半干转是否要去膜?

半干转是否要去膜、滤纸、胶同样大小,因为胶大小不一定规则,膜和滤纸会大一点,那样会不会短路?可以相等,但是如果纸、膜比凝胶大就比较容易形成短路了,上下两层滤纸也不能因过大而相互接触,这样会短路,电流不会通过胶和滤纸。转移前和转移过程中看看电压就行,正常的半干转是慢慢变高的,最后结束时一般是开始的1.5-3倍都是正常的。......阅读全文

半干转是否要去膜?

半干转是否要去膜、滤纸、胶同样大小,因为胶大小不一定规则,膜和滤纸会大一点,那样会不会短路?可以相等,但是如果纸、膜比凝胶大就比较容易形成短路了,上下两层滤纸也不能因过大而相互接触,这样会短路,电流不会通过胶和滤纸。转移前和转移过程中看看电压就行,正常的半干转是慢慢变高的,最后结束时一般是开始的1.

半干电转印法

先将凝胶紧贴于一块硝酸纤维滤膜,然后再将这种夹层组合直接置于两个乎板电极之间,采用这种半干方法可将蛋白质从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上(Kyhse-Andersen1984)。平板可以是石墨(这种平板较便宜,但使用100次后必须更换)制成的,也可以是铂金的(这种子板价格较贵,但使用寿命较长)。通过电洗

半干电转印法

实验概要本方法是先将凝胶紧贴于一块硝酸纤维滤膜,然后再将这种夹层组合直接置于两个乎板电极之间,采用这种半干方法可将蛋白质从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上。平板可以是石墨(这种平板较便宜,但使用100次后必须更换)制成的,也可以是铂金的(这种子板价格较贵,但使用寿命较长)。通过电洗脱将蛋白质从凝胶中转印至

半干转膜仪如何使用

以WEALTEC的YRDIMES半干转膜仪为例,首先确认是转蛋白质还是核酸。蛋白质可参考Bjerrum and Schafer-Nielsen或Towbin或Dunn缓冲液系统配置缓冲液,电泳后将凝胶浸入缓冲液平衡5分钟,将转印膜和滤纸裁切并浸入缓冲液,合上上盖,按说明书垫上BP-C纸,普通转印1或

做western转膜,用湿转电泳,还是半干转电泳好

半干转要用专门的半干转膜仪,而湿转用电泳仪配附件即可;半干转所需时间较短,但控制不好,中间发热比较大容易把膜和胶烘坏;而湿转耗时较长,尤其对大分子量的蛋白转膜效果较好。相对来讲,还是湿法转膜的实验室多一些。

半干转印系统操作使用说明

一.简介美国Bio-Rad公司的Trans-Blot SD型半干转印系统是在电场的作用下把聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶上的蛋白或核酸条带转移到硝酸纤维素膜上,其运用了电泳检测的方法,使得蛋白或核酸从凝胶中进行分离转移到硝酸纤维素膜上,由于硝酸纤维素膜的可支撑性,使得蛋白或核酸条带能够在电泳后继续做

western-blot-半干转时滤纸上出现蓝色

western blot 半干转时滤纸上出现蓝色marker一般是代表转过了western blot 半干转一般是电压10V转膜30分钟就可以了,时间长了就转到滤纸上去了所以western blot 半干转时滤纸上出现蓝色marker一般是代表转过了

半干转印与湿式转印的区别-|-WEALTEC-威泰克

刚接触 Western Blot 不久的用户,在选购 WB 设备时,经常会遇到仪器选型的问题:为什么常见的蛋白质电泳的转膜有两种方式可以选择,干式和湿式,那么哪种方法更适合我们呢?这里我们结合美国 WEALTEC 公司的 E-Blotter 湿转槽和 YRDIMES 快速半干转印槽举例说明。

电泳仪电泳槽半干转印电泳槽

  电泳仪,半干转(半干转印电泳槽)  一、两块胶电泳和四块胶电泳  Mini P-4小型垂直电泳槽

电泳仪电泳槽半干转印电泳槽

电泳仪,半干转(半干转印电泳槽)一、两块胶电泳和四块胶电泳Mini P-4小型垂直电泳槽 

湿转和干转,哪个方法更好

  对于一个完美的westernblot实验,蛋白在聚丙烯凝胶中根据天然分子量进行分离,蛋白被很好的从凝胶上转移到固相支持物上,然后通过特异性的抗体进行免疫检测。   对于转印来说,使用湿转的方法是比较好的,因为凝胶和膜都能够完全浸没在转印buffer中,在半干转的条件下,转印是在两个电极板之间发

湿转和干转,哪个方法更好?

