体外三维基质中原代CD34+细胞的扩增
试剂和材料：1. 培养基：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的IMDM，添加1%牛血清白蛋白，10μg/ml胰岛素，0.1mmol/L 2-巯基乙醇，50U/ml青霉素和50μg/ml链霉素；2. 48孔培养板；3. 0.05%胰蛋白酶，含EDTA；4. 纤维粘连蛋白（fibronectin）包被的细胞基质支架；5. 细胞因子（干细胞因子，IL-6，IL-3，Flt-3配体）；实验方法：1. 用含细胞因子的培养基重悬细胞（100ng/ml干细胞因子，20ng/ml IL-6，20ng/ml IL-3和100ng/ml Flt-3配体）；2. 将2.5×105 CD34+细胞/ml接种到纤维粘连蛋白包被的48孔培养板；3. 每周两次半量更换新鲜培养基；4. 两周后收集细胞；（1）250g离心10min，从三维细胞基质支架中收集非贴壁的细胞；（2）贴壁的细胞用0.05%胰蛋白酶/EDTA孵育细胞基质，37℃孵育30min，随后250g离......阅读全文
体外三维基质中原代CD34+细胞的扩增
试剂和材料：1. 培养基：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的IMDM，添加1%牛血清白蛋白，10μg/ml胰岛素，0.1mmol/L 2-巯基乙醇，50U/ml青霉素和50μg/ml链霉素；2. 48孔培养板；3. 0.05%胰蛋白酶，含EDTA；4. 纤维粘连蛋白（fibronectin）包被的细胞
饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞
试剂和材料：1. MSCs培养基；2. 6孔培养板；3. 丝裂霉素C，100μg/ml；4. 共培养的培养基：IMDM添加10%FBS，100U/ml青霉素和100μl/ml链霉素；5. 细胞因子（干细胞因子，IL-6，Flt-3配体，促血小板生成素）；实验方法：1. 将脐带血来源的间充质干细胞（C
CD34+－细胞的扩增
实验概要CD34 细胞的扩增主要试剂DPBS、HSCs培养液主要设备超净台，倒置显微镜，移液枪，细胞计数器实验步骤（1）分选得到CD34 细胞后用HSC培养液在培养板上进行悬浮培养。（2）每隔2～3天进行半量换液，并进行细胞计数得到生长曲线，培养至19天时细胞增殖约260倍。
原代细胞核基质的制备
试剂和器材： 1. 硫酸铵（含10mmol/L Tris-HCl，（pH7.4）及0.2mmol/L MgCl2的1mol/L与0.2mol/L硫酸铵溶液）；2. 氯化镁（1mol/L储存液）；3. 苯甲基磺酰氟（PMSF）（无水乙醇配制的1mol/L储存液）；4. 纯化的细胞核保存于含0.25mo
小分子“魔法药水”体外实现人类原代肝细胞逆转化和扩增
上海交通大学医学院附属仁济医院鄢和新教授和第二军医大学东方肝脏外科医院王红阳院士研究团队发表了最新原创性成果“Expansion and differentiation of human hepatocyte-derived liver progenitor-like cells and the
原代细胞体外培养现状
原代细胞自然生长有两种方式，锚定依赖或非锚定依赖，这主要取决于它们在体内的组织来源：外周血（非锚定依赖）或固体组织器官（锚定依赖）。原代细胞一旦分离后，24-48h内需要进行贴壁或起始，开始培养。 广义地说，所有的哺乳动物细胞，无论其类型或来源，都需要在与人类生理条件（即37°C，5%CO2）
骨髓基质细胞的原代培养材料和方法
材料方法1.材料：1.1材料来源：取自健康成人行骨髓内固定术扩髓前收集骨髓腔内骨髓。1.2主要试剂DMEM培养基胎牛血清（FBS）β-甘油磷酸钠（β-GP）维生素C青链霉素胰蛋白酶（1:250）-EDTA1.3主要仪器设备双人超净台 Farma Scientific美国单人超净台 Farma Sci
原代肺泡上皮细胞的体外分离培养
1、完全无血液残留肺脏组织：2、消化肺组织：常用细胞消化酶：胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化，或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分离纯化细胞：原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法：（1）密度梯度离心法：密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同
