核酸的电泳与检测
【实验目的】（1）了解核酸琼脂糖凝胶电泳的原理，学会其具体的操作程序。（2）对提取的DNA进行检测，掌握紫外电泳图谱的观察分析方法。【实验原理】琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。带电荷的物质在电场中的定向运动称为电泳，核酸分子是两性解离分子，在pH8.0时，DNA分子带负电荷在电场中向正极移动。采用琼脂糖凝胶介质作为电泳支持物，长度不同的DNA分子由于受凝胶阻遏作用大小不一，迁移速度不同，从而达到有效分离DNA的目的。【仪器、材料、试剂】（一）仪器1．电泳装置：电泳仪、水平电泳槽、梳子、制胶槽2．紫外观察：凝胶成像系统3．高速离心机（二）材料1．琼脂糖2．三羟甲基氨基甲烷（Tris）3．硼酸4．乙二胺四乙酸（EDTA）5．溴酚蓝6．蔗糖7．溴化乙锭（EB）8．DNA Marker（λDNA）9．称量纸、容量瓶、瓷盘、一次性手套、取液器、三角瓶、量筒（100mL）、Tip头（10uL）、胶带（三......阅读全文
核酸电泳实验
琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速，可以分辨用其它方法（如密度梯度离心法）所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶EB（德元国际Cat# LY5009）染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外
核酸电泳（RNA电泳与DNA电泳）
（一）DNA的凝胶电泳：凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一。琼脂糖凝胶用于分离大于200～1000bp的片段;操作简单、快速，且分离范围广，分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝胶用于分离5－500bp的片段; 效果好、分辨率极高，相差1bp的DNA片断就能分开，能容纳相对大量的DNA ，用于核苷酸多态性的分析。
核酸电泳仪类型
核酸电泳仪类型有多种。1、按分离目的可分：实验室核酸电泳仪和工业核酸电泳仪。2、按分离装置可分：核酸毛细管电泳仪和核酸芯片电泳仪等。3、按分离规模可分：微型核酸电泳仪、小型核酸电泳仪和大型核酸电泳仪。4、按分离装置数量可分：核酸一维电泳仪和核酸阵列电泳仪等。5、按灵敏性可分：微量核酸电泳仪和痕量核
核酸电泳仪类型
核酸电泳仪类型有多种。1、按分离目的可分：实验室核酸电泳仪和工业核酸电泳仪。2、按分离装置可分：核酸毛细管电泳仪和核酸芯片电泳仪等。3、按分离规模可分：微型核酸电泳仪、小型核酸电泳仪和大型核酸电泳仪。4、按分离装置数量可分：核酸一维电泳仪和核酸阵列电泳仪等。5、按灵敏性可分：微量核酸电泳仪和痕量核酸
核酸凝胶电泳4
5、室温下聚合至少30min，若聚合完全，梳齿下可见二条折光线，小心拔出梳子，用水冲洗样品孔。6、在电泳槽中加入1×TBE缓冲液，使缓冲液覆盖样品孔，并用缓冲液稍淋洗样品孔。7、加上1/6体积6×上样缓冲液与DNA样品及DNA分子量标准液中混合，用微量进样器吸取，小心快速地加入加样孔中（一般加样量3
核酸的电泳与检测
【实验目的】（1）了解核酸琼脂糖凝胶电泳的原理，学会其具体的操作程序。（2）对提取的DNA进行检测，掌握紫外电泳图谱的观察分析方法。【实验原理】琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法。带电荷的物质在电场中的定向运动称为电泳，核酸分子是两性解离分子，在pH8.0时，DNA
核酸凝胶电泳1
核酸是带均匀负电荷的分子，在电场中向正极移动，不同大小和构象的核酸分子的电荷密度大致相同，在自由泳动时，各核酸分子的迁移率区别很小，难以分开。以适当浓度的凝胶介质作为电泳支持介质，具有分子筛效应，使得分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大差异，达到分离的目的。此为分离、鉴定、纯化核酸片段的标准方
核酸凝胶电泳3
3、电泳：电压＜10V/cm，电泳至溴酚兰移出样品槽到凝胶板的2/3距离时，关闭电源。4、取出凝胶块，置紫外透射反射分析仪上观察，即可见桔红的DNA区带。【注意事项】1、加样时枪头不要碰坏孔壁，否则DNA带型不整齐。大多情况下，加样时不必更换枪头，可在阴极槽中反复吸打电泳缓冲液清洗，但对Southe
核酸凝胶电泳2
二、核酸电泳的指示剂与染色剂【指示剂】电泳过程中，常使用一种有颜色的标记物以指示样品的迁移过程，核酸电泳常用的指示剂有两种：溴酚兰，呈蓝紫色；二甲苯青，呈蓝色。溴酚蓝分子量为670道尔顿，在不同溶液凝胶中，迁移速度基本相同，其分子筛效应小，近似自由电泳。在0.6%、1%、2%的琼脂糖凝胶电泳中，溴酚
