Elisa实验结果管理
1.固相载体的选择 载体的种类很多,其中包括纤维素、交联右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。从使用形式上可有凹孔平板、试管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是应用最广泛的一种载体。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好,操作简便、用量小,适于大批检查。 由于聚苯乙烯的工艺过程不够稳定,造成各批次差异较大。所以进行ELISA之前,必须进行筛选。检查方法: ⑴ 吸附性能的检查:先加抗体包被,然后加入同一稀释度的酶标抗体,最后加底物、显色、测OD值,求出总平均OD值,再求出每相邻两孔的OD平均值,此均值在总均值的±10%以内为合格,若中间孔与四周孔OD值相差太大,或一侧与另一侧孔OD值相差较大均属不合格。 ⑵ 对比测定阳性血清与阴性血清,观察是否存在明显差异,若二者OD值相差于10倍以上者为合格。 板的处理。新板一般不用处理,用蒸馏水冲洗即可应用。板用一次即废。但不少实验工作者认为用超声波处理,清......阅读全文
Elisa实验结果管理
1.固相载体的选择 载体的种类很多,其中包括纤维素、交联右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。从使用形式上可有凹孔平板、试管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是应用最广泛的一种载体。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好,操作简便、用量小,适于大批检查。 由于聚苯乙烯的工艺过程不够稳定,造成各批次差异较
实验操作因素对ELISA结果的影响
ELISA测定一般遵循以下步骤:固相包被→加样品→温育→洗涤→加酶结合物→温育→洗涤→加底物→温育→显色→终止显色→比色正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。ELSIA操
ELISA实验结果为何有时候会复测?
酶联免疫吸附试验(ELISA)具有灵敏度高、特异性好、操作简便、技术可靠、试剂稳定等优点,广泛应用于传染性疾病、肿瘤标志物以及激素等项目的检测,但在ELISA实验过程中时常会出现复测现象即我们时常说的"花板"现象,即空白、阴性对照、阳性对照及室内质控结果正常,血液标本吸光度(OD)值普遍偏高(或个别
elisa实验的数据处理结果分析
免疫测定依其测定结果的表达方式,可分为定性和定量两类。定性测定常以“有”或“无”也即“阳性”或“阴性”来表达测定结果;定量测定的结果则以浓度的方式表达。定性测定结果确定的依据在于阳性/阴性判定值的建立,cut-off值的确立应尽可能地避免假阳性或假阴性结果的出现。除了cut-off值以外,还有许多其
夹心法ELISA实验结果定性判断测定方法
定性测定的效果判别是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简略答复,ELISA试剂盒分别用"阳性"、"阴性"标明。"阳性"标明该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。用定性判别法也可得到半定量效果,即用滴度来标明反应的强度,其实质仍是一个定性实验。在这种半定量测定中,将标本作
怎样断定ELISA实验的结果是否准确?
ELISA实验已经做完,做出来的数据是否准确,有没有达到自己的预期,这些都是有很多条件决定的,具体有哪些条件呢,今天就让上海劲马与您一起分享一下。首先要选择优质的试剂优质的试剂是良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条 件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有差异,国内
如何看明白ELISA试剂盒实验结果?
看明白ELISA试剂盒实验结果是很多才接触ELISA实验的同学*欠缺的部分,不知如何分析;上海劲马技术部特作出如下分析:定性和定量是ELISA测定按其表示测定结果的方式分为的两大类。定性测定是对标本中是否存在待测抗原或抗体作出结论,分别用“阳性"和“阴性"来表示。由此可见传染性病原体的抗原或抗体通常
鸡ELISA试剂盒实验结果与测定
鸡ELISA试剂盒由补体引起的干扰可通过下述方法避免:(1)对临床血清标本加热灭活补体:采用56~C30 min加热可使标本中的补体C1。灭活。(2)包被或酶标二抗使用特异的鸡抗体:鸡抗体不激活人的补体系统,因此,使用特异的鸡抗体,不会出现因补体激活而存在的假阳性和假阴性干扰。异嗜性抗体(heter
ELISA试剂盒实验妙招让你实验结果更稳定
一·ELISA法测细胞凋亡细胞凋亡时,Ca2+,Mg2+离子依赖的内源性核酸内切酶将双链DNA从各核小体间连接区裂断,产生单或寡合苷酸小体,各核小体的DNA与核组蛋白H2A,H2B,H3,H4形成紧密的复合物而对内源性核酸酶有抵抗使之不被内源性核酸酶裂解。主要使用单克隆抗DNA抗体和抗组蛋白抗体直接
ELISA实验结果为什么有时候会复测?