人晶状体上皮细胞在体外基质中的生长与分化
实验概要本文描述了体外生长的人晶状体上皮细胞的生长情况与非永生化人晶状体上皮细胞的成熟过程。从18周大的胎儿晶状体上获得的人晶状体上皮细胞，在培养基中维持在牛角膜内皮(BCE)的细胞外基质(ECM)上，辅以纤维母细胞生长因子(FGF-2)。从培养过程中的特点、生长以及分化以染色体组型、细胞形态、和生
两性离子材料构成的三维水凝胶包裹造血干细胞体外扩增
2019年10月7日，美国华盛顿大学的Shaoyi Jiang教授团队和Fred Hutchinson肿瘤研究中心的Colleen Delaney教授团队在Nature Medicine杂志上发表了文章“Expansion of primitive human hematopoietic ste
体外培养的原代细胞是如何进行培养的
体外培养的原代细胞是如何进行培养的，如果我们在进行体外培养，则就是一个原代细胞划细胞植株要要体外进行一个持续性的培养，则就是必须进行传代。这样方便于获得稳定的细胞植株或是大量的同种细胞，同时还可以维持细胞的种类的一个延续，传代培养的累计次数则就是细胞的代数。同时对于不同的动物与人的正常细胞在体外培养
原代微血管内皮细胞的体外分离培养
微血管内皮细胞生长因子的应用和免疫磁珠技术的发展，使微血管内皮细胞的培养和纯化变得相对简化。 1、微血管内皮细胞培养简述人体主要器官和组织的微血管内皮细胞已经培养成功的有：骨骼肌、心、脑、胃、视网膜、肺、皮肤、脉络膜、小肠、脂肪、肝窦、肾、关节滑膜、胎盘、骨髓、胰岛、角膜及食道等器官组织的微血管内皮
慢病毒用于体外（in－vitro）实验：感染培养原代细胞和...
慢病毒用于体外（in vitro）实验：感染培养原代细胞和建系细胞1. 慢病毒对各种细胞和组织的亲嗜性不同，用户使用Invabio提供的慢病毒之前可以通过查阅相关文献，了解慢病毒对您的目的细胞的亲嗜性，感染复数（MOI 值）以及在体内（in vivo）注射所需要的病毒量。如果没有相关文献支持
慢病毒用于体外（in－vitro）－感染培养原代细胞和建系细胞
1. 慢病毒对各种细胞和组织的亲嗜性不同，用户使用Invabio提供的慢病毒之前可以通过查阅相关文献，了解慢病毒对您的目的细胞的亲嗜性，感染复数（MOI 值）以及在体内（in vivo）注射所需要的病毒量。如果没有相关文献支持，可以通过感染预实验得到合适的感染复数（MOI 值）（使用24孔板检测
人CD34+细胞分选
实验概要人CD34 细胞分选主要试剂HSCs培养液、造血干细胞分选缓冲液、 CD34 磁珠分选试剂盒主要设备磁珠分选系统，离心机，超净台，体视镜，倒置镜，30μm细胞筛，细胞计数仪实验步骤（1）用DPBS将30μm细胞筛润湿，过滤分离得到的单个核细胞，去除细胞团块。（2）用细胞计数仪进行细胞计数，根
体外三维模型或揭示癌细胞转移机制
癌症之所以致命，根本原因之一在于肿瘤细胞临床上的转移性，但是人们对肿瘤细胞侵袭和转移过程的认识尚不清楚。 现在，一项研究有望揭示肿瘤细胞的转移机制，帮助我们更加深入理解癌症的致命机理，从而为探索新治疗手段提供思路。 近日，中科院物理研究所公布了一项新研究进展。该所刘雳宇研究员与美国科学家合作
Science：原代人肝脏细胞在体外的长期功能性维持
北京大学生命科学学院邓宏魁教授课题组、解放军总医院卢实春教授课题组和复旦大学袁正宏教授课题组合作,在《科学》（Science）杂志上发表了题为“原代人肝脏细胞在体外的长期功能性维持（Long-term functional maintenance of primary human hepatoc
脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的原代培养
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基仪器、耗材组织培养瓶 25cm2实验步骤(a)待细胞贴壁生长2〜4天后换液。(b)换液时通过弃去培养基，从而去除未贴壁的细胞。(c)以后每周更换培养基2次。
腺病毒体外在293细胞中大量扩增的方法