核酸蛋白转移电泳及杂交
一、DNA Southern Blot及杂交 本技术可用于基因组DNA特定序列定位，尤其可分析某些基因的限制性内切酶长度多态性，对遗传性疾病的早期基因诊断、产前诊断或基因变异等方面的研究有应用价值，其过程包括：样品DNA内切酶水解、水解片断的琼脂糖凝胶电泳分离、分离后水解片断的转移(固定)、特异性D
DNA琼脂糖核酸电泳
核酸电泳是进行核酸研究的重要手段，可以用于：（1）核酸探针；（2）核酸扩增；（3）序列分析等技术。实验方法原理带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段，是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常 在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行，浓度不同
DNA琼脂糖核酸电泳
1. 用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净，放在制胶平板上，封闭模具边缘，架好梳子；2. 根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶：准确称量琼脂糖干粉，加入到配胶用的三角烧瓶内，定量加入电泳缓冲液（一般20~30 ml） ；3. 放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻，加入一滴荧光染料
琼脂糖核酸电泳实验
琼脂糖核酸电泳实验1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净，放在制胶平板上，封闭模具边缘，架 好梳子；2.根据欲分离 DNA 片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶：准确 称量琼脂糖干粉，加入到配胶用的三角烧瓶内，定量加入电泳缓冲液（一般20~30 ml）；3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻，加
DNA琼脂糖核酸电泳
实验方法原理 带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段，是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常 在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行，浓度不同的琼脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子筛网
核酸电泳的步骤方法介绍
核酸电泳是进行核算研究的重要手段，常用于和琼脂糖凝胶聚丙烯酰胺凝胶两种，凝胶电泳操作简单，是分离鉴定和纯化核算的一种常用方法，那么核酸电泳的步骤有哪些的呢？琼脂糖凝胶电泳的步骤：用透明胶将玻璃板或电泳装置所配备的塑料盘的边缘圈封，制成胶模，置水平工作台上；(2) 称取适量琼脂糖，置电泳缓冲液中，加
简要介绍核酸电泳的原理
带电荷的物质在电厂中趋向运动称为电泳，核酸电泳通常在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行，核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可缺少的组成部分。那么核酸电泳的原理是什么呢，下面我就就来说一下。核酸电泳的原理：1.核酸分子中糖-磷酸骨架中的磷酸基团，呈负离子化状态；核酸分子在一定的电场强度的电场中，他
核酸凝胶电泳观察法
实验原理：琼脂糖是海藻中提取的线状高聚物，不同浓度的琼脂糖密度不同，一般PCR产物使用2%浓度，0.5Kb-10Kb的DNA使用1%浓度，基因组DNA使用0.3%-0.7%浓度；不同大小的核酸在同一浓度的凝胶中迁移率不同，因为分子越大其受琼脂糖的阻力越大，迁移率与碱基对的对数值成反比；同分子量不同构
核酸凝胶电泳染料的选择
凝胶电泳是我们最基本的分子实验。其基本原理是电泳分子在电场作用下移动，因此它同电场的强度、电泳分子本身所带的净电荷数成正比。由于在电泳中使用了无反应活性的稳定的支持介质，从而降低了对流运动，故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比的。目前实验室中最常用的琼脂糖凝胶电泳染料有EB、GeneFinderT
核酸凝胶电泳染料该如何选择？
凝胶电泳是我们基本的分子实验。其基本原理是电泳分子在电场作用下移动，因此它同电场的强度、电泳分子本身所带的净电荷数成正比。由于在电泳中使用了无反应活性的稳定的支持介质，从而降低了对流运动，故电泳的迁移率又同分子的摩擦系数成反比的。目前实验室中常用的琼脂糖凝胶电泳染料有EB、GeneFinder
