哮喘致敏小鼠模型的建立及脾脏CD4+T细胞的分离（二）
1.4.2 肺组织标本留取 打开未经支气管肺泡灌洗的各组各 6 只小鼠胸腔 ,观察肺脏的大体改变 ,剪取部分肺组织 ,经10 %甲醛固定后切片 ,行 HE染色。1.5 CD4+T细胞的分离及鉴定1.5.1 CD4+T细胞的分离 打开小鼠腹腔 ,无菌取出脾脏放入冷 Hanks液中 ,将其捻碎并滤过 100 目无菌钢网 ,收集脾细胞悬液加入到淋巴细胞分离液中 ,2 000 g 离心 30 min ,沿管壁轻轻吸出中间灰白色细胞层 ,重悬于含 10 % FCS的 RPMI 1640溶液中 ;按每&......阅读全文
小鼠免疫实验_－制备免疫脾细胞：用可溶性抗原致敏
实验材料任意品系小鼠（6～8 周）试剂、试剂盒PBS完全和不完全弗氏佐剂抗原仪器、耗材22－G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1. 准备等体积 PBS 含 25～100 μg 抗原和弗氏完全佐剂的乳化液（200～400 μl/鼠）。用双头带塞
显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程
实验概要本实验详细介绍了显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程。实验原理转基因小鼠制备的基本原理是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射法注入供体小鼠的受精卵(或着床前胚胎细胞)，然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中，使其发育成携带有外源基因的转基因动物，通过分
小鼠feeder细胞分离
You will need:13.5 day pregnant mouse (we use MTK NEO inbred white mice)2 sets sterile instrumentsone containing a pair of curved forceps and a pair o
破译声音“疗伤”的密码－首次建立声音镇痛的小鼠模型
声音何以“疗伤”？年轻的科研人员创新思路，建立小鼠模型寻找答案。 日前，中国科学技术大学生命科学与医学部张智教授课题组、美国国立卫生研究院刘元渊教授课题组及安徽医科大学陶文娟副教授课题组合作，在国际学术期刊《科学》发表论文，揭示了声音镇痛的关键因素及神经机制。 早在1960年，《科学》杂志就
间接凝集实验及致敏红细胞制备方法
将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒载体上，然后与相应的抗体结合，也可出现颗粒载体的凝集现象，称为间接凝集反应。间接凝集反应比直接凝集反应敏感性为高，可用于微量抗体或抗原的检查。一、 间接血球凝集实验间接血球凝集实验是根据红血球表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出使之吸附于红血球表面，
小鼠脾脏T细胞和人PBMCs的体外T细胞活化实验（一）
导言成熟T细胞通过TCR识别并与抗原-MHC复合物反应。TCR活化的最直接后果是信号通路的起始，这些信号通路包括诱导特异性蛋白酪氨酸激酶（PTKs）、PIP2分解、PKC活化以及细胞内钙离子浓度的升高。这些早期事件被传递到核，产生诸多效应：1、 T细胞克隆的扩增2、 细胞表面活化标志的上调3、 分化
致敏的特点
对机体进行某种处理，其反应性有所增强，称为致敏。致敏也是变态反应病发病的第一步，并不是一切异体物质都能致敏，但可以致敏的抗原物质种类繁多。
致敏的条件
致敏必须具备两个条件：①患者具有发生变态反应病的遗传素质，只有具备这种素质的人才能被致敏。这种素质是先天决定的，人出生时就已定型，不可能使用任何方法在后天使其发生根本性的改变。②有特定的环境因素，使机体能与抗原接触。使机体与抗原接触机会减少，减轻反应的程度，或是用医疗的手段来对抗所产生的病理效应,这
致敏的条件
致敏必须具备两个条件：①患者具有发生变态反应病的遗传素质，只有具备这种素质的人才能被致敏。这种素质是先天决定的，人出生时就已定型，不可能使用任何方法在后天使其发生根本性的改变。②有特定的环境因素，使机体能与抗原接触。使机体与抗原接触机会减少，减轻反应的程度，或是用医疗的手段来对抗所产生的病理效应,这
致敏的定义
对机体进行某种处理，其反应性有所增强，称为致敏。致敏也是变态反应病发病的第一步，并不是一切异体物质都能致敏，但可以致敏的抗原物质种类繁多。
人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立实验
实验方法原理 采用SCID 小鼠皮下接种107 细胞可成功地建立人人弥漫性大B 细胞淋巴瘤（DLBCL ）移植瘤模型，成瘤率70%，肿瘤的组织学表现类似于人DLBCL。实验材料 SPF 级SCID 小鼠试剂、试剂盒 RPMI 1640培养液青霉素谷氨酰胺链霉素CD19 APC抗体CD20 PE抗体
哮喘治疗抗体药物和动物模型的应用
哮喘是最常见的慢性疾病之一，全球约有3亿患者受到疾病困扰。气道炎症是哮喘患者的病症核心，哮喘可以大致分为嗜酸性粒细胞哮喘和非嗜酸性粒细胞哮喘，嗜酸性粒细胞性气道炎症患者约占重度哮喘患者的40-60%，其发病潜在机制涉及多种类型的细胞和细胞因子参与。如IL‐4参与B细胞和IgE合成的调节，IL‐5
地塞米松诱导少肌性肥胖小鼠模型的建立与评价
地塞米松诱导少肌性肥胖小鼠模型的建立与评价
研究建立新的银屑病关节炎小鼠模型
众所周知，银屑病关节炎(PsA)是一种慢性炎症性疾病，可降低患者的机动性和灵活性，且PsA会增加II型糖尿病的风险。最近发表在FASEB杂志上的一项研究测试了一种新型的小鼠模型，这种模型有一天可能用于治疗人类皮肤病理学，以及关节侵蚀和椎间盘退变，从而改善PsA患者的生活质量。 为了进行这项研究