对于一个完美的westernblot实验,蛋白在聚丙烯凝胶中根据天然分子量进行分离,蛋白被很好的从凝胶上转移到固相支持物上,然后通过特异性的抗体进行免疫检测。对于转印来说,使用湿转的方法是比较好的,因为凝胶和膜都能够完全浸没在转印buffer中,在半干转的条件下,转印是在两个电极板之间发生,这种类型

免疫印迹与免疫检测实验——半干转移系统转印蛋白质

实验材料蛋白质试剂、试剂盒转移缓冲液仪器、耗材半干燥转移装置滤纸实验步骤1.  制备样品,并在小型或标准尺寸的单向或双向凝胶上分离蛋白质。 2.  准备转印膜3.  拆卸凝胶夹层,除去积层胶。4.  组装转印夹层:Mylar聚酯薄膜屏蔽物3张以转移缓冲液饱和的滤纸已平衡的转印膜凝胶3张以转移缓冲液饱

Western-转膜时用干转还是湿转效果比较好?

关键看效果怎么细分,干转,速度快,效率稍低,湿转,速度比较慢,转移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量为主,干转就挺好的,效率非常高,几分钟就做完了。分子量特别大,又没有其他人的方案做参考,可以先试试湿转。就是几个小时等得比较痛苦。好几个人做的话,真是等到花儿也谢了。至于说效果,不是

Western-转膜时用干转还是湿转效果比较好

关键看效果怎么细分,干转,速度快,效率稍低,湿转,速度比较慢,转移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量为主,干转就挺好的,效率非常高,几分钟就做完了。分子量特别大,又没有其他人的方案做参考,可以先试试湿转。就是几个小时等得比较痛苦。好几个人做的话,真是等到花儿也谢了。至于说效果,不是

饲料风干样本与半干样品制作方法

应将两样品全部制成风干品,再取样粉碎,筛上网物应返回到样品中。原因是:两中样品基本水份不一样粉碎时损耗不一样,主要是水份。所以制成同样的风干品;另外筛上物含有的成份密度不一样,应返还样品中混匀秤取,要不然检测结果相对偏差不合格。

进口葡萄酒背标或将不强制标明干型或半干型

   日前,有酒商表示葡萄酒进口报检时,将不对产品类型(干红、半干红、干白、半干白等)做强制性检测,也不强制标注在背标上。  事实是否如此?这个新规对进口葡萄酒有何好处?  广州:不强制标注产品类型  昨日,WBO看见广州传世夏渡贸易有限公司总经理张强在朋友圈发布了一条消息:8月起,葡萄酒中文标签可

江苏5年立法112件-推动转方式和生态建设逾半

  记者24日从省委立法工作会上获悉,省人大常委会2013-2017年立法规划已获省委批转。本届人大五年共安排立法项目112件,其中安排正式项目59件,力争在本届人大任期内完成;安排调研项目53件,作为本届及下届人大立法储备项目。   在全部112件项目中,新制定项目72件,修改

企业为何“不想转”“不敢转”“不会转”?

