不能很好的将大分子量蛋白转移到膜上，转移效率低怎...
不能很好的将大分子量蛋白转移到膜上，转移效率低怎么解决？可以考虑，转移缓冲液中加入20%甲醇，因为甲醇可以降低蛋白质洗脱效率，但可增加蛋白质和NC膜的结合能力，甲醇可以防止凝胶变形，甲醇对高分子量蛋白质可延长转移时间；转移缓冲液中加入终浓度0.1%SDS，也是为了增加转移效率；用优质的转移膜，或使用小孔径的NC膜，低浓度胶，提高转移电压/电流，增加转移时间。......阅读全文
不能很好的将大分子量蛋白转移到膜上，转移效率低怎...
不能很好的将大分子量蛋白转移到膜上，转移效率低怎么解决？可以考虑，转移缓冲液中加入20%甲醇，因为甲醇可以降低蛋白质洗脱效率，但可增加蛋白质和NC膜的结合能力，甲醇可以防止凝胶变形，甲醇对高分子量蛋白质可延长转移时间；转移缓冲液中加入终浓度0.1%SDS，也是为了增加转移效率；用优质的转移膜，或使用
Southern印迹(毛细管法将DNA转移到膜上)
实验方法原理 制备基因组 DNA 样品首先要经过一种或多种限制性内切核酸酶的消化，消化后的片段在标准的琼脂糖凝胶上经电泳按照大小进行分离。DNA 经过原位变性后，从凝胶上转移到固相支持物上（通常为尼龙膜或者硝酸纤维素膜）。DNA 片段在向
Southern印迹(毛细管法将DNA转移到膜上)
制备基因组 DNA 样品首先要经过一种或多种限制性内切核酸酶的消化，消化后的片段在标准的琼脂糖凝胶上经电泳按照大小进行分离。DNA 经过原位变性后，从凝胶上转移到固相支持物上（通常为尼龙膜或者硝酸纤维素膜）。DNA 片段在向膜转移的过 程中被保留于相应的位置。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培
Southern印迹(毛细管法将DNA转移到膜上)
实验方法原理 制备基因组 DNA 样品首先要经过一种或多种限制性内切核酸酶的消化，消化后的片段在标准的琼脂糖凝胶上经电泳按照大小进行分离。DNA 经过原位变性后，从凝胶上转移到固相支持物上（通常为尼龙膜或者硝酸纤维素膜）。DNA 片段在向膜转移的过 程中被保留于相应的位置。实验材料 适当的限
能源管理将逐步转移到后端
日前举行的可再生能源信息成果发布会上，国家能源局可再生能源司副司长史立山表示，国家能源局近期将率先在风电产业建立监测和评价体系，并逐步推行到所有的新能源产业。今后政府的管理将逐步转移到后端，加强对项目运行、设备性能、企业管理、地方管理等的监测和评价。 近期，国务院决定取消和下放的117项行
动脉的基因转移实验——－手术将基因转移到猪的髂骨动脉
仪器、耗材3. 5mm的硝酸纤维素材料的带有支架的可促使血管球的导管实验步骤1.和基本方案 1 的第 1~6 步一样将猪的血管分开。2.通过支架插入一个 3.5 mm 的硝酸纤维素材料的带有支架的可促使血管球的导管，渐渐地后退以促使它接近大腿骨的的动脉（图 13.1.2)。然后用 8 个大气压的压力
如何将溶液转移到容量瓶中？
在转移过程中，用一根玻璃棒插入容量瓶内，烧杯嘴紧靠玻璃棒，使溶液沿玻璃棒慢慢流入，玻璃棒下端要靠近瓶颈内壁，但不要太接近瓶口，以免有溶液溢出。待溶液流完后，将烧杯沿玻璃棒稍向上提，同时直立，使附着在烧杯嘴上的一滴溶液流回烧杯中，可用少量蒸馏水洗3--4次，洗涤液按上述方法转移合并到容量瓶中。
动脉的基因转移实验——通过手术将基因转移到猪的动脉
实验材料幼年家猪性别任意病毒或非病毒的包含编码重组基因的载体试剂、试剂盒阿斯匹林Telazol甲苯噻嗪异氟烷无菌的磷酸盐缓冲溶液仪器、耗材导管（适合猪用的）和器械标准的手术器械Balfour牵引器丝带两个气囊导管压力牵引器血液动力监护仪可吸收的缝线皮肤锁环实验步骤1.在手术前 2 天，给幼年家猪按
动脉基因转移手术将基因转移到兔子动脉粥样硬化的动脉
实验材料白色的新西兰兔病毒或非病毒的包含编码重组基因的载体试剂、试剂盒阿司匹林氯胺酮甲苯噻烷异氣烷肝素磷酸盐缓冲溶液仪器、耗材导管（适合兔子用的）和器械标准的手术器械2-0和 4-0的丝线3F 的球囊导管2-0的缝线兔子的颈圈Balfour牵引器手术刀片球囊导管压力计和血压计5-0的缝线1-0可吸收