如何从PBMC中分离出CD4+T细胞
先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物，然后用CD4+T细胞的单抗，免疫磁珠法分离；或者利用流式细胞仪进行分选
致敏淋巴细胞的基本信息
免疫过程通过感应、反应、效应三个阶段，在反应阶段致敏淋巴细胞再次与抗原接触时，便释放出多种淋巴因子（转移因子、移动抑制因子，激活因子，皮肤反应因子，淋巴毒，干扰素），与巨噬细胞，杀伤性T细胞协同发挥免疫功能。
骨骼肌细胞损伤模型的建立
1 材料 地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂,批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮
骨骼肌细胞损伤模型的建立
1 材料 地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂,批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮
肿瘤动物模型建立实验（二）
2．二烃黄樟素（Dihydrosafrole）诱发大鼠食管癌（1）二烃黄樟素是一种制备啤酒的调味品，在大鼠饲料中加入百万分之二千五百至一万（2500～10000 ppm）黄樟素，就能引起20～75%的食管癌。3．甲基苄基亚硝胺诱发大鼠食管癌（1）用0.2%或0.005% 的甲基苄基亚硝胺水溶液，给动
肿瘤动物模型建立实验（二）
5、鼻咽癌（1）二甲基胆蒽（MC）诱发大鼠鼻咽癌① 取直径2～3 mm的硬质塑米管，在酒精灯上小火拉成锥形，每段长约3.5 cm，管内填以结晶体MC。② 小管一端用火封闭，以防药物外溢，尖端用针刺数孔，使MC能从小妃溢出。③ 取体重120 g左右的大白鼠，雌雄均可，乙醚麻醉后，由前鼻孔将上述含MC的
5/6肾切除致慢性肾衰小鼠模型的制备方法
慢性肾衰竭（chronicrenalfailure, CRF）是指各种肾脏病导致肾脏功能渐进性不可逆性减退，直至功能丧失所出现的一系列症状和代谢紊乱所组成的临床综合征，简称慢性肾衰。伴发心血管病变是CRF高死亡率的主要病因。慢性肾衰动物模型的建立有利于CRF的发病机理，组织形态的变化与生态指标及
小鼠单个核细胞的分离实验
基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官： < 6 周龄的小鼠胸腺； 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子（保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中）装 有 19 G 针
小鼠单个核细胞的分离实验
实验步骤基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官： < 6 周龄的小鼠胸腺； 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子（保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中）装 有 19
小鼠角质细胞的分离和培养
实验概要本实验是根据Hennings等（1980）的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS： NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L实验
小鼠精原细胞的分离和纯化
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
小鼠精原细胞的分离和纯化
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗，然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口，用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮肤剥下，用一把镊子夹住身体，另一把镊子拉开皮肤。4) 将
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤 1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗，然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3)
小鼠精原细胞的分离和纯化
实验概要精原细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、运动、衰老、死亡等项生命活动的调节机制的深入研究，精子发生机理的进一步阐明以及精原细胞异体、异种移植技术的实际应用，都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化，以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞，用于体外培养。资料表明，从成年啮齿类的睾丸分离粗线
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS： NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤1. 将1~2天龄新生裸鼠窒息后，置于培养皿中，用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠，流