密度阻滞法纯化人外周血单核细胞
试剂和器材： 1. 抗凝血剂：100mmol/L 乙二胺四乙酸或38g/L柠檬酸钠；2. Hepes缓冲生理盐水（HBS）：8.5g/L NaCl、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；3. 淋巴细胞分离液（例如LymphoprepTM或NycoPrepTM1.077）或OptiPrepTM，用Hepes缓冲生理盐水稀释（分别加入5倍体积和17倍体积）；4. 台式低速离心机； 5. 巴斯德吸管（短型和长型）；6. 5—10ml规格注射器和金属套管针；实验方法：1. 用乙二胺四乙酸（2mmol/L终浓度）或柠檬酸钠（38g/L终浓度）作为抗凝剂来收集静脉血；2. 用等体积的Hepes缓冲生理盐水稀释血液，反复多次轻轻颠倒；3. 用塑料巴斯德吸管，取6ml稀释过的血液加入到离心管中3ml的选定介质之上；4. 2......阅读全文
密度阻滞法纯化人外周血单核细胞
试剂和器材： 1. 抗凝血剂：100mmol/L 乙二胺四乙酸或38g/L柠檬酸钠；2. Hepes缓冲生理盐水（HBS）：8.5g/L NaCl、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；3. 淋巴细胞分离液（例如LymphoprepTM或NycoPrepTM1.077）或OptiPre
线粒体分离实验—用蔗糖密度梯度法纯化线粒体
实验材料线粒体悬液试剂、试剂盒蔗糖溶液Tris-HClEDTA仪器、耗材Bockman SW28 号转头实验步骤1. 在用于 Bockman SW28 号转头（或与其等同的产品）的 Uitradear 离心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一层 15 ml 1.5 mol
密度检验法
一、密度与相对密度定义密度：密度是指单位体积的物质的质量，通常用符号ρ（rho）表示，计算公式为密度ρ = 质量m / 体积V。它是物质的基本物理性质之一，反映了物质的“密集程度”。相对密度：相对密度是物质的密度与某一参考物质（通常是水）的密度之比，通常用符号D或sg（specific gravit
吸附法纯化病毒实验
实验方法原理 实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 凝胶材料仪器、耗材 烧杯实验步骤 磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5
蔗糖梯度纯化法实验
实验材料：染色质粗品试剂、试剂盒：聚碳酸酯离心管仪器、耗材：Dounce 匀浆器实验步骤：准备两种 18ml，浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液（聚胺，水相或己二醇法的缓冲液），然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品
抗体的纯化：盐析法
精制抗体的方法很多。一般采用综合技术，避免蛋白变性。如分离IgG时，多结合使用盐析法与离子交换法，以求纯化。提取IgM的方法也很多，如应用凝胶过滤与制备电泳法，或离子交换与凝胶过滤等。一、原理蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度，以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用
抗体的纯化：盐析法
精制抗体的方法很多。一般采用综合技术，避免蛋白变性。如分离IgG时，多结合使用盐析法与离子交换法，以求纯化。提取IgM的方法也很多，如应用凝胶过滤与制备电泳法，或离子交换与凝胶过滤等。 一、原理 蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度，以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。
吸附法纯化病毒实验_凝胶吸附法
实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒凝胶材料仪器、耗材烧杯实验步骤磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5小时使之充分沉淀后应用