在ELISA实验过程中时常会出现复测现象即我们时常说的"花板"现象,这种现象影响检验结果的正确判读,对工作造成一定的不利影响,一旦出现“花板”,实验结果必须放弃,重新进行,不仅浪费物料和时间,而且还会出现样本量缺少、交叉污染、报告延迟等一系列问题。影响因素分析如下:一、标本因素正确处理标本,防止大规
影响酶联免疫(ELISA)实验结果的因素有哪些?
素质因素实验室人员的素质主要包括五个方面:思想素质、文化素质、技术素质、心理素质、身体素质。首先应具备一个良好的思想素质,因为我们的服务对象是人,我们的道德水平直接关系到人们的健康和生命安危,如果马马虎虎。三心二意,难免会有差错事故发生,我们应该热爱专业,耐心细致。在工作中如标本混淆、张冠李戴、报告
推进检验结果自动审核提升实验室管理效率
作为实验室自动化建设中的一个重要环节,自动审核能帮助提高实验室工作效率,为临床提供快速、准确的检测报告,越来越多的实验室开始尝试、探索、建立、规范临床检验项目结果的自动审核。近日,在由复旦大学附属中山医院检验科主办的"2016临床检验项目结果自动审核沙龙"上,复旦大学附属中山医院潘柏申教授、吴炯
计算ELISA结果教程(一)
作为ELISA的最后一步,检测结果的计算对整个实验十分重要。以夹心法为例。1. ELISA的样本通常要设置1~2个复孔进行检测,分别求出标准品、实验组样本的吸光度的平均值。单个样本的检测值不应超出平均值的20%。2. 样本的OD(吸光度)平均值要减去标准品浓度为0时的OD平均值。3. 建立标准曲线在
计算ELISA结果教程(二)
第四步:查看标准曲线信息(如参数值,R-Square等)第五步:设置坐标轴类型为对数。双击第四步中的拟合曲线图,对其进行编辑。双击X轴、Y轴设置坐标类型为“Log10”。 第六步:根据标准曲线计算样本浓度选择第四个工作表(Fit NLF Find X from Y1),在左列输入样本的OD值,对应的
常见elisa结果判定方法
elisa实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm
如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果?
【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假 ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中,ELISA操作的各方面均对结果产生影响,如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外,一些非主观因
用ELISA试剂盒做实验,你会分析结果吗?
相信有的同学在做完ELISA实验之后,不知道怎么分析结果,然而整个实验*关键的就是结果的处理了。那么在今天的文章中,我司为您带来的是elisa试剂盒检测结果分析方法。①:ELISA实验中样品都要做复孔或三孔,然后计算每个浓度标准品的平均OD值,复孔的变异系数应该小于20%。②:平均OD值减去空白孔的
想要的ELISA实验结果为什么不一致?
绝大多数ELISA试剂盒实验人员最头疼的问题,莫过于试验成果不抱负。其实做科研试验,就是这样在不断探究中寻求真理。很难有人可以的试验成功。可是,我在做试验过程中可以尽量防止哪些常犯的过错呢?今天让我们一同来看一下,影响ELISA试验成果不抱负的原因有哪些?操作前应对试验的物理参数有充沛的了解,如环境
如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果?
