ClonePix技术快速筛选和开发高表达GPCR的哺乳细胞系(一)
ClonePixTM 2系统提供了一种全新、快速评估哺乳细胞系GPCR靶蛋白表达水平的方法 1. 用哺乳表达系统快速评估GPCR靶蛋白的內源表达水平 2. 增加发现最优细胞反应器的可能性 3. 减少细胞系/抗体开发的时间—避免有限稀释法 背景 哺乳细胞GPCRs的内源表达通常是非常低的,一般不超过3,000拷贝/细胞。这些内源表达水平足够维护正常的受体功能,但在GPCR药物发现的应用存在挑战。大部分的筛选试验要求更高浓度的功能GPCRs呈现在细胞表面。例如,结构的研究,小分子药物设计和天然GPCR的功能抗体生产均需要GPCR表达水平是内源表达水平的几个数量级。在“低等”生物中尝试建立表达系统取得的成功非常有限,由于细菌的无效折叠;酵母的低产和杆状病毒不正确的翻译后修饰。这些挑战激发了药物发现应用中高表达GPCR蛋白哺乳细胞系的市场需求。 关......阅读全文
研究开发出原位代谢靶向的功能菌筛选、培养和强化技术
环境修复与生态系统工程高度依赖于原位功能菌的挖掘和应用,但长期以来,业界普遍采用的“先养后筛”范式面临着挑战。由于缺乏有效的菌群原位功能快检方法,因此通常难以快速识别和挖掘具有潜在功能的原位菌株。此外,即使能分离出功能菌,其在纯培养条件下的代谢效能(如除磷效率)往往与其原位环境有巨大差异,经常导
关于蛋白表达系统—哺乳动物表达系统的介绍
哺乳动物细胞表达外源重组蛋白可利用质粒转染和病毒载体的感染。利用质粒转染获得稳定的转染细胞需几周甚至几个月时间,而利用病毒表达系统则可快速感染细胞,在几天内使外源基因整合到病毒载体中,尤其适用于从大量表达产物中检测出目的蛋白。哺乳动物细胞表达载体必须包含原核序列、启动子、增强子、选择标记基因、终
全自动高内涵筛选和分析系统
高内涵细胞学筛选分析技术(High Content Screening, HCS)是Thermo Cellomics公司开创的细胞组学研究的整体解决方案(Total Solution)。此项ZL技术是在不破坏细胞整体结构的条件下,对细胞进行多通道、多靶点的荧光扫描检测,由冷CCD成像技术捕获图像信息
用BRET方法研究活细胞中GPCR蛋白相互作用的基本注意事项1
简介: BRET已经成功的应用于研究哺乳动物细胞中GPCR同源和异源二聚体以及涉及到受体脱敏作用和交易的受体/β-arrestin相互作用(综述,1)。BRET的显著优势是可以在活细胞中,正确的的位置实时的监测蛋白质和蛋白质之间的相互作用。由于GPCR高度的疏水性和细胞本地化,测量蛋白质之间相互作用
推开GPCR靶点与代谢性疾病研究的敲门砖动物模型2
与心血管疾病相关的GPCR成员主要分布于A类家族的α亚类,如人体最重要的神经体液调节系统之一,血管紧张素系统(RAAS)中的AT1R、AT2R以及Mas-R。血管紧张素II(AngII)1 型受体(AT1R)可自发激活。通过膜环境、相互作用蛋白、受体自身抗体和单核苷酸多态性(SNP)等增加AT1
筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验(一)
试剂、试剂盒 封闭缓冲液氯仿IPTG抗原-抗体复合物检测试剂SMTNT 缓冲液洗涤缓冲液放射性碘标记第二抗体第一抗体LB 琼脂板LB 顶层琼脂板硝酸纤维素滤膜λ噬菌体表达文库E.coli仪器、耗材 预设 42°C 的空气培养箱培养管平头镊子装有防水黑墨水(印度墨水)并带有 18 号针头的注射器实验步
美国开发出可快速发现高熵陶瓷的方法
美国杜克大学(Duke University)科研人员开发出一种可快速发现高熵陶瓷的卷积算法cPOCC。高熵陶瓷结合了高熵合金和陶瓷的特性,涵盖了碳化物、氮化物、硼化物、硅化物、硫化物等,具有优异的机械性能、热稳定性和化学稳定性,可应用于耐磨和耐腐蚀涂层、热电材料、电池等。 这种新计算方法用于
工业生物技术VS生物制药:基于细胞工厂下的多元发展
工业生物技术和生物制药生产利用生物学使细胞系统成为工厂,生产对人类有价值的分子。这些生物技术过程利用各种宿主生物,并涉及生物燃料、聚合物构件、抗生素和全细胞疗法等应用。除了化学生产外,工业生物技术还可以实现环境和可持续发展目标。同样,生物制药领域已经并将继续生产救命药物。尽管这些应用多种多样,但这些
高内涵筛选平台