  企业“不想转”“不敢转”“不会转”,资源要素支撑相对不足,高端化、智能化、绿色化、融合化水平参差不齐,转型升级环境尚待优化……7月4日,在“粤商·省长面对面协商座谈会”上,关于传统产业转型升级的讨论热火朝天。  习近平总书记在二十届中央财经委员会第一次会议上强调,“坚持推动传统产业转型升级,不能

半干转转膜电源正负极插反会对仪器有损伤吗

会,正负极插反可能会造成IC烧掉。

BioRad(伯乐)Western-Blot半干法转膜的十大注意事项

首先讲转膜仪的清洗:Do not immerse the unit in liquid. Use special care when cleaning the anode plate to avoid scratching or marring the platinum. Do not use

质检总局停发美玉米干酒糟许可证:含MIR162转基因

  从玉米延伸到玉米干酒糟,从个别口岸扩展到整个东部漫长的海岸线,含有MIR162转基因成分的“船货退运事件”再度升级。  “退运船货也被要求撤离保税仓库。”6月9日,来自青岛港的一位贸易商对《华夏时报》记者说:“质检总局已经停止核发美国玉米干酒糟(DDGS)的进口许可,并要求将之前含有MIR162

转管培养法与转瓶培养

转管培养法(roller tube culture)是Gey 提出的,实验室常用,为了扩大细胞产量,将试管改用转瓶,故称转瓶培养,其培养方法是一样的,试管或转瓶固定在支加上,倾斜度为5°~10°左右,或将转瓶放在一排排转轴之间,使转瓶随着转轴以每小时6~12 转缓慢转动。细胞贴附于玻璃壁

什么叫做半定性,什么叫做半定量

  半定量是RT-PCR做基因表达分析的一种方法,其操作的方法是在野生型和突变体中用一个看家基因(通常是actin)做参照标准来观察目标基因在各自的表达情况(上调还是下调),所谓半定量的“半”是通俗的说法,即在看电泳图估计参照亮度一致(可看作是表达的细胞数一致)情况下,确定目标基因的表达;这是与更加

干热(干烤箱)灭菌实验

实验方法原理干烤箱是由双层铁板制成的方形金属箱,夹层中充满石棉以隔热,箱底放置热源(电炉),并附有鼓风装置、温度调节器、温度计等。主要用于耐高温的玻璃器皿、油剂(如凡士林、液体石蜡等)、粉剂等物品的灭菌。实验步骤将待灭菌物品清洗、晾干后放置干烤箱内(不宜过挤,不得让物品与内层底版直接接触),关闭箱门

干热(干烤箱)灭菌实验

实验方法原理干烤箱是由双层铁板制成的方形金属箱,夹层中充满石棉以隔热,箱底放置热源(电炉),并附有鼓风装置、温度调节器、温度计等。主要用于耐高温的玻璃器皿、油剂(如凡士林、液体石蜡等)、粉剂等物品的灭菌。实验步骤将待灭菌物品清洗、晾干后放置干烤箱内(不宜过挤,不得让物品与内层底版直接接触),关闭箱门

全球首块半人半机械组织诞生

  《终结者》里施瓦辛格扮演的T800终结者让全世界第一次直观感受到了机械与人体组织结合的成果,而就在不久前,哈佛大学的研究者们才初步实现人体细胞与机械的融合,制造出了世界上首块半人半机械组织。  据报道,哈佛大学的生物工程学家们近日打破了生物和机械之间的隔阂,制造出了全球首块半机械版人体组织。这些

western-blot转膜是怎么做的

蛋白免疫印迹( Western Blot) 是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上。目前主流方法是电转印法,分为湿式转印与半干转印。湿式转印是将胶块垂直方向夹在湿式转印槽内进行电转印。以E-Blotter湿转槽为例,一般使用垂直电泳槽的缓冲液槽体,将内部垂直电

把挥发性有机物“吹”干“转”净-分子筛转轮法成VOCs治理新宠

  随着我国大气污染加剧,VOCs治理迫在眉睫。而国家“大气十条”和新大气法的贯彻实施,VOCs治理与监测行业将进入发展的快车道。   在雾霾成为中国人民的“老朋友”之前,挥发性有机污染物——VOCs只是专业人士才懂的冷僻词。而现在,空气污染、家庭装修、车间生产……几乎人人都在关注VOCs的危害。 

电泳、转膜

转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定,是进行各种后续研究(如RFLP分析,阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提。实验目的:掌握Southern blotting的原理及操作步骤。实验原理:1. 转膜的方式:  向上的毛细管转移  向下的毛细管转移  同时向