βTubulin抗体—做出漂亮WB和IHC图片的内参
Tubulin即微管蛋白，是细胞的一种骨架蛋白。Tubulin分为α、β、γ、δ、ε等多种tubulin，其中α-Tubulin和β-Tubulin可以形成异源二聚体，是形成微管的最主要的两种Tubulin。α-tubulin和β-tubulin分子量分别为55kDa和50kDa，其实际检测条带均在55kDa左右。作为内参，β-tubulin的蛋白水平通常不会发生改变，因此被广泛用于Western Blotting时上样量是否一致的参照，也常被用于免疫染色观察细胞的微管结构。如何选择合适的β-Tubulin抗体？内参抗体虽然选择较多，但是也需要遵循一定的原则，并契合实际的应用要求。首先，我们需要考虑目的蛋白的大小，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上，因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参，由于β-Tubulin的检测分子量大约在55kD，因此该内参抗体不是很适合用于检测50kD-60kD大......阅读全文
IHC石蜡技术
实验概要免疫组织化学 (IHC) 是确定组织切片上是否存在蛋白及其位置的一种方法。尽管这种方法在定量分析时灵敏度较免疫印迹法或 ELISA 等免疫测定方法低，但它能了解整个组织的情况。适用于癌症等疾病发展及治疗情况的评估。因此，从 IHC 获得的信 息结合显微技术提供了一副“宏图”，使来自其它
IHC－实验操作步骤
免疫组化方法（石蜡切片）*重要提示：参考抗体说明书选用合适的抗体稀释液和抗原修复处理方法。IHC 方法：抗原修复缓冲液/抗体稀释液A. 所需溶液和试剂1. 二甲苯2. 无水乙醇（100% 和 95%，变性无水乙醇，组织学级）3. 去离
IHC－frozen－sections...
实验概要The method provides a guideline procedure and tips for staining of frozen sections.实验步骤Frozen sections: Once mounted on APES coated slides, frozen
IHC－Protocol－for－Fr...
实验概要The method provides a IHC protocol for free floating brain sections.实验步骤1. Coronal 30-40 µm sections cut on a freezing microtome. Sections colle
western中目标抗体出现，内参出不来是为什么
那就算你的内参抗体有问题了，你们购买的哪家的产品呢？放置了多久，既然你自己的抗体可以出条带，那么组织提取的蛋白肯定是没有问题的，就只有是你的内参抗体有问题了
eBioscience流式抗体常见问题与解答
1、eBioscience公司提供了哪些抗体？ A：物种——人、小鼠、大鼠、非人灵长类、犬类等。检测指标——包括细胞表面标记（CD分子，膜骨架，趋化因子受体）和胞内指标（细胞因子，核内转录因子）。抗体标记——生物素标记抗体，亲和纯化抗体以及直标荧光素抗体。eB抗体的直标荧光素有（括号内是发射光波长
Western－Blot蛋白质磷酸化操作小贴士
WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法，然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做！WB 磷酸化蛋白曝不出条带的时候，会特别沮丧。 Azure君在此给大家列出几点小建议，希望能帮助您改善一下实验结果。 1、样本是否表达： 查阅资料或通过预实验确定。 2、对照设置：
Western－Blot蛋白质磷酸化操作小贴士
WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法，然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做！WB 磷酸化蛋白曝不出条带的时候，会特别沮丧。在此给大家列出几点小建议，希望能帮助您改善一下实验结果。1、样本是否表达：查阅资料或通过预实验确定。2、对照设置：阳性和阴性对照。总蛋白抗体对照，对于特定时间的特定样
抗体分析试验应用的类型
检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体，需要考虑如下几种因素： 分析试验应用的类型 样本蛋白的结构性质 样本的种属 抗体宿主的种类 抗体的标记和检测1.分析试验应用的类型 一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型，如：可以应用于W
DNA损伤的三种分子生物检测方法
DNA是携带生物体遗传信息的重要分子，它的完整性对细胞存活至关重要。然而，在生命活动中，DNA时刻遭受着内源性（氧化自由基、复制叉崩塌等）或外源性（电离辐射、烷化剂等）刺激，DNA损伤不可避免。检测DNA损伤的方法有很多，根据其原理大致可以分为3类： 基于损伤DNA理化性质的改变检测DNA损伤、基于
RTPCR、Western－blot和ELISA三者的区别
PCR是从转录水平上检测目的基因,而非蛋白,从转录到翻译还有复杂的过程,因此基因的表达量与蛋白的表达量不一定是正相关的.WB只能半定量,但是可以检测细胞膜蛋白,这点ELISA做不到ELISA可用定量方法检测蛋白,也就是说你可以观察不同浓度刺激物对目的蛋白的影响基因翻译蛋白质, PCR可以检测基因的表
什么是内参,内参的作用是什么
内参就是取在一般细胞当中表达量较为稳定的基因，你的目的基因要与其进行比较。因为你每次的样品不一定一样，所以必须要有内参进行校正。要是内参没有起峰，那这个数据基本没用。
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实验概要We provide IHC and WB tips and procedure using alkaline phosphatase to determine if the antibody binds only phosphorylated forms of the target
在SEM和TEM之间做出选择
在SEM和TEM之间做出选择 从所提到的一切来看，显然没有“更好”的技术; 这完全取决于需要的分析类型。 当用户想要从样品内部结构获得信息时，透射电镜（TEM）是zui佳的选择，而当需要样品表面信息时，扫描电镜（SEM）是首选。 当然，主要决定因素是两个系统之间的巨大价格差异，以及易用性。 透射电镜
