实验是否需要筛选稳定株？
实验是否需要筛选稳定株？能够达到稳定表达的方法不止稳定株一种哦。我们使用慢病毒感染细胞，也一样可以达到稳定表达的效果。什么原理呢？*慢病毒是整合型的逆转录病毒载体，感染细胞后，携带的外源片段会直接整合入细胞的基因组DNA中，并能够随细胞分裂稳定传代。所以对于大多数实验，包括细胞周期、凋亡、增殖等功能学实验，甚至裸鼠成瘤等长时间的实验，只要细胞感染效率较高（70%～80%以上），感染一次慢病毒就可以达到长时间、高效的基因操作的目的，满足实验要求，无须筛选稳定细胞株。......阅读全文
稳定细胞株构建
稳转细胞系（稳定表达细胞株）指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上，使细胞长期稳定表达该基因。稳转细胞株包括多克隆稳转细胞株和单克隆稳转细胞株。慢病毒感染目的细胞后，通过抗性基因筛选得到的细胞株是多个细胞克隆的组合。单克隆细胞株是从多克隆细
实验是否需要筛选稳定株？
实验是否需要筛选稳定株？能够达到稳定表达的方法不止稳定株一种哦。我们使用慢病毒感染细胞，也一样可以达到稳定表达的效果。什么原理呢？*慢病毒是整合型的逆转录病毒载体，感染细胞后，携带的外源片段会直接整合入细胞的基因组DNA中，并能够随细胞分裂稳定传代。所以对于大多数实验，包括细胞周期、凋亡、增殖等功能
稳定转染细胞株的构建
1. 2 稳定转染细胞株的构建原理：稳定转染，就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。应用：
稳定表达细胞株的建立
1、将转染后的细胞按照一定的比例接种到6孔板中（一般选用1：10和1：100两个梯度），分别采用1200mg/ml，1000mg/ml和800mg/ml的G418进行筛选；以转染携带EGFP质粒载体的细胞作为阳性对照，以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照；2、每3～4天换液一次；3、筛选20～30天，
稳定株构建不出来怎么办？
下面两种情况，常规的稳定株构建式比较困难的，但是办法总比困难多！1）过表达：看基因功能。如果是抑制肿瘤细胞的增殖或促进肿瘤细胞的凋亡，那么是很难构建稳定株的（目的基因感染细胞后就会凋亡或不长）。2）干扰：建议构建可诱导表达的稳定株。RNA 干扰敲减的是细胞内源在用的基因，敲减后，短时间内会看到抑制效
筛选稳定表达细胞株转染后多久药物筛选
稳定细胞株筛选是一个长期的过程，稳定细胞株筛选优化，有许多条件需要摸索，而且是从源头开始①在构建载体时，目的基因直接整合到细胞染色体组上，最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法，因为转染效率没有保证②高表达载体的构建，哺乳动物表达量一直是它自身的缺点，最好根据高表达载体定向的驯化细胞，提高蛋白
G418筛选慢病毒感染稳定细胞株
用慢病毒筛选稳定细胞株，以G418筛选方法为例，筛选出稳定整合Neomycin抗性基因的细胞系。A、 G418抗生素最优浓度筛选 每种细胞对抗生素的敏感性不同，因此，准备建立稳定细胞系之前，需要确定能够在10-14天杀死细胞的最佳浓度。方法如下：1、将细胞稀释到1000个细胞/mL，接种到24孔板，
吉凯基因Dr.L的私家实验笔记——稳定株
1、什么是瞬时表达和稳定表达？ 课前热身，了解的同学请直接进入题2 瞬时表达：外源片段不能随细胞分裂而一同复制，导致表达时间短暂，且表达量随时间逐渐下降。 稳定表达：是指外源片段整合入细胞基因组中，并能随细胞分裂稳定传递下去，表达量长时间处于稳定水平。 那稳定株，顾名思义
同样是稳定株，单克隆和混合克隆如何选择？
单克隆稳定株：来源于含有稳定整合外源片段的单个细胞的扩增。混合稳定株：由多个单克隆稳定株混合构成的克隆群，不同的单克隆其外源片段的整合位点不一样。由于不同细胞基因组背景存在差异，且不同整合位点的单克隆细胞株表现出来的细胞表型可能不一致，所以使用混合克隆株更能去除细胞间差异造成的干扰，否则需要对多个单
在稳定株筛选过程中，如何提高单克隆细胞的活性？
最近，单抗市场又迎来了一个关注的热潮。实验室的技术人员以及各大设备厂家，也都逐渐把目光和精力都投向了如何提高单抗药物研发和生产的效率问题上了。在这一层面，各大单抗研发生产企业似乎都在进行赛跑。谁在整个流程中领先一小步，那么极有可能在整个单抗药物市场中赢得先机。在这里，今天我们要讨论的是关于在稳定株筛
奥密克戎毒株正迅速取代其他毒株成为主要流行毒株
当地时间1月11日，世卫组织发布的新冠肺炎每周流行病学报告指出，1月3日至1月9日期间，全球新增新冠肺炎确诊病例超过1500万例，较前一周增加55%，新增死亡病例与前一周相近。除非洲区域外，各区域新增确诊病例均有所增加，东南亚区域增幅最大，较前一周增加418%。欧洲地区发病率仍为最高。上周上报确
葫芦岛疫情病毒毒株为德尔塔变异株
2月23日0时至24时，辽宁省葫芦岛市新增8例本土新冠肺炎确诊病例。2月8日—23日，葫芦岛市累计报告本土确诊病例167例。今天（2月24日），葫芦岛市召开疫情防控新闻发布会，葫芦岛市卫健委副主任周娇阳在发布会上发布相关疫情防控情况：经对确诊病例样本的病毒基因测序，葫芦岛市本次疫情病毒毒株分型属于德
鹤望兰分株繁殖
鹤望兰又名天堂鸟，为市场紧俏名贵切花。分株法是鹤望兰的最佳繁殖法。一、母株的选择。母株应选分蘖多、叶片整齐；无病虫害的健壮成年植株。用于整株挖起分株的母株一般选择生长3年以上的具有4个以上芽、总叶片数不少16枚的植株。分株后用于盆栽的可选择有较多带根分蘖苗的植株。二、分株时间。无论是栽植于大棚内的。
