CRISPR/Cas9抗体—CRISPR/Cas9研究

能够方便而精确的对DNA和核苷酸序列进行编辑,是科研工作者们长期以来的梦想。CRISPR/Cas9系统的诞生和成熟标志这这一梦想逐渐变为现实。CRISPR/Cas9系统,作为第三代基因编辑技术,它的本质其实是细菌中一种对付诸如病毒等外来DNA的防御系统。此系统的工作原理是 成簇的、规律间隔的短回文重复序列的crRNA( CRISPR-derived RNA )通过碱基配对与 tracrRNA (trans-activating RNA )结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物,此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋白在与 crRNA 配对的序列靶位点剪切双链 DNA。而通过人工设计这两种 RNA,可以改造形成具有引导作用的sgRNA (short guide RNA ),足以引导 Cas9 对 DNA 的定点切割。研究证实Cas9的基因组编辑能力是通过称作为“PAM”( protospacer adjace......阅读全文

利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除大鼠及小鼠模型

  国际著名生物学期刊《Nature Biotechnology》(2012年影响因子为32.44)于8月8日在线正式发表了上海市调控生物学重点实验室、华东师范大学生科院生命医学研究所刘明耀教授和李大力副教授课题组的最新研究成果。这是继今年6月该课题组在《Nucleic Acids Rese

Cell-Res:CRISPR/Cas9瞬时表达基因组编辑体系

  基因组编辑技术是最新发展起来的植物基因功能研究及定向育种的重要手段。在植物中实现基因组编辑的常规方法是将序列特异性核酸酶(如CRISPR/Cas9)的编码DNA转化植物细胞,稳定表达进而实现对目的基因的定点编辑。这种情况下,CRISPR载体整合在植物染色体中,需通过后代分离获得不含CRISPR/

如何关闭CRISPR基因组编辑系统中的Cas9

   CRISPR/Cas9技术正在如火如荼地发展。形形色色的Cas9变体被开发出,用于基因组编辑,激活和抑制基因表达,以及其他。不过,似乎还少了些什么,Cas9的活性一旦开启就无法关闭。人们担心,Cas9在细胞内停留的时间越长,脱靶编辑的可能性也越大。因此,Cas9不仅需要“开”,也需要“关”。 

基因编辑CRISPR/Cas9技术构建转基因小鼠的优势

当当当!敲黑板!!看这里!!!2016年国家自然科学基金放榜已经有一段时间啦!各位老师是不是还沉浸在喜悦中不能自拔呢?O(∩_∩)O清醒一下,我们的目标是:基金年年有,明年中更多!每年的国家自然科学基金都是中国科研领域的风向标!通过分析国自然,可以看出最新的研究热点、目前国家重视的科目、临床上亟待解

CRISPR/Cas9设计工具,让基因编辑不再高冷!

  CRISPR/Cas9已经成为最常用的基因编辑系统。CRISPR/Cas9包括2部分:Cas9核酸内切酶和sgRNA(single guide RNA),sgRNA由天然的tracrRNA (transactivating crRNA)和crRNA (CRISPR RNA)融合而来。   使用

点亮基因组——基于CRISPR/Cas9的新方法

  自从2012年CRISPR/Cas9(通常被称为基因组编辑工具)问世以来,该系统在科学界一直受到关注,许多科学家发现了它的不同应用。来自Leibniz研究所植物遗传学和作物植物研究的科学家们最近发现了一种新型RNA引导核酸内切酶原位标记(RNA-guided endonuclease  -in

基因编辑CRISPR/Cas9技术构建转基因小鼠的优势

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CRISPR/Cas9完全性基因敲除鼠的鉴定方法

基因工程小鼠基因型PCR鉴定的基本原则是利用基因工程小鼠基因组与野生型小鼠基因组的序列差异,以小鼠基因组DNA为模板进行PCR,并以凝胶电泳比对比不同基因型特异产物的大小,根据条带大小来区分小鼠的不同基因型。上期我们讲述了PCR胶浓度、电泳电压及时间的选择,今天我们就开始学习CRISPR/Cas9完

强强联合:在CRISPR/Cas9相关研究中应用高通量测序技术

  摘要:   CRISPR/Cas9基因组编辑技术和新一代测序技术(也称高通量测序技术),是当今对生命科学研究有重大影响的两项技术。二者并非毫不相干。有效地将二者联用,有时可以大大加速科研进程。两者之间有什么样的联系呢?在哪些研究领域或方向上可以联用呢?上海伯豪生物根据在这两个领域的技术服务经验

