细胞株的概念

通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(Cell Strain)。......阅读全文

细胞株的概念

通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(Cell Strain)。

细胞株的概念

  细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(cell line), 由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cel

细胞株的概念和特性

通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(Cell Strain)。

细胞株、细胞系、原代细胞的概念

细胞株(cell strain)是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。细胞系(cell line)是原代细胞经首次传代成功后即为

细胞株的保存

1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放

细胞株的保存方法

1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放

如何保存细胞株?

 1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。    2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。

稳定细胞株构建

稳转细胞系(稳定表达细胞株)指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上,使细胞长期稳定表达该基因。稳转细胞株包括多克隆稳转细胞株和单克隆稳转细胞株。慢病毒感染目的细胞后,通过抗性基因筛选得到的细胞株是多个细胞克隆的组合。单克隆细胞株是从多克隆细

细胞株的基本信息

细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(cell line),由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限,可称为有限细胞系(finite cell li

稳定表达细胞株的建立

1、将转染后的细胞按照一定的比例接种到6孔板中(一般选用1:10和1:100两个梯度),分别采用1200mg/ml,1000mg/ml和800mg/ml的G418进行筛选;以转染携带EGFP质粒载体的细胞作为阳性对照,以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照;2、每3~4天换液一次;3、筛选20~30天,

稳定转染细胞株的构建

1. 2 稳定转染细胞株的构建原理:稳定转染,就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒,根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代,从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。应用:    

细胞株的保存方法介绍

1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基

细胞株的传代与培养

 培养细胞株传代根据不同细胞采取不同的方法。贴壁生长细胞如COS-7、CHO等用消化法传代;部分贴壁生长的细胞如PC12用直接吹打即可传代。  一、用品  (1)  0.25%胰蛋白酶,全培养液  (2)  滴管,离心管,培养瓶(皿),培养瓶盖,注射器,计数6  二、步骤  (1) 贴壁细胞的消化法

细胞株是如何构建的?

1,什么是瞬时转染和稳定转染?瞬时转染:外源片段的表达时间短暂。这主要是因为外源导入的裸露的载体整合入基因组的几率非常低,所以以染色体外(episomal)形式存在,不能随细胞分裂而一同复制导致后拷贝数被稀释导致的。而且考虑到细胞分裂会稀释质粒的量,所以起初转染的质粒拷贝数极高。这就导致瞬时转染呈现

如何构建耐药细胞株?

肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一,成为目前阻碍肿瘤治疗的绊脚石。因此,探索肿瘤细胞产生耐药的原因以及如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药仍是目前研究的热点和难点。肿瘤细胞耐药的产生是一个复杂的过程,它的机制广泛牵涉到药物代谢学、病理学、生理学等多个学科,这就决定了肿瘤细胞对化疗药物

体内耐药细胞株的建立实验

体内耐药细胞株的建立实验是通过细胞与低剂量的药物长期接触,引起细胞本身生物化学过程的改变,细胞膜上出现Pgp(或P-170)糖蛋白,使细胞逐渐对药物耐受。实验方法原理细胞与低剂量的药物长期接触,引起细胞本身药物化学过程的改变,细胞膜上出现Pgp糖蛋白,使细胞逐渐对药物耐受,随着药物浓度的递增,其耐受

快速构建细胞株的使用策略

细胞株构建是广大做细胞研究科研工作者及生物技术员常用的一种技术,目的就是通过构建一个高产感兴趣蛋白的细胞,而细胞株构建就是实现这个目的的过程。这是一个简单的操作,却也是一个复杂的操作。简单在于,从表面上看,并不需要很高超的操作技巧;复杂在于,这是一个时间周期长、操作步骤多、易污染、易混乱的重复劳动工

体内耐药细胞株的建立实验

实验方法原理 细胞与低剂量的药物长期接触,引起细胞本身药物化学过程的改变,细胞膜上出现Pgp糖蛋白,使细胞逐渐对药物耐受,随着药物浓度的递增,其耐受程度逐渐加强。实验材料 小鼠瘤株试剂、试剂盒 肝素生理盐水仪器、耗材 离心机实验步骤 一、材料准备1.  动物选择:根据欲建立的耐药细胞株,选择合适的动