变性RNA在膜上的转移和固定
实验方法原理 多数情况下，为检测特定的靶 mRNA，需先将 RNA 通过琼脂糖电泳分离后，再从胶上转移到二维支持物上，（通常用尼龙膜)，再与持异的标记探针杂交。正如在 Nonhem 杂交中讨论的情况，实验者可采用多种试剂和膜用于 RNA 的转移以达到 RNA 和膜紧密结合的效果。我们认为，最
变性RNA在膜上的转移和固定
多数情况下，为检测特定的靶 mRNA，需先将 RNA 通过琼脂糖电泳分离后，再从胶上转移到二维支持物上，（通常用尼龙膜)，再与持异的标记探针杂交。正如在 Nonhem 杂交中讨论的情况，实验者可采用多种试剂和膜用于 RNA 的转移以达到 RNA 和膜紧密结合的效果。本实验来源「分子克隆实验指南第三版
变性RNA在膜上的转移和固定
实验方法原理 多数情况下，为检测特定的靶 mRNA，需先将 RNA 通过琼脂糖电泳分离后，再从胶上转移到二维支持物上，（通常用尼龙膜)，再与持异的标记探针杂交。正如在 Nonhem 杂交中讨论的情况，实验者可采用多种试剂和膜用于 RN
一文读懂蛋白质转印原理－大分子量蛋白转印有哪些技巧
通过凝胶电泳分离蛋白后，蛋白质被转移到固体膜载体上进行后续步骤。有效的转印依赖于膜的选择、所使用的转印设备的类型以及转印缓冲液的组成。 转印条件 蛋白的有效转印依赖于蛋白质从凝胶中迁移出来，也依赖于蛋白在膜上的滞留。像凝胶电泳一样，转印步骤将带负电荷的蛋白转印到带正电荷的电极上。转印效率受所
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)4
HH. 跑电泳的时候配的胶总是“缩”是什么原因呢？是有的成分不对吗？ 解答：没什么问题，就是你胶里的水分被蒸发了。过夜时拿保鲜膜包起来，在里面加点水保持湿度就可以了。如果过夜，胶里的水分被蒸发，采用保鲜膜包上也可以；也可能母液（30%聚丙酰胺）有问题，你可以重新配制一份观察；能够替换的试剂，尽量
通过四步轻松解决转印带来的麻烦
在之前的一篇文章中，我谈到了弯曲条带，这是一个常见由于凝胶铸造和跑胶所引起的问题。 然而，虽然转印似乎是一个更简单的过程，但也很容易出错。 下面我将介绍几个有用的建议，让您无时无刻地检测到您的蛋白。 没有条带，意味着什么？ 不幸的是，第一次你可能会认为你的转印没有起作用，当你在在暗室
四步轻松解决转印带来的麻烦
在之前的一篇文章中，我谈到了弯曲条带，这是一个常见由于凝胶铸造和跑胶所引起的问题。 然而，虽然转印似乎是一个更简单的过程，但也很容易出错。 下面我将介绍几个有用的建议，让您无时无刻地检测到您的蛋白。没有条带，意味着什么？不幸的是，第一次你可能会认为你的转印没有起作用，当你在在暗室里成像时，没有条带（
肝癌转移到肺怎么治疗？
核心提示: 肝癌是一种发病率非常高的恶性肿瘤疾病，它的危害性极大，会对患者的生命安全造成非常严重的危险，所以我们千万不能疏忽大意。这种疾病发展到晚期之后，很容易出现扩散和转移，这样会大大的减少患者的存活期，所以我们一定要及早的采取措施进行治疗，以尽量的控制病情。 肝癌是
PVDF膜上蛋白的可逆染色
PVDF膜上蛋白的可逆染色可以用于：Western杂交时，确认蛋白是否转至PVDF膜上。实验方法原理丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时也可以与蛋白质的非极性区相结合，从而形成红色的条带。实验材料蛋白试剂、试剂盒AmidoBlackisopropanolaceticacid考马斯亮蓝
PVDF膜上蛋白的可逆染色
实验材料 蛋白试剂、试剂盒 AmidoBlackisopropanolaceticacid考马斯亮蓝methanolPonceau S in TCAEtOHHACNa2S2O3AgO3Na2CO3MeOHAgNO3甲醛仪器、耗材 PVDF膜实验步骤 Western 杂交时，为确认蛋白是否转至 PVD