为什么选择组蛋白H3为细胞核的内参指标？
为什么选择组蛋白H3为细胞核的内参指标呢？当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H），或者增殖细胞核抗原（PCNA）等为核内参抗体。除了这些，其它常见的核蛋白内参还有K70， K80， Lamin A和B。但是需要注意的问题是核蛋白内参的选择需要考
原位免疫PCR的IHC增敏方法原理和操作流程
（一）基本原理Sano等（1992）率先利用基因工程的方法表达了A蛋白与链霉亲和素的嵌合体分子获得成功，建立了免疫PCR技术。这是一种新的抗原检测系统，利用细胞工程和基因工程技术，巧妙地将抗原抗体反应的特异性同PCR的敏感性相结合，通过构建单克隆抗体与重组核酸的嵌合体分子，使得利用PCR技术检测蛋白
量子点多色成像揭示乳腺癌标志物的原位分子表达谱
华盛顿大学X. H. Gao教授和埃默里大学R. M. O’Regan教授课题组，将525 nm, 565 nm, 605 nm, 655 nm 和705 nm发射波长的量子点，直接与HER2, ER, PR, EGFR 和 mTOR的一抗进行偶联。上述分子是临床重要的乳腺癌标志物，对于乳腺
集胞藻PCC6803蛋白抗体分类及功能
PHYTOAB公司开发了集胞藻PCC6803蛋白抗体，产品网址链接：http://www.phytoab.com/products/algae-antibodies/cyanobacteria联系电话：400-810-0506PHYTOAB是一家专门从事植物抗体生产和定制服务的企业，总部位于美国加利
5－步搞定－Western－Blot－结果图的灰度扫描
好了，下面就奉上使用 Gel-Pro Analyzer 对 WB 结果进行灰度扫描的详细教程啦。1. 首先按我上次给你们写的教程（献给初学者：手把手教你用 PS 做出漂亮的 WB 结果图），使用 PS 将 WB 结果图处理好，然后打开 Gel-ProAnalyzer（这是一个绿色版的小软件，直接打开
标记羊抗兔IgG保存策略
辣根过氧化物酶（HRP）标记羊抗兔IgG应用：WB（1:1000 - 1:50000）、ELISA（1:500 - 1:10000） IHC（1:50 - 1:500）。 由于具体实验中检测方法的灵敏度，温度及孵育时间等因素均可影响抗体最适工作浓度，所以实验人员进行特定实验时，需根据具体情况
最新白细胞介素研究报告
白细胞介素的由来？它们有什么重要作用？白细胞介素，简称白介素(interleukin, IL)，最初是由白细胞产生并在白细胞间发挥作用，因此而命名并沿用至。1979 年第二届国际淋巴因子专题讨论会将免疫应答过程中白细胞间相互作用的细胞因子统一命名为白细胞介素，在名称后加阿拉伯数字编号以示区别，例
RNA电泳如何得出漂亮的条带？
方法改进:1.电泳槽,制胶器,梳子等的清洗:去污剂浸泡过夜——>自来水冲洗干净——>ddH20 冲洗——>3%H2O2 灌满浸泡过夜——>灭活的 0.1%DEPC水冲洗干净——>超净台内紫外线照射过夜.2.烧瓶,烧杯,药匙,量筒等制胶器械的清洗:0.1%DEPC 水浸泡过夜后高压消毒灭活,烘箱烘干.
如何把细胞养的更漂亮？
1、对细胞君“量才适性” 不同的细胞，生长环境不同，除了细胞君其饮食习惯（培养基）的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。 有一些细胞就是喜欢热闹，对他们来说，数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。比如内皮细胞。而有一些细胞则倾向于离群索居，数量少一点细胞状
如何把细胞养的更漂亮
不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长情况也比较好。这种一般是归于生长速度慢的细胞。比方内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞情况会生长的比较好，比方巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度十分得
免疫学三大工具介绍
IHC(免疫组化Immunohistochemistry)是融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和组织学技术(组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等)，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素)显色，来对组织(细胞)内抗原进行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。样本是细
Western－Blot中抗体的选择
Western Blot又称为蛋白质印迹，是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的基于抗体抗原之间特异免疫反应的一种定量或定性检测蛋白的实验方法。基本原理：聚丙烯酰胺凝胶电泳将不同分子量的蛋白质样品分离，分离后的蛋白被转移到固相支撑物（杂交膜）上，抗体特异性识别目标蛋白，通过酶促反应或者化学发光等
Labeling－Tubulin－and－Quantifying－Labeling－Stoichiometry2
II. Labeling ProtocolThe procedure described below can be scaled down if desired. It is essential to perform all steps involving caged dyes under a sa
定量Western－Blot内参质控的掌握技巧
Western Blot是生物修炼的一大实验，现在不做定量Western Blot，都不敢自诩学霸的了，暗暗擦汗的有没有？在讨论如何从Western Blot中获得定量数据之前，先定义一下我们所说的“定量”是什么意思是非常有用的，何为定量，必须符合下列准则： ♦ 使用一个定义的过程进行检测，即We
图片新闻：墙报区和厂商展示区
墙报展 厂商展台 普析通用展台 赛默飞世尔科技展出了新型的iS10傅立叶变换红外光谱仪 海洋光学展出的三聚氰胺检测模块 雷尼绍公司展台
图说鲜肉IHC/ICC晋级攻略
西土有一名寺，昂迪·赛司腾姆寺，有大师。一日，来了一位东土小鲜肉。鲜肉问大师：“学业有惑，可解？”大师反问：“你术业可是生物？”鲜肉惊奇：“是，大师神奇，何以得知？”大师指鲜肉鞋履：“鞋上两块蓝斑，乃考马斯亮蓝，其渍尚新，你近来必在捣弄蛋白，对否？”鲜肉羞赧：“正是近日检测蛋白，跑胶无数，不慎滴上。