小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)的培养(四)
3. BMDC的完全成熟注:步骤2中获得的BMDC并非完全成熟的DC,若想得到完成成熟的DC,还需LPS,CD40L或TNF-a等的诱导。3.1 步骤2.4或2.9中获得的BMDC以1200rpm离心5 min,弃上清;3.2 用含重组小鼠GM-CSF(20ng/ml)和IL-4(10ng/ml)的RPMI完全培养液重悬沉淀,计数后调整细胞浓度为1x106/ml;3.3 加入24孔培养板中,并加入成熟诱导剂,如TNF-α(250U/ml),LPS(1μg/ml)、或 CD40L(1μg/ml)等;3.437℃,5% CO2培养箱培养2天;3.5 收集悬浮细胞及疏松贴壁生长的细胞即为成熟树突状细胞。【BMDC大量制备法】-Son法[9]背景:1. 该法可在7天内获得30-40x106个DC/小鼠,是Inaba 经典方法的7-10 倍。DC经14.5%甲泛葡胺(Metrizamide)梯度离心后,纯 &nbs......阅读全文
骨髓与其他来源的干细胞移植是什么
(一)骨髓移植 移植的骨髓和受者之间可同时存在HVGR和GVHR。 此类移植可被应用于造血系统疾病和原发性免疫缺陷病的治疗。 根据被移植骨髓的来源,骨髓移植分为自体骨髓移植、同基因骨髓移植、同种异基因骨髓移植三种类型。 为了提高移植的成功率,应进行HLA、红细胞血型配型。对配型不理想者,
骨髓与其他来源的干细胞移植是什么?
(一)骨髓移植 移植的骨髓和受者之间可同时存在HVGR和GVHR。此类移植可被应用于造血系统疾病和原发性免疫缺陷病的治疗。根据被移植骨髓的来源,骨髓移植分为自体骨髓移植、同基因骨髓移植、同种异基因骨髓移植三种类型。为了提高移植的成功率,应进行HLA、红细胞血型配型。对配型不理想者,可通过适当减少供体
骨髓间充质干细胞的定义和来源
骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是干细胞家族的重要成员,来源于发育早期的中胚层和外胚层。
骨髓与其他来源的干细胞移植是什么?
(一)骨髓移植 移植的骨髓和受者之间可同时存在HVGR和GVHR。此类移植可被应用于造血系统疾病和原发性免疫缺陷病的治疗。根据被移植骨髓的来源,骨髓移植分为自体骨髓移植、同基因骨髓移植、同种异基因骨髓移植三种类型。为了提高移植的成功率,应进行HLA、红细胞血型配型。对配型不理想者,可通过适当减少供体
发生于乙状结肠系膜的指突状树突细胞肉瘤病例分析
患者男,52岁,因腹胀不适2年伴加重1周入院。体检及血、尿常规检查均正常。血清糖类抗原125(carbohydrate antigen125,CA125)升高至258U/ml(正常范围:0~35U/ml)。腹部平扫显示:盆腔内软组织肿块,大小约6.0 cm×6.3 cm×8.0 cm,呈分叶
密歇根大学医学院揭示树突状细胞先前未知的功能。
类风湿性关节炎,牛皮癣和克罗恩氏病等自身免疫性疾病困扰着世界上大多数群体。 值得庆幸的是,现已有几种针对这些疾病的新药问世。然而,这一类称为TNF抑制剂的药物的使用伴随着严重感染甚至癌症的风险。 近日,密歇根大学医学院(Michigan Medicine)的研究小组可能已经找到了TNF-a抑
首款无血浆组分的造血干细胞培养基上市
STEMCELL Technologies公司近日推出了StemSpan™ ACF,一款新的无动物来源成分、化学限定的造血干细胞培养基,它不含动物或人类血浆来源的组分。尽管无血清培养基上市已久,但这是第一款不含有动物和人类蛋白,只含有重组和合成组分的完整培养基,用于造血干细胞的培养和扩增。
小鼠骨髓细胞染色体标本制作
实验方法原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 秋水仙素姬姆萨染液固定液低渗液生理盐
小鼠骨髓细胞染色体标本制作
实验概要 通过这一实验,要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法,并对动物染色体进行观察。实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许
小鼠骨髓细胞染色体标本制作[细胞遗传]
一、实验目的和要求 通过这一实验,要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法,并对动物染色体进行观察。 二、实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中
从鼠弓形虫抗原致敏的树突状细胞中分离的...