广州生物院利用CRISPR/Cas9技术建立基因敲除克隆猪

  中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员、吉林大学教授赖良学博士的研究团队利用最新的CRISPR/Cas9技术成功地培育出两种基因敲除克隆小型猪,即酪氨酸酶基因敲除猪和PARK2和PINK1双基因敲除猪,建立了人类白化病和帕金森综合征两种猪模型,该研究成果于10月2日在线发表在Cellular

武汉大学:建立体外高效CRISPR/Cas9靶向DNA编辑系统

  在我们的DNA深处潜伏着许多“寄生虫”,那就是被称为跳跃基因的转座子。这些尾巴很长的家伙如果插入健康的基因,就可能会引发疾病。不过迄今为止,人们还不清楚这种尾巴对于转座子的跳跃有何作用。  密西根大学医学院的研究团队在十一月十二日的Molecular Cell杂志上发表文章指出,没有尾巴的转座子

利用CRISPR/Cas9有望让猪成为病人的器官供者

  尽管在农业环境中,猪比较懒散,但是在生物医学实验室培养的猪足够干净以至于很多人将欢迎---确实,应当欢迎---使用它们的组织用作拯救生命的移植物。用于移植的心脏瓣膜通常来自猪和奶牛。  但是想要将整个猪器官移植到需要新的心脏、肝脏、肾脏或肺部---异种器官移植(xenotransplantati

CRISPR/Cas9发现治疗艾滋病新靶点

  英国《自然·遗传学》12月19日在线发表的一项研究显示,美国科学家使用CRISPR/Cas9基因编辑技术,发现了对人类免疫缺陷病毒(HIV)感染不可或缺的新型基因,能预防HIV感染,但不会影响细胞存活性,这使得它们成为了极具前景的候选药物或基因疗法靶点。  HIV即艾滋病病毒,是艾滋病发病的原因

中科院学者Cell-Res获CRISPR/Cas9-技术重要进展

  来自中科院神经科学研究所,苏州非人灵长类研究平台等处的研究人员发表了题为“Homology-mediated end joining-based targeted integration using CRISPR/Cas9”的文章,设计了一种以同源臂介导的末端接合(Homology-Mediat

以“基因剪刀”CRISPR-/-Cas9技术为基础,创新基因疗法问世

  使用新的细胞模型,遗传性免疫缺陷慢性肉芽肿病的创新基因治疗方法可以在实验室中更快速和成本有效地测试其功效。来自苏黎世大学和苏黎世儿童医院的一组研究人员使用"基因剪刀"CRISPR / Cas9技术成功地实现了这一目标。目的是在不久的将来使用新的方法治疗严重受影响的患者。  慢性肉芽肿病是免疫系统

Science子刊:利用CRISPR/Cas9有望治疗渐冻人症

  肌萎缩性脊髓侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis, ALS),又称路格里克氏病(Lou Gehrig’s disease),或者渐冻人症,是一种致命性的神经退行性疾病。ALS影响了大约2万名美国人,其特征在于脑干和脊髓中运动神经元的过早死亡。这种疾病引起渐进性肌

浙江大学最新文章利用CRISPR/Cas9技术敲除基因

  基因组编辑技术(Genome editing)是通过基因工程表达的序列特异的核酸酶对基因组进行切割,实现基因定点敲除、敲入等修饰,在基础生物学领域的反向遗传学研究、农业领域的种质改良和医学领域的基因治疗等方面有重要的应用价值。  来自浙江大学生科院的研究人员在 Golden-gate 克隆技术的

CRISPR/Cas9技术有望培育成熟的人类器官供体猪

  几十年来,科学家与医生们都梦想有一天能够利用猪培育稳定的人体置换器官的来源。然而人体免疫系统对外源器官的天然排斥以及猪体内的病毒对病毒对器官的侵害都成为阻挠这一试验成功的因素。如今,科学家已经可以成功在猪胚胎中改造60几种不同的基因,从而使得他们坚信不远的将来可以培育出稳定的人类器官供体小猪。 

甘薯中利用CRISPR/Cas9基因编辑技术改良淀粉的品质

  9月23日,中国科学院分子植物科学卓越创新中心张鹏研究组在International Journal of Molecular Sciences 杂志上在线发表了题为CRISPR/Cas9-Based Mutagenesis of Starch Biosynthetic Genes in Swe

CRISPR/Cas9技术或能增强治疗肝细胞癌有效性

  声动力疗法(Sonodynamic therapy,SDT)能利用超声波与药物的结合,在肿瘤位点释放有害的活性氧(ROS),然而,这种疗法并没有十分有效,因为癌细胞会激活抗氧化剂防御系统来对抗ROS。近日,一篇发表在国际杂志ACS Central Science上题为“Ultrasound-Co

