋白质相比,核酸药物具有广泛的应用前景。目前的核酸药物可以与一些转录因子、凝血酶、人类免疫缺陷病毒、双链 DNA 的特殊部位等结合,从而抑制 DNA 的复制或者蛋白、受体等的结合,从而干扰和阻止病毒或者错误基因和蛋白的表达和放大,因此在基因药物的......阅读全文
小分子RNA的特征介绍
已经被鉴定的miRNAs据推测大都是由具有发夹结构,约70个碱基大小形成发夹结构的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成的,有5’端磷酸基和3’羟基,大小约21—25nt的小分子RNA片段,定位于RNA前体的3’端或者5’端。 3个研究小组分别从线虫、果蝇和Hela细胞中鉴定的100个新mi
小分子RNA的功能介绍
科学家开始认识到这些普遍存在的小分子在真核基因表达调控中有着广泛的作用。在线虫,果蝇,小鼠和人等物种中已经发现的数百个miRNAs中的多数具有和其他参与调控基因表达的分子一样的特征——在不同组织、不同发育阶段中miRNA的水平有显著差异,这种miRNAs表达模式具有分化的位相性和时序性(diff
如何改善RNA提取质量
1.在收获组织及细胞死亡之后,应立即灭活内源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3个方法均可有效使内源RNA酶失活:1)用含离液(如胍盐)的细胞裂解液收获样品,并立即匀浆。2)用液氮瞬间冻结样品。值得特别注意的是:组织块必须保证足够小,在浸入液氮的瞬间就能冻结,以确保瞬间令RNA酶失活3)立即将样品置
RNA质量检测与鉴定
方法一、检测RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的,我们只看OD260/OD280(Ratio,R)。1.82.0时,我们认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的,不过要注意,当你用Tris作为缓冲
重组DNA分子的转化实验原理和实验步骤(一)
1实验原理DNA重组分子在体外构建完成后,必须导入特定的受体细胞,使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状,这个导入过程及操作统称为重组DNA分子的转化。对于不同的受体细胞,往往采取不同的转化战略。1.1 DNA重组分子的常用转化方法1.1.1 Ca 2 诱导转化1970年Mandel和H
什么是小分子RNA?
MicroRNA (miRNA) 是一类由内源基因编码的长度约为22 个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。在动植物以及病毒中已经发现有28645个miRNA 分子(Release 21: June 2014) 。大多数miRNA 基因以单拷贝、多拷贝或基因簇(c
小分子RNA(miRNA)简介
一、什么是小分子RNA( MicroRNA)? MicroRNA (miRNA) 是一类长度约为20-24个核苷酸长度的具有调控功能的非编码RNA。 miRNA 主要参与基因转录后水平的调控。这些miRNA基因首先在细胞核内转录成原始miRNA转录本(primary transcrip
部分分解多肽两端有关的-PCR-法筛选-PK120-基因实验
实验方法原理 实验材料 PK-120试剂、试剂盒 Sephadex-50Gene Amp RNA PCR 试剂盒合成寡聚核苷酸抽提液酵母 tRNA仪器、耗材 PCR 扩增仪实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」1. 引物设计PK-120 部分分解多肽氨基酸序列中,最长序列 K-15,16 为引物设
关于聚合酶的研究成果介绍
新兴纳米技术的一个诱人之处就是它可以识别核酸是否可作为一种用途多样的有效实验平台,以应用于建造那些更为复杂的生物医学工具。有多种特定的功能基团能以共价键的形式联接到核苷上,而核苷又依次通过几种化学反应组装成链状物。一方面这是一种耗费劳动的过程,但在另一方面,一些科学家正通过此种过程来检验自然产生
怎样将dna中的RNA祛除
去除DNA中的RNA应该用RNaseA(RNA水解酶A)以下资料来自百科:RNase A是一种被详细研究和具有广泛应用的核酸内切酶.RNase A 对核糖核酸有水解作用,但对脱氧核糖核酸则不起作用。核糖核酸酶A 在C端和U端残基处专一地催化RNA的核糖部分3'-与5' -磷酸二酯键的
真菌的DNA和RNA提取方法
一、真菌DNA的提取(方法一)1.实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:异戊
真菌的DNA和RNA提取方法
搞真菌基因功能研究的不可避免的总要涉及到DNA和RNA提取,由于真菌中有较多的多糖成分影响到所提DNA和RNA的质量和后续的分析。因此一个高质量的、实惠的提取方法是我们的优先选择,在此分享一下我一直在用的提取方法,供大家参考。真菌DNA的提取(方法一)1.取真菌菌丝0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2
真菌的DNA和RNA提取方法
一、真菌DNA的提取(方法一)1.实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:异戊
真菌的DNA和RNA提取方法
搞真菌基因功能研究的不可避免的总要涉及到DNA和RNA提取,由于真菌中有较多的多糖成分影响到所提DNA和RNA的质量和后续的分析。因此一个高质量的、实惠的提取方法是我们的优先选择,在此分享一下我一直在用的提取方法,供大家参考。真菌DNA的提取(方法一)1.取真菌菌丝0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2