PVDF膜上蛋白的可逆染色
实验方法原理 丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时也可以与蛋白质的非极性区相结合，从而形成红色的条带。 实验材料 蛋白
PVDF膜上蛋白的可逆染色
PVDF膜上蛋白的可逆染色 Western杂交时，为确认蛋白是否转至PVDF膜上，可用下列方法对膜上蛋白进行可逆性染色。1. 氨基黑染色染液：0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropanol (v/v) and 10% acetic acid.染色：将PV
Western－Blot详解（三）
3.抗体T.做细胞信号传导，要做磷酸化某因子Western Blot，其二抗有何要求？解答：对二抗无要求，要看你实验条件来选择，一般推荐用HRP标记的二抗。U.同一公司的另外抗体用这个稀释度做出来效果很好，所以没做预试，怕费时间，用什么样的稀释度比较好呢？我用的ELL+plus试剂盒显色。转膜过夜，
Western－Blot详解（三）
3.抗体 T.做细胞信号传导，要做磷酸化某因子Western Blot，其二抗有何要求？ 解答：对二抗无要求，要看你实验条件来选择，一般推荐用HRP标记的二抗。 U.同一公司的另外抗体用这个稀释度做出来效果很好，所以没做预试，怕费时间，用什么样的稀释度比较好呢？我用的E
转膜时大分子量和小分子量蛋白，该如何选择膜孔径
对所有的蛋白，我们推荐用 Nitrocellulose Sandwiches #12369（0.2 μm）的杂交膜去转膜，尤其是分子量低于 30 KD 的蛋白，建议使用较高浓度（12-15%）的蛋白分离胶并缩短转膜的时间，建议在 1 小时以内。大分子量蛋白（> 150 kDa）推荐使用 tris-a
小鼠模型不能很好模拟人类炎症疾病
数十年以来，在进行人体试验之前，实验小鼠模型一直被用于确认和测试候选药物，但是一项研究发现这些模型不能准确地代表人类对炎症疾病的响应。 Junhee Seok及其同事研究了创伤、烧伤和来自例如大肠杆菌等细菌的毒素是如何影响病人的遗传应答的。这组作者将观察到的模式与在小鼠模型中观察到的模
Western－Blot详解－常见的问题指南（二）
4. 滤纸、胶和膜的问题X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别？解答：尼龙膜是较理想的核酸固相支持物，有多种类型；硝酸纤维素膜是目前应用最广的一种固相支持物，价格最便宜；PVDF膜介于二者之间。就结合能力而言：尼龙膜结合DNA和RNA能力可达480－600μg/cm2，可结合短至10bp的核酸
wb蛋白分子量60左右转膜多久
湿转的话，60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染，看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话，可以下次适当延长专膜时间。
wb蛋白分子量60左右转膜多久
湿转的话，60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染，看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话，可以下次适当延长专膜时间。
wb蛋白分子量60左右转膜多久
湿转的话，60KDa的蛋白转膜60分钟~90分钟一般就足够了转膜完成后可以将SDS-PAGE胶片去做一下考染，看看是否有未完全转膜的条带。如果有的话，可以下次适当延长专膜时间。
湿转和干转，哪个方法更好？
对于一个完美的westernblot实验，蛋白在聚丙烯凝胶中根据天然分子量进行分离，蛋白被很好的从凝胶上转移到固相支持物上，然后通过特异性的抗体进行免疫检测。对于转印来说，使用湿转的方法是比较好的，因为凝胶和膜都能够完全浸没在转印buffer中，在半干转的条件下，转印是在两个电极板之间发生，这种类型