CRISPR/Cas9条件性基因敲除鼠的鉴定手法

基因工程小鼠基因型PCR鉴定的基本原则是利用基因工程小鼠基因组与野生型小鼠基因组的序列差异,以小鼠基因组DNA为模板进行PCR,并以凝胶电泳比对比不同基因型特异产物的大小,根据条带大小来区分小鼠的不同基因型。上期我们讲述了CRISPR/Cas9完全性基因敲除鼠的鉴定,今天我们就开始学习CRISPR/

南京大学黄行许:连发CRISPR/Cas9重要研究成果

  南京大学模式动物研究所的黄行许(Xingxu Huang)教授,是近年来基因组编辑领域的风云人物之一。其实验室不仅首次在世界上利用CRISPR/Cas9进行了大鼠的条件性基因敲除,还通过原核注射实现了世界上首次猴基因敲除。这些成果在国际上受到广泛的瞩目。  近期黄行许教授课题组接连在CRISPR

哈佛大学实验室发现CRISPR/Cas9存在严重脱靶效应

  哈佛大学David R Liu实验室利用体外筛选和高通量测序检测CRISPR/Cas9的脱靶,针对CLTA基因的四个不同靶位点共设计了八条不同序列的gRNA,即每个靶位点有两条gRNA,结果发现,四个靶位点均存在脱靶现象,脱靶效率最高可达 84%,同时CRISPR/Cas9的特异性仅与g

武汉大学郭德银教授:用CRISPR/Cas9攻克艾滋病

  来自武汉大学的研究人员在新研究中证实,借助于CRISPR/cas9对CXCR4进行基因组编辑可赋予细胞对HIV-1感染的抵抗力。这项研究工作发布在《Scientific Reports》杂志上。   这篇论文的通讯作者是武汉大学的“珞珈学者”特聘教授,博士生导师郭德银(Deyin Guo)。其主

王晓群、高绍荣发表CRISPR/Cas9基因编辑新成果

  来自中科院生物物理研究所、同济大学生命科学与技术学院的研究人员,在新研究中第一次证实了CRISPR/Cas9介导的基因编辑可以高效生成基因敲除雪貂(ferret)。这一研究成果发布在11月13日的《Cell Research》杂志上。  中科院生物物理研究所的王晓群(Xiaoqun Wang)研

科学家利用CRISPR/Cas9技术来成功编辑人类T细胞

  近日,来自加州大学旧金山分校(UC San Francisco)的研究人员通过研究设计了一种新型策略,其可以利用名为CRISPR/Cas9的基因编辑系统来精确修饰人类机体的T细胞,相关研究发表于国际杂志PNAS上。由于机体免疫细胞在一系列疾病的发病过程中扮演着中重要的角色,因此提供一种多样化的新

引发伦理争议和忧虑-基因编辑CRISPR/Cas9新技术路在何方?

正在生物体内发挥功能的CRISPR/Cas9系统  ■新视野  CRISPR/Cas9这项新技术使人们能更精准地对DNA代码进行控制,引发了遗传学和细胞生物学领域的革新,科学家们对它寄予厚望,希望借助它的力量,治疗包括癌症在内的疾病并进一步解开人类细胞身上笼罩的谜团。  但这一基

Nat-Genet:利用CRISPR/Cas9让番茄植物更早开花结果

  在一项新的研究中,来自美国冷泉港实验室(CSHL)的一个研究团队利用一种简单而又强大的调整两种流行的番茄植物品种中的基因的CRISPR/Cas9基因组编辑方法,开发出一种快速的方法使得它们比当前的商业品种早两个星期开花和结出成熟的果实。相关研究结果于2016年12月5日在线发表在Nature G

Nature子刊:利用CRISPR–Cas9-构建致死病毒新型动物模型

  中东呼吸综合征冠状病毒( Middle East respiratory syndrome coronavirus ,MERS-CoV)是近年来出现的一种新型高致病性冠状病毒,于2012年在中东首次被鉴定出来,随后又在几个欧洲国家发现了它的踪迹。这种疾病会引发人类重症肺疾病,临床表现为发热、咳嗽

CRISPR–Cas9基因组编辑可用于耳聋小鼠模型恢复听觉

  一篇论文称,研究将CRISPR–Cas9基因组编辑技术用于恢复人类遗传性耳聋小鼠模型的听力。这项于12月21日发表于《自然》的研究凸显了CRISPR-Cas9用于治疗某些显性遗传性听觉损失疾病的潜力。  将近一半的耳聋是由遗传因素造成的,但能治疗遗传性听觉损失的方法却有限。美国马萨诸塞州哈佛大学