原代细胞与细胞株的区别

原代细胞培养最大优点是:细胞直接来源于机体组织,生物性状尚未发生大的变化,在一定程度上能够反映体内的状态。细胞株和原代细胞不是完全一样。并非每一种组织源性细胞都有相应的细胞株,有些细胞必须养原代,细胞株是来源于原代细胞,原代细胞导入了病毒增殖基因并转变为细胞株,细胞株带有癌变细胞的特点。细胞株的遗传

分析细胞株培养技术重点

细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。国内资深的细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。下面纪宁技术员就为您分享细胞株培养技术的几大要点,赶紧拿起小本本记好了!一、取材细胞

细胞系或细胞株的建立

一、概念1、细胞系(Cell Line):原代培养舞经首次传代成功即成细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系(Lineage of Cells)所组成。2、细胞株(Cell Strain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。细胞株的特殊性质或标志必须

细胞株的污染鉴定、预防和处理

普通微生物污染:培养基浑浊,高倍镜观察有微生物污染;按规定弃用并全面严格灭菌。支原体污染:显微镜无法观察,依经验表现为细胞生长缓慢,有细胞漂浮等等,应通过PCR 等方法鉴定,如发现支原体污染,应按规定弃用,实验室要及时全面消毒灭菌,防止蔓延。(有些常规性细胞学实验不受支原体污染影响,可以继续使用细胞

细胞株和细胞系的差别

原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,这些存活的细胞一般能够传到40--50代,这种传代细胞叫做细胞株。细胞株的遗传物质没有发生改变。当细胞传至50代以后又会出现“危机”,不能再传下去。但是有部分

细胞株的培养、冻存和复苏

细胞株的培养、冻存和复苏1)细胞株的培养和传代培养:用于检测细胞因子的细胞株通常培养于含10%小牛血清和抗生素的培养液中,培养细胞因子依赖细胞株还有加入适量细胞因子。在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养,3~4天传代一次。 悬浮生长细胞的传代:直接直接吸去或离心后吸去培养上清液,用新

细胞系或细胞株的建立

一、概念1、细胞系(Cell Line):原代培养舞经首次传代成功即成细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系(Lineage of Cells)所组成。2、细胞株(Cell Strain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。细胞株的特殊性质或标志必须

细胞系或细胞株的建立

 1、细胞系(Cell Line):原代培养舞经*传代成功即成细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系(Lineage of Cells)所组成。    2、细胞株(Cell Strain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。细胞株的特殊性质或标志必须

细胞株和细胞系的区别

细胞系原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,这些存活的细胞一般能够传到40--50代,这种传代细胞叫做细胞系。细胞株细胞株的遗传物质没有发生改变。当细胞传至50代以后又会出现“危机”,不能再传下去

影响细胞株生长的因素有哪些?

细胞株在体外进行培养,失去了机体的调节和控制,因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境。外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长。 一、温度:一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃。温度过高或过低都会影响到细胞的生长。细胞耐受低温的能力比抗热的能

细胞株的保存与操作方法

1.紫外消毒30min后封闭紫外灯,敞开超净台正常作业状况,用酒精消毒操作者的双手。2.将所需的培育基,胰酶确保瓶身洁净后放于作业台面内,点燃酒精灯,将培育基和胰酶瓶口用酒精棉球擦洗后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两端。特别是将培育基瓶放于斜

细胞株和细胞系的区别

人教版(2002年审定通过的全一册)高中生物教材中细胞株和细胞系的概念内涵与浙科版的概念内涵不同甚至完全相反。人教版2004年审定通过的《现代生物技术专题》高中教材就没有出现这二个概念。据资料记载是因为这二个概念一度混用,导致概念不清。 人教版高中生物细胞株概念强调结束原代培养并可以进行传代培养的细