源株的概念
中文名称源株英文名称ortet定 义植物克隆的亲本植株。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
变异毒株又又又来了，墨西哥变异毒株来了
现在，"变异毒株 "恐怕已经成为今年最令人生厌的词汇之一。继英国、南非、巴西、印度、美国等地纷纷发现了新冠变异毒株后，科学家们又检测到了一种新型变异毒株。 近日，发表在《医学病毒学杂志》上的一项研究中，来自意大利博洛尼亚大学的研究团队又检测到另一种新冠变异毒株。该毒株在最近几周内一直在北美和欧
Delta变异株——全球主要流行的新冠病毒变异株
当地时间18日，世卫组织举行新冠肺炎例行发布会，世卫组织首席科学家苏米娅·斯瓦米纳坦表示，由于Delta变异株的传播能力显著增强，这种变异新冠病毒正在成为全球主要流行的新冠病毒变异株。 世卫组织需要更多数据，以了解各种新冠疫苗应对不同新冠病毒变异株的有效性。
IPD分离株耐药现状
由于患儿就诊或住院时常已经使用抗生素等原因，我国儿科侵袭性标本分离病原菌阳性率很低，相关研究也很少。 在八地监测中，有31株肺炎链球菌侵袭性疾病（IPD）分离株，青霉素的中介率/耐药率为17.2%/55.2%，最大青霉素MIC值为4μg/ml；对阿莫西林-克拉维酸、头孢克洛、头孢曲松的
细胞亚株的概念
中文名称细胞亚株英文名称cell substrain定 义由原细胞株再次克隆形成的与原株性状有部分不同的细胞群。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞培养与细胞工程（二级学科）
细胞株的保存
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基，胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放
细胞株的概念
通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（Cell Strain）。
如何保存细胞株？
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的双手。 2. 将所需的培养基，胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。
细胞株的概念
细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(cell line)， 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cel
什么是稳转株
稳定转染的细胞株，就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。
稳转株的制备
实验原理：利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种：瞬时转染和稳转株筛选。通过稳定细胞系构建筛选稳定表达细胞株。针对瞬时转染，外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量较少，能够满足小量蛋白制备，大量生产成本很高。相对于此，稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上，随着细胞的生长分裂外源基因可以稳定转染
奥密克戎毒株传播能力约是德尔塔变异株2倍
今天（2月19日）下午，国务院联防联控机制举行新闻发布会。会上，国家卫生健康委医政医管局监察专员郭燕红介绍，通过对现有病例的流行病学分析，奥密克戎感染的病例间代间距平均为3天，比德尔塔变异株的4天左右进一步缩短，奥密克戎变异株传播能力大概是德尔塔变异株的2倍，传播能力更强。奥密克戎感染的症状不典型，
奥密克戎变异株已成为我国疫情的优势毒株
今天（2月19日）下午，国务院联防联控机制举行新闻发布会。会上，国家卫健委新闻发言人吴良有表示，当前奥密克戎变异株已经成为我国境外输入和本土疫情的优势毒株，其传播力更强、传播速度更快，我国发生境外输入疫情和本土疫情的风险大幅提高。
湖北新冠病毒毒株为德尔塔变异株，与江苏疫情高度同源
8月4日（今天）上午九点，湖北省疫情防控指挥部召开新闻发布会，介绍全省最新疫情防控工作进展情况。 会上通报，经过溯源，武汉市2日通报的7例病例中，已完成的2例样本测序结果显示为delta型，与江苏本轮本土病例毒株高度同源。
细胞株的保存方法
1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基，胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放
多株B细胞反应介绍
多株B细胞反应（英语：polyclonal B cell response）是一种哺乳类后天免疫系统所表现的自然免疫反应。它确保多株B细胞能辨识单独抗原，进而攻击抗原被抗体辨识或结合的部分，即抗原决定位（英语：epitopes）。
如何构建耐药细胞株？
肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一，成为目前阻碍肿瘤治疗的绊脚石。因此，探索肿瘤细胞产生耐药的原因以及如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药仍是目前研究的热点和难点。肿瘤细胞耐药的产生是一个复杂的过程，它的机制广泛牵涉到药物代谢学、病理学、生理学等多个学科，这就决定了肿瘤细胞对化疗药物