【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中,ELISA操作的各方面均对结果产生影响,如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外,一些非主观因素也会对结果
ELISA假阳性结果和细胞假阴性结果
假阳性结果和假阴性结果1、标本的采集与保存ELISA试剂盒当标本采集保存不当产生溶血时,红细胞中的血红蛋白释放到血清中,血红蛋白具有过氧化物酶的性质,其通过吸附或“PP效应"(蛋白质间相互吸附的现象)结合后,可催化A、B液显色而造成假阳性标本采集保存不当致细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,会产生
ELISA实验
实验材料 抗原血清试剂、试剂盒 碳酸盐包被缓冲液PBSTBSA仪器、耗材 96孔酶标板4℃冰箱恒温培养箱分光光度计实验步骤 一、包被抗原 1. 用50mM 的碳酸盐包被缓冲液(pH 9.6)溶解抗原,使抗原浓度为10-20 μg/ml,加100 μl/孔到96 孔酶标板,4℃放置过夜。2. 第二天弃
ELISA实验
实验方法原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。 实验材料
ELISA实验
酶联免疫吸附实验(ELISA)可以用于:(1)检测大分子抗原和特异性抗体等;(2)具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。实验方法原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
elisa的结果如何分析
可以分析1.不同时期抗体水平的变化(OD值),即对照组与实验组有无区别(统计学上的区别)。2.分析个体动物抗体水平达到明显高于对照组的时间差异,用方差分析先看总体上有无差异,然后两比较,看出现差异的每对之间是否由于一些相同的因素而导致了差异的出现,如年龄、性别、体重。3.影响抗体产生的因素很多,如注
elisa的结果如何分析
可以分析1.不同时期抗体水平的变化(OD值),即对照组与实验组有无区别(统计学上的区别)。2.分析个体动物抗体水平达到明显高于对照组的时间差异,用方差分析先看总体上有无差异,然后两比较,看出现差异的每对之间是否由于一些相同的因素而导致了差异的出现,如年龄、性别、体重。3.影响抗体产生的因素很多,如注
elisa的结果如何分析
1.不同时期抗体水平的变化(OD值),即对照组与实验组有无区别(统计学上的区别)。2.分析个体动物抗体水平达到明显高于对照组的时间差异,用方差分析先看总体上有无差异,然后两比较,看出现差异的每对之间是否由于一些相同的因素而导致了差异的出现,如年龄、性别、体重。3.影响抗体产生的因素很多,如注射的部位
ELISA试剂盒结果判定
ELISA试剂盒结果判定在对照组成立的前提下,即参考阳性血清呈棕黄色,参考阴性血清及其它对照孔呈无色或浅黄色, 判定待测结果。1、目测判定 与参考阳性血清孔颜色相当,即呈棕黄色,判为ELISA阳性(+)。2、酶标仪判定(490nm) 以底物溶液对照孔调零,校正参考阳性血清OD值为1.0(或相
elisa的结果如何分析
可以分析1.不同时期抗体水平的变化(OD值),即对照组与实验组有无区别(统计学上的区别)。2.分析个体动物抗体水平达到明显高于对照组的时间差异,用方差分析先看总体上有无差异,然后两比较,看出现差异的每对之间是否由于一些相同的因素而导致了差异的出现,如年龄、性别、体重。3.影响抗体产生的因素很多,如注
elisa的结果如何分析
可以分析1.不同时期抗体水平的变化(OD值),即对照组与实验组有无区别(统计学上的区别)。2.分析个体动物抗体水平达到明显高于对照组的时间差异,用方差分析先看总体上有无差异,然后两比较,看出现差异的每对之间是否由于一些相同的因素而导致了差异的出现,如年龄、性别、体重。3.影响抗体产生的因素很多,如注
ELISA结果计算分析步骤详解
作为ELISA的最后一步,检测结果的计算对整个实验十分重要。以夹心法为例。1. ELISA的样本通常要设置1~2个复孔进行检测,分别求出标准品、实验组样本的吸光度的平均值。单个样本的检测值不应超出平均值的20%。2. 样本的OD(吸光度)平均值要减去标准品浓度为0时的OD平均值。3. 建立标准曲线在