RNA-和-DNA-提取的降解问题
降解问题是RNA制备中常常到的问题。因为在 RNA 提取过程中,样品储存不当或裂解效率低等情况都会导致降解。对于 DNA 提取,降解不是一个大问题,因为对于 PCR,DNA 可以被剪切并且工作正常,如果不希望有较多剪切的 DNA,可以使用弱裂解的方法。
dna病毒和rna病毒的区分
这两种病毒的遗传物质是不一样的,DNA病毒以DNA作为遗传物质,而RNA病毒以RNA作为遗传物质,其次这两种病毒的结构也是不一样的,DNA病毒一般是双螺旋结构的,而RNA病毒一般是单链结构的,除此之外,RNA病毒的复制过程要比DNA病毒的更复杂一些,因此在治疗上多半也是更困难一点,比如由艾滋病毒引起
DNA分子杂交的意义
分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人DN
DNA分子标记技术研究进展(一)
遗传标记在遗传学的建立和发展过程中有着举足轻重的作用,随着遗传学的进一步发展和分子生物学的异军突起,遗传标记先后相应地经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记四个发展阶段。前三种标记都是以基因表达的结果为基础的,是对基因的间接反映;而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映,它具有
寡聚核苷酸引物的选择
1.简介 寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的引物设计可以避免背景和非特异产物的产生,甚至在RNA-PCR中也能识别cDNA或基因组模板。引物设计也极大的影响扩增产量:若使用
部分分解多肽两端有关的-PCR-法筛选-PK120-基因实验
部分分解多肽氨基酸序列 20 个左右残基长度,用编码多肽两端的 PCR 引物进行 PCR 反应,能够检测 PCR 产物的长度,用此法得到的 cDNA 只有几十个碱基对,但它将成为后续筛选基因的重要突破口。实验方法原理实验材料PK-120试剂、试剂盒Sephadex-50Gene Amp RNA PC
部分分解多肽两端有关的-PCR-法筛选-PK120
基本方案 实验方法原理 实验材料 PK-120
石蜡包埋组织样本提取出高质量DNA/RNA的难点和注意事项
从石蜡包埋组织本中提取可用于下游应用的高质量的生物分子是比较困难的,存在的主要难题是DNA的断裂和脱蜡过程中样品的丢失。那么如何从石蜡包埋的组织样本中提取出高质量的DNA/RNA就成了关键问题,这里推荐专用的BIOG石蜡包埋组织DNA抽提试剂盒。BIOG石蜡包埋组织DNA提取试剂盒(BIOG DNA
石蜡包埋组织样本提取出高质量DNA/RNA的难点和注意事项
从石蜡包埋组织本中提取可用于下游应用的高质量的生物分子是比较困难的,存在的主要难题是DNA的断裂和脱蜡过程中样品的丢失。那么如何从石蜡包埋的组织样本中提取出高质量的DNA/RNA就成了关键问题,这里推荐专用的BIOG石蜡包埋组织DNA抽提试剂盒。BIOG石蜡包埋组织DNA提取试剂盒(BIOG DNA
真菌DNA和RNA提取方法
真菌DNA和RNA提取方法一、真菌DNA的提取(方法一)实验试剂(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(p
生物薄膜DNA、RNA提取要点
早前的文章我们讨论过了生物薄膜(biofilm)样品的基本特性以及影响样品制备和处理方法的因素。今天我们与你分享提取生物薄膜样品DNA或RNA的几个要点。下面列是我们处理了大量各种类型生物薄膜和微生物垫(biomats)总结出来的,以及与我们联合共同开发PowerBiofilm Kit的科学家的经
FFPE样本核酸(DNA/RNA)制备
福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织切片的存档代表了珍贵且来源广泛的生物医学研究材料。随着越来越多的研究人员转向 FFPE 样品的分子分析,开发特定的操作步骤,考虑这些样品的独特性质就变得越来越重要。QIAGEN 在 FFPE 样本纯化及下游检测整个流程中都提供完善的解决方案。QIAamp
简明介绍DNA与RNA异同
一、DNA和RNA异同点 1.核酸是携带遗传信息的物质;在生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成中 有极其重要的作用。核酸有DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)两种核酸。 2.真核细胞DNA主要分布在真核细胞的细胞核中,少部分分布在线粒体和叶绿体中;RNA主要分布在细胞质中,少部分分布在
准确分析甘草种子质量的方法
甘草一是属于豆花蝶形花亚科的灌木状多年生植物,在中国主要集中在二北地区(东北、华北、西北),是中国的传统中药,有“国老”、“十方九草”之誉。其主要成分是甘草酸,具有益气补中、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、缓和药性等功效。甘草茎叶中含有丰富的蛋白质和脂肪,是一种优良的牧草,甘草对维护生态平衡也起着重要
DNA分子杂交原理
DNA分子杂交的原理是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区.如果两DNA有一段相同碱基的话,就能形成氢键,且形成稳定的双链区
Science:小RNA分子的大作用
如果我们的神经系统发育被扰乱,我们便会有罹患上严重神经系统疾病,造成感觉系统、运动控制和认知功能受损的风险。从人类到线虫,对于所有具有发达神经系统的生物都是这种情况。 现在来自哥本哈根大学的一项新研究,揭示了线虫中一个叫做mir-79的小分子调控神经发育的机制。这一分子是发育过程中特异神经