高内涵分析系统可以对大量细胞进行快速、高通量成像检测和定量分析。CellInsight CX7 LZR高内涵分析系统的Z轴层扫、快速扫描和共聚焦功能使其成为3D细胞培养高通量成像分析的理想平台。相比于LED系统,CX7 LZR采用激光器作为光源,可以减少光散射、渗透更深、有效改善信噪比,其配套的HC
高内涵筛选的基本原理和应用
高通量药物筛选( high throughput screening,HTS)是20世纪80年代中期产生的为寻找先导物针对大量样品进行药理活性评价分析的一种技术手段,在创新药物的研究和开发中发挥了重要作用。近年来在药物发现领域又出现了一个新概念—高内涵药物筛选( high content scree
药物研发的好帮手蛋白质表达系统
近年来,随着生物药市场和基因工程技术的发展,重组治疗性抗体或者单抗的需求在生物药中的比例也逐年上升。重组mAbs被应用于包括癌症及免疫系统缺陷在内的许多疾病的治疗当中。 重组mAbs通过基因工程技术改造后可以在多种宿主细胞表达。重组mAbs在表达后进行翻译后修饰、蛋白质折叠、组装及适当的糖
高效的单细胞打印技术加速稳定细胞系的开发
目前,在单抗制药领域,需要稳定高产的细胞株,用于下游的抗体稳定生产,因为稳定高产的细胞株不仅可以简化下游纯化工艺,还可以降低整个生产工艺的成本,确保高品质产品的获得,以应对复杂的临床应用和市场竞争环境。Fig.1 细胞株构建经典流程传统的细胞系开发的单细胞分离技术存在很多缺陷,如分离效率低,细胞存活
基因芯片的应用药物筛选和新药开发
由于所有药物(或兽药)都是直接或间接地通过修饰、改变人类(或相关动物)基因的表达及表达产物的功能而生效,而芯片技术具有高通量、大规模、平行性地分析基因表达或蛋白质状况(蛋白质芯片)的能力,在药物筛选方面具有巨大的优势。用芯片作大规模的筛选研究可以省略大量的动物试验甚至临床,缩短药物筛选所用时间,提高
PE公司与吉瑞泰生物科技有限公司建立药物研发合作关系
日前PerkinElmer公司与吉瑞泰(武汉)生物科技有限公司签署了药物研发合作意向书。双方将在新药研发,新技术平台搭建等方面展开密切合作。合作平台涵盖以下方面: GPCR检测平台: cAMP检测及Ca2+ 检测等 蛋白相互作用检测平台:TR-FRET方法及Alpha方法(含抗体包被及试剂盒
如何筛选和鉴定生物标本中差异表达的蛋白分子
目前筛选差异表达基因的方法主要有差异显示PCR方法 (differentialdisplayRT PCR ,DDRT PCR)、消减杂交法 (subtractivehybridization ,SH )、基因芯片技术 (DNAchiptechnique)和基因表达的系统分析 (serialanaly
急性中毒物质的快速筛选和检测(二)
方法一速测卡法(纸片法) 2.1范围 本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。 2.2原理 胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷
急性中毒物质的快速筛选和检测(五)
方法二(对—邻试纸法) 1原理:氰离子与对—硝基苯甲醛能够缩合为苯偶姻。在碱性条件下,苯偶姻使邻二硝基苯还原,产生典型的紫色反应。 2试剂: 2.1对—邻试纸:取1.5g对—硝基苯甲醛和1.7g邻二硝基苯溶于100ml95%乙醇中,用普通定性滤纸浸泡5min后取出晾
急性中毒物质的快速筛选和检测(四)
APHO-E-03-2005甲醇的快速检测 甲醇和乙醇在色泽与味觉上没有差异,酒中微量甲醇可引起人体慢性损害,高剂量时可引起人体急性中毒。我国发生的多次酒类中毒,都是因为饮用了含有高剂量甲醇的工业酒精配制的酒或是饮用了直接用甲醇配制的酒而引起。甲醇中毒剂量的个体差异较大,有的7~8
急性中毒物质的快速筛选和检测(三)
APHO-E-01-2005鼠药(毒鼠强、氟乙酰胺、敌鼠等)中毒残留物的快速筛选检测 在我国,每年食物中毒事件中,鼠药中毒占有相当大的比例。杀鼠药对人、畜皆具有不同程度的毒性,误食或人为投毒食用后,严重者有致命的后果。目前常用的杀鼠药有敌鼠、安妥和磷化锌。“毒鼠强”和“氟乙酰胺
测序新技术提供基因表达高精数据