DNA纯化实验——PCR清洁试剂盒纯化法
实验方法原理硅胶膜可在高盐条件下结合DNA，又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油、盐离子等杂质因为没有与DNA相似的特性，所以被分离开来。 实验材料PCR产物试剂、试剂盒PCR清洁试剂盒仪器、耗材96孔DNA制备板96孔深孔板96孔V型底板实验步骤一
不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞
(一) 原理 Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(
微量柱法纯化DNA片段
实验概要目的DNA片段的回收技术是重组DNA中的关键技术，回收是指从电泳介质中纯化出目的片断。目前待回收的片断主要有酶切片断和各种PCR片断；回收的介质主要有琼脂糖和PAGE；回收的方法主要有树脂回收、微量柱回收、玻璃奶回收、液氮冻冻融回收及透析袋大量回收等，下面分别介绍树脂、微量柱及液氮冻冻融回收
DNA纯化实验——DNA凝胶回收试剂盒纯化法
DNA纯化可用于：（1）获得高纯度的DNA；（2）浓缩DNA；（3）测序、遗传信息分析等分子生物学应用。实验方法原理本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中提取多至 8 μg DNA（70 bp-10 Kb），回收率为 60-85%。琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A 溶液)中溶解，其中的保护剂能防止线状 D
吸附法纯化病毒实验——红细胞吸附法
实验方法原理用于某些可与红细胞吸附的病毒的浓缩，如正粘病毒和副粘病毒，由于红细胞吸附法是特异的，故可达到浓缩并纯化的目的。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液鸡红细胞悬液仪器、耗材烧杯水浴锅实验步骤用作吸附病毒的红细胞一般选择适宜动物的红细胞，常用的是鸡红细胞。基本步骤为：① 1%~3% 鸡
密度法的原理是什么
物理学方面：密度计法以阿基米德原理为依据:液体对浸在其中的物体的浮力，等于被物体所排开的同样体积液体的质量。当密度计浸人试样中所排开试样的质量等于其本身的质量时，则密度计处于平衡状态，自由漂浮于试样中。试样密度越大，密度计浸没越少，试样密度越小，密度计浸没越多。社会学：密度法是流线上的行人密度直接反
石油产品密度测定仪（密度计法）
本仪器是根据GB/T1884标准设计制作的，适用于密度计法测定试样，在某一恒定温度下的视密度，再按GB-/T1885 “石油密度计量换算表”标准中的表一，查得试样在20℃时的密度（标准密度）。本仪器采用大容量玻璃缸水浴，并且配有高精度智能数字显示控制仪表，具有保温和控温精度高、使用方便和可靠等优点。
吸附法纯化病毒实验_葡聚糖柱层析法
实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液仪器、耗材分光光度计实验步骤(1) 经初步纯化浓缩后的材料，通过葡聚糖 G150 或 G200 柱层析。(2) 用 0. 02~0. 15mol/L 磷酸缓冲液 (pH 7. 0~7. 6) 洗脱，洗脱时适宜流速为 2~5ml/(cm2•h) 。分部收集，
连续梯度法纯化闭环DNA
实验概要本实验介绍了氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法(即连续梯度法)纯化闭环DNA的原理及操作步骤等。实验原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于线性 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。许多年来，纯化大量质粒 DNA 的首选方法是 CsCl
水纯化方法—微孔过滤法
微孔过滤法包括三种类型：深层过滤(depth)、筛网过滤(screen)及表面过滤(surface)。深层滤膜是以编织纤维或压缩材料制成的基质，利用随机性吸附或是捕捉方式来滞留颗粒。筛网滤膜基本上是具有一致性的结构，就像筛子一般，将大于孔径的颗粒，都滞留在表面上(这种滤膜的孔径大小是非常精确的)