实验概要通过注射在体外用TAg致敏过的来自于DC细胞的外质体,在体内诱导了弓形虫属特异性Th1分子免疫应答并获得了抗弓形虫感染的保护效应。研究证实致敏的DC衍生外质体能够对鼠弓形虫感染和其它某些病原感染产生免疫保护。这种无细胞疫苗对于人类疫苗策略是一种很有吸引力的保护工具。实验材料动物:8-10周龄
细胞系培养的组织来源
组织来源:细胞供体所属物种,来自人体或者动物;个体性别、年龄;取材的器官或组织。如系肿瘤组织,应说明临床和病理诊断,以及病历号等。
类器官培养的起始细胞来源
类器官培养的起始细胞群一般从成人或胎儿组织活检样本中获得,肿瘤组织也可类似处理以分离肿瘤细胞来培养类器官。此外,从外周血、腹水和胸腔积液等液体样本中分离的肿瘤细胞也可作为起始材料。对于肿瘤衍生类器官,需要解决癌细胞和正常细胞共存的问题,可利用培养条件,通过使用选择性培养基来实现。
骨髓基质来源的间充质干/祖细胞(MSCs)的培养基本原则...
骨髓基质来源的间充质干/祖细胞(MSCs)的培养基本原则和鉴定实验方法原理 实验材料 骨髓基质试剂、试剂盒 完全培养基(CCM)无钙或镁的磷酸盐缓冲液无钙或镁的Hank’s平衡盐溶液Ficoll-Paque淋巴细胞分离液仪器、耗材 聚丙烯离心管 15 mL和50 mL塑料组织培养皿 直径15 cm塑
骨髓基质来源的间充质干/祖细胞(MSCs)的培养基本原则
实验方法原理实验材料骨髓基质试剂、试剂盒完全培养基(CCM) 无钙或镁的磷酸盐缓冲液 无钙或镁的Hank’s平衡盐溶液 Ficoll-Paque淋巴细胞分离液仪器、耗材聚丙烯离心管 15 mL和50 mL 塑料组织培养皿 直径15 cm 塑料微量移液器枪头 10μL实验步骤(a)去除抗凝管盖子,将骨
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
小鼠胚胎干细胞的培养
实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐
小鼠胚胎干细胞的培养
完全培养基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巯基乙醇(GIBCO 21985); 1
小鼠角质细胞的分离和培养
实验概要本实验是根据Hennings等(1980)的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS: NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L实验
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤1. 将1~2天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠,流
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口,用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮肤剥下,用一把镊子夹住身体,另一把镊子拉开皮肤。4) 将
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤 1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3)
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤 1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口,用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤将1~2天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠,流水彻底
曹雪涛团队发现树突状细胞迁移与炎症调控的新靶标
树突状细胞(DC)是一类重要的天然免疫细胞和专制性抗原提呈细胞,在激活机体抗病原体免疫应答及维持自身免疫耐受过程中发挥着关键性的调控作用。DC的体内迁移对于其成熟活化及功能调控至关重要,DC迁移紊乱可导致DC在炎症部位的过度聚集及活化,导致组织过度炎症,甚至引发炎症性疾病的发生【1】。探索DC迁
最新发现:树突状细胞的自噬可以提高其抗癌活性
自噬是通过清除细胞废物和受损的细胞器来维持细胞稳态的过程,最近有报道称自噬还有另一种功能。KAIST的一个研究小组发现树突状细胞的自噬支持T细胞的抗癌活性。然而,其在吞噬肿瘤相关抗原表达中的作用仍不明确。 图片来源:Autophagy 与此同时,树突状细胞是识别病原体或癌症抗原,并在T细胞中
小鼠肝细胞培养实验
细胞培养技术 实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基
小鼠肝细胞培养实验
实验方法原理 直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。
小鼠腹腔巨噬细胞培养
实验方法原理 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37 ℃,5% CO2 培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 1640 培养基小牛血清双抗台盼兰仪器、耗材 手术器械一次性注射器眼科镊眼科剪96 孔板CO2培养箱实验步骤 一
小鼠肝细胞原代培养
实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布剪子镊子烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6孔培养板吸管移液管手套微量加样器实验