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/6/481704.shtm 科技日报北京6月27日电 (实习记者张佳欣)最近,日本东京理科大学的一个研究小组开发了一种新改进的单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术。这种新方法,即终止子辅助固相互补DN
PE为新药开发和生物研究中的高内涵筛选应用增添3D分析功能
2010年5月28日 马萨诸塞沃尔瑟姆 - 专注于提高人类健康及其生存环境安全的全球领先公司PerkinElmer, Inc., 今天宣布为新药开发和生物研究中的高含量筛选应用增添 3D 图像分析功能,该功能集成了本公司最新版本的旗舰成像软件套件 Columbus™ 2.1
PE为新药开发和生物研究中的高内涵筛选应用增添3D分析功能
马萨诸塞沃尔瑟姆-专注于提高人类健康及其生存环境安全的全球领先公司,今天宣布为新药开发和生物研究中的高含量筛选应用增添 3D 图像分析功能,该功能集成了本公司最新版本的旗舰成像软件套件 Columbus™ 2.1 和 Volocity® 5.3.2。 科研人员首次尝试将这两款功能强大的平台集成
杂交瘤细胞系的产生与筛选
脾B细胞+骨髓瘤细胞,加聚乙二醇(PEG)促进细胞融合,HAT培养基中培养(内含次黄嘌呤、氨基蝶呤、T)生长出来的脾B-骨髓瘤融合细胞继续扩大培养。细胞融合物中包含:脾-脾融合细胞:不能生长,脾细胞不能体外培养。骨-骨融合细胞:不能利用次黄嘌呤,但可通过第二途 径利用叶酸还原酶合成嘌呤。氨基蝶呤对叶
广东开发新技术用于快速灵敏检测和精准抗菌治疗
近日,广东工业大学生物医药学院教授赵肃清团队开发出一种新技术,可用于快速灵敏检测和精准抗菌治疗。相关研究发表于Biosensors and Bioelectronics。广东工业大学为该论文第一完成单位,赵肃清教授和Su Xiaodi教授为通讯作者,博士研究生钟颖颖为第一作者。 金黄色葡萄球菌(
高光效品种筛选仪主要技术参数
主要技术参数: 1、工作环境:温度0—50℃,相对湿度:0-100%(没有水汽凝结); 2、电源:DC7.4V7.6AH可存电锂电池,可连续工作7—9小时; 3、数据存储:1吉SD卡,十万数据存储; 4、显示:液晶大字符显示; 5、CO2分析:非扩散式红外CO2分析,测量范围:0-10
科学家开发出高效新型遗传筛选技术
探索基因及其表达的蛋白在特定生理、病理、发育等过程中所起的作用一直是生命科学领域研究的重要内容。尽管利用RNA干扰鉴定高等生物基因功能的技术已经普及,但是这种方法经常伴随脱靶现象;而且由于只能部分抑制基因表达,往往不足以造成表型变化从而影响对其基因型的判断。近几年基因编辑技术的出现,使得对单一基
新载体大大提升哺乳动物细胞的蛋白产量
科学家们用细胞系或细菌表达外源蛋白已经有三十多年历史了,这些技术已经在绝大多数实验室得到了普及。然而,像新药开发这样的应用需要大批量的蛋白,现有的表达体系难以胜任。日前研究人员在Nucleic Acids Research杂志上发表文章,展示了一类新型的重组蛋白表达载体。这种载体可以克服表观遗传
日本开发一种新技术让金属材料兼具高强度和高韧度
金属材料的强度和韧度向来是“鱼和熊掌不可兼得”,日本研究人员最新开发出了一种金属材料制作新技术,能让金属材料兼具高强度和高韧度,有望提高医疗和航空等诸多领域金属材料的应用性。 例如在医疗和航空等诸多领域,微型医疗器械和人造卫星等都需要质量更高的金属材料,既要满足强度,又要保证韧度,因为要制
筛选稳定表达细胞株转染后多久药物筛选
稳定细胞株筛选是一个长期的过程,稳定细胞株筛选优化,有许多条件需要摸索,而且是从源头开始①在构建载体时,目的基因直接整合到细胞染色体组上,最好不要通过先瞬转在筛选稳定细胞株的这种方法,因为转染效率没有保证②高表达载体的构建,哺乳动物表达量一直是它自身的缺点,最好根据高表达载体定向的驯化细胞,提高蛋白
哺乳动物-DNA-的快速分离
根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 kb,适于作 PCR 反应的模板。DNA 产量在 0.5 到 3.0 μg/mg 组织之间变化,或者是 5~15 μg/300μl 全血。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理根据本方案制备的哺乳动物 DNA 约 20~50 k