一文简述核酸电泳的原理
琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物。将琼脂糖在所需缓冲液中加热熔化成清澈、透明的溶胶，然后倒入胶模中，凝固后将形成一种固体基质，其密度取决于琼脂糖的浓度。 将凝胶置电场中，在中性pH值下带电荷的核酸通过凝胶网孔向阳极迁移，迁移速率受到核酸的分子大小、构象、琼脂糖浓度、所加电压、电场、电泳
琼脂糖核酸电泳标准实验步骤
琼脂糖核酸电泳1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净，放在制胶平板上，封闭模具边缘，架好梳子；2.根据欲分离DNA片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶：准确称量琼脂糖干粉，加入到配胶用的三角烧瓶内，定量加入电泳缓冲液（一般20~30 ml）；3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻，加入一滴荧光染
核酸电泳常见问题及解决方案
核酸电泳常见问题及解决方案
核酸电泳的指示剂与染色剂
指示剂 核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色，在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中，溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色，它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时，
DNA提取纯化新技术浅谈——核酸电泳纯化技术
核酸的提取和纯化是法医DNA物证检验的关键技术之一，目前实验室最常用的方法包括核酸纯化柱（Spin column）磁珠法和clean-up系统，磁珠法由于操作简便、快速，能够提取到高纯度的核酸DNA,并且可以自动化，因此成为目前法医DNA实验室核酸提取纯化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DN
核酸电泳的指示剂与染色剂
指示剂 核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色，在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中，溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色，它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳
琼脂糖凝胶电泳的制备及核酸检测
一. 实验目的1、掌握琼脂糖凝胶电泳的原理;2、学习琼脂糖凝胶电泳的操作。二. 实验原理琼脂糖是一种天然聚合长链状分子，沸水中溶解，45℃开始形成多孔性刚性滤孔，凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。DNA分子在碱性环境中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与
核酸电泳指示剂和染色剂的选择
指示剂：核酸电泳常用的指示剂有溴酚兰和二甲苯青及银染色.溴酚兰在碱性液体中 呈紫兰色，在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中，溴酚兰的迁移率分别与1Kb、 0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA段大致相同.二甲苯青的水溶液呈兰色，它在 1%和1.4%琼脂糖中电泳时
核酸蛋白转移电泳及杂交（Southern－Blot、Northern－Blot和...1
一、DNA Southern Blot及杂交 本技术可用于基因组DNA特定序列定位，尤其可分析某些基因的限制性内切酶长度多态性，对遗传性疾病的早期基因诊断、产前诊断或基因变异等方面的研究有应用价值，其过程包括：样品DNA内切酶水解、水解片断的琼脂糖凝胶电泳分离、分离后水解片断的转移(固定)、特异
毛细管电泳为什么分不清小片段核酸？
因为核酸的组成只有ATGC四种毛细管电泳分离靠的是电荷质量比的差异可以想见这种荷质比差别是很小的，所以很难分开
全自动核酸电泳分析回收系统助力ccfDNA检测研究
循环游离DNA（circulating cell-free DNA，ccfDNA）是人及动植物体液中、在细胞外，处于游离状态的DNA 分子。作为一种非入侵性的疾病诊断标志物，ccfDNA的检测有望替代目前的侵入性方法，在早期实现疾病的诊断和监控。因此ccfDNA在在液体活检领域掀起一阵新风暴。