在293 细胞中大量扩增腺病毒一旦重组病毒已被纯化和鉴定，即可在293 细胞中进行大量扩增。本手册提供了递增培养规模和腺病毒感染周期的基本方法，按这一方法最终得到的病毒量约为3×1011～3×1012。由于一个细胞中所含的病毒颗粒为1000～10000，因此1L 培养细胞可得到约5×1012 病毒颗
上海生科院实现肌肉干细胞在体外扩增
5月15日，学术期刊Cell Research 在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所胡苹研究组和王红艳研究组合作研究的最新论文：Combination of inflammation-related cytokines promotes long-term muscl
《自然》：造血干细胞体外千倍扩增
几十年来，科学家都在追求能够在体外大量扩增造血干细胞（HSC）的办法。 造血干细胞移植是血液肿瘤等血液病的终极解决方案，也与近几年火热的基因治疗相关。但造血干细胞扩增之难始终局限着临床应用。 如今这个问题有了一个意想不到的解答。美日两国科学家团队联手发现，阻碍造血干细胞扩增的是培养基中存在的
如何检测原代细胞中的自噬
凋亡会染色体固缩，染色加深，细胞膜内陷形成凋亡小体，最后细胞解体；坏死貌似是细胞的直接裂解（我不是很了解）；自噬是形成双层膜的自噬泡，包裹胞质内的物质，然后与溶酶体融合消化掉内容物。
原代细胞培养中的常见错误
当培养原代细胞时，重要的是要记住，他们不是细胞系，不能同等对待。我们非常熟悉研究人员在培养原代细胞时遇到的常见问题。这里有六个在原代细胞培养中的常见错误，以及如何纠正这些错误。 错误1：一小管原代细胞在水浴中解冻一段时间纠正1：原代细胞对解冻过程非常敏感，因此将小瓶置于37℃水浴中，保持并轻轻旋转直
如何检测原代细胞中的自噬
凋亡会染色体固缩，染色加深，细胞膜内陷形成凋亡小体，最后细胞解体；坏死貌似是细胞的直接裂解（我不是很了解）；自噬是形成双层膜的自噬泡，包裹胞质内的物质，然后与溶酶体融合消化掉内容物。
原代细胞实验中样本的处理方法
原代细胞实验中样本的处理方法1. 血清：全血标本于室温放置2小时或4℃后于1000×g离心20分钟，取上清即可检查，搜集 血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。 2. 血浆：抗凝剂举荐运用EDTA.Na2，标本搜集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可 检查。防止运用溶血，高血脂
体外细胞的原代培养、传代培养、冻存和复苏
一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养；当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养， 即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。细胞冻存及复苏的基
体外细胞的原代培养、传代培养、冻存和复苏
一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养；当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养， 即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。细胞冻存及复苏的基本原
体外细胞的原代培养、传代培养、冻存和复苏
一、实验原理细胞培养可分为原代培养和传代培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养；当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养， 即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。细胞冻存及复苏的基
Nature子刊－造血干细胞在三维两性离子水凝胶环境的扩增
基于造血干细胞体外扩增和基因修饰的治疗技术在临床上的应用潜力巨大，如何解决干细胞离体后的分化并最大程度的保持其再生能力是制约这一技术发展的最大挑战。脐带血是造血干细胞的主要来源，但稀少的数目制约了它的进一步临床应用，科学家们在近年研发出各种临床相关的造血干细胞体外扩增办法：包括Notch-1 配
pcr体外扩增电泳图分析
聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。 1.jpg PC