抗体纯化：冷酒精沉淀法
1、 血清加3倍体积的蒸馏水，调节 pH至7.7(±)冷却到0℃。在激烈搅拌的条件下，加预冷的酒精（-20℃）到最终浓度为20%，保持在-5℃。产生的沉淀（a），含有大多数种类的免疫球蛋白。2、 沉淀a悬浮于25倍体积的0.15～20mol/l NaCl溶液（冷）中，加有0.05mol/l醋酸调节
硫酸铵纯化法的应用
（一） 先用较低浓度的硫酸氨预沉淀，除去样品中的杂蛋白。 1.边搅拌边慢慢加 SAS 到样品溶液中，使浓度为 0.5:1 (v/v) ； 2.将溶液放在磁力搅拌器上搅拌 6 小时 或过夜（ 4 ° C ）；3.3000 ′ g 离心 30 min （ 4 ° C ），保留上清液；上清液再加 SAS
反复贴壁法纯化的方法介绍
成纤维细胞与上皮细胞相比，其贴壁过程快，大部分细胞能在短时间内(大约10~30min)完成附着过程(但不一定完全伸展)，而上皮细胞(大部分)在短时间内不能附着或附着不稳定，稍加振荡即浮起，利用此差别可以纯化细胞。其方法如下：(1)将细胞悬液接种在一个培养瓶内(最好培养液内不含血清，此时上皮细胞贴壁更
冷酒精沉淀法抗体纯化
1、 血清加3倍体积的蒸馏水，调节 pH至7.7(±)冷却到0℃。在激烈搅拌的条件下，加预冷的酒精（-20℃）到最终浓度为20%，保持在-5℃。产生的沉淀（a），含有大多数种类的免疫球蛋白。 2、 沉淀a悬浮于25倍体积的0.15～20mol/l NaCl溶液（冷）中，加有0.05mol/l醋酸调节
内标法和外标法精密度对比
内标法和外标法是同样可靠的。 内标的优点在于目标基因与管家基因的反应条件最接近一致，缺点在于目标基因与管家基因的引物和探针相互之间会发生竞争与抑制，导致它们的 PCR 效率有差异。 外标的优点在于目标基因与管家基因的引物和探针之间没有发生竞争与抑制的机会，但是不同管之间的反应条件差异比同管的要大，也
测定油品密度的方法之一：石油密度计法
测定油品密度的方法之一：石油密度计法测定油品密度的方法通常有密度计法、比重瓶法和密度测定仪法。生产分析中液体石油产品通常使用密度计法。一 石油密度计法简介：1.密度计法测定液体石油产品密度是按原油和液体石油产品密度实验室测定法(密度计法))的试验方法进行的，该方法等效采用国际标准。2.国家标准规定了
测定油品密度的方法之一：石油密度计法
测定油品密度的方法通常有密度计法、比重瓶法和密度测定仪法。生产分析中液体石油产品通常使用密度计法。一 石油密度计法简介：1.密度计法测定液体石油产品密度是按GB/T1884 原油和液体石油产品密度实验室测定法(密度计法))的试验方法进行的，该方法等效采用国际标准ISO 3675: 19982.国家标
测定油品密度的方法之一：石油密度计法
测定油品密度的方法通常有密度计法、比重瓶法和密度测定仪法。生产分析中液体石油产品通常使用密度计法。 一 石油密度计法简介： 1.密度计法测定液体石油产品密度是按GB/T1884 原油和液体石油产品密度实验室测定法(密度计法))的试验方法进行的，该方法等效采用国际标准ISO 3675
核酸分离与纯化的原则、步骤、磁珠法纯化DNA原理
磁珠提核酸磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸，从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤、磁珠法纯化DNA原理。核酸分离与纯化的原则核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分
免疫球蛋白纯化技术——盐析法纯化免疫球蛋白
在大多数情况下，免疫血清、杂交瘤细胞培养上清以及腹水中的抗体需经纯化后再用于各种免疫学检测中去。免疫球蛋白常用的纯化方法有盐析法、凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析以及高效液相色谱等方法。（来源：医学基础免疫学实验指导，主编金伯泉李恩善，第1 版，北京：世界图书出版社，1990）实验方法原理蛋白质在水
密度梯度细胞分离法
实验方法原理 制备密度梯度液，通过密度梯度液离心细胞，收集各梯度组分，用培养基稀释，培养细胞。 实验材料 细胞样品
密度梯度细胞分离法
实验方法原理 制备密度梯度液，通过密度梯度液离心细胞，收集各梯度组分，用培养基稀释，培养细胞。 实验材料 细胞样品