显微成像小课堂丨告别非焦平面信息干扰
虽然我们常说的分辨率指的焦平面上的分辨率(即XY方向),决定分辨率高下的决定因素是物镜的数值孔径,但是其实在宽场荧光显微镜中,样本中整个被照亮的区域都会发射出荧光,这些非焦平面上的荧光其实对于焦平面上发射出的荧光,也就是我们真正关注的信息来说就是一种干扰,这也可以理解为在Z方向上,也是有分辨率的。为了解决非焦平面信息的干扰,一系列的显微成像方法应运而生。 激光扫描共聚焦显微镜 激光扫描共聚焦显微镜比传统的宽场荧光显微镜有几个优点,包括可以控制景深、消除离焦平面图像的信息,以及对厚样本进行连续光学切片的能力。共聚焦方法的关键是使用空间过滤,通过针孔照亮物镜,消除比焦平面厚的样品中的聚焦光或耀斑。简而言之,就是在检测端放置一个叫做针孔的装置,过滤来自于非焦平面上的信息(见图6和图8(b))。基于振镜式的扫描系统使聚焦后的激光在样本上形成小点形式的针孔的图像。这个斑点反过来在检测端的针孔上形成一个反射的落射荧光图像......阅读全文
显微光谱测量设备能够用于哪些平面的观测?
显微光谱测量系统的结构可分为三个模块:照明模块、光谱接收模块以及成像模块。 照明模块可分为科勒照明和共焦照明:科勒照明的光源一般为显微镜自带的卤素灯,通过透镜组将卤素灯丝成像于物镜的后焦平面上,如此,物体可获得较为明亮且均匀的全场照明;共焦照明是将照明光源(例如激光、氙灯等)通过光纤引入,光
共聚焦扫描显微镜的成像原理
采用点光源照射标本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜收集,并沿原照射光路回送到由双向色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。两者的几何尺寸一致,约100-200nm;相对于焦平面上的光点,两者是共
给孩子们的风险小课堂
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/506774.shtm在充满不确定性的世界中,如何帮助孩子们正确认识各种不期而遇的风险?如何让他们得到更好的风险教育?8月17日,“不确定性世界漫游指南”亲子科普共读活动在上海书展现场举办。 ?
电转染小课堂之如何选择波形
欢迎大家订阅电转染小课堂,本期我们来分享如何选择电穿孔的波形,各波形需要设置的参数有哪些?以及两种波形之间的转换Part 1 方波方波脉冲是指电压瞬间升至预设电压,保持电压放电,然后瞬间终止放电。一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲,有较高的转染效率和细胞存活率。选择方波时,有以下参数要进行考虑:场
电转染小课堂之如何选择波形
欢迎大家订阅电转染小课堂,本期我们来分享如何选择电穿孔的波形,各波形需要设置的参数有哪些?以及两种波形之间的转换 Part 1 方波 方波脉冲是指电压瞬间升至预设电压,保持电压放电,然后瞬间终止放电。一般哺乳动物细胞电转染时选择方波脉冲,有较高的转染效率和细胞存活率。选择方波时,有以
Joe-Flow的流变学小课堂
温度控制:加热和冷却“今天,我想跟大家谈谈温度控制在流变测量中的重要性。要了解温度对样品流变特性的影响程度,只需测试同一个校准过的标准样品在不同温度下的粘度值就可以了。即使两次测量之间温度仅相差 1 ℃,都会导致 7 % 的粘度值变化。因此,地温度控制极其重要。”01哪种温控设备适合哪个温度范围?
从原理到实践-如何拍出高质量TEM照片
作为材料研究人员,最关心的问题之一就是材料性能与微观结构之间的关系。透射电子显微镜自上个世纪三十年代发明以来,就一直为材料的结构和成分表证提供强有力的支持。废话不多说,咱们直奔主题吧,相信点进来看这篇文章的各位都是有一定电镜基础的童鞋,但是为了更好的理解透射电镜的操作和拍摄技巧,咱们还是不妨先回顾一
(双光子、共聚焦)荧光显微镜和普通显微镜的区别
最近试着做了一些小鼠的冰冻切片,接下来要使用荧光显微镜看自己打的病毒是否在自己想要的脑区。荧光显微镜的一些基本原理需要简单学习一下,也在此分享一下。 荧光显微镜是利用紫外线为光源,用以照射被检验的物体,使该物体发出光源,然后在显微镜下进行对物体的观察。主要是用于免疫荧光细胞,主要是由光源、滤板
关于非小细胞肺癌的基本信息介绍
肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,已成为我国城市人口恶性肿瘤死亡原因的第1位。非小细胞型肺癌包括鳞状细胞癌(鳞癌)、腺癌、大细胞癌,与小细胞癌相比其癌细胞生长分裂较慢,扩散转移相对较晚。非小细胞肺癌约占所有肺癌的80%,约75%的患者发现时已处于中晚期,5年生存率很低。
激光共聚焦显微镜的原理及优点
激光共聚焦显微镜厂家LEXT OLS4100 全新的多层模式则可以识别多层样品各层上反射光强度的峰值区域,并将各层设为焦点,这样即可实现对透明样品上表面的观察和测量,而且也可以对多层样品的各层进行分析和厚度测量。激光共聚焦显微镜优点 1、以激光为光源,在相应的荧光探针标记后,对样本进行逐点扫
透射电镜的成像原理你了解了吗|必看篇
透射电镜中的成像原理利用的是阿贝成像原理。 阿贝(Abbe)于1873年对相干光照明的物体提出了两步衍射成像原理。即衍射谱(傅里叶变换)和两次衍射成像的概念,并用傅里叶变换来阐明显微镜成像的机制。1906年波特以一系列试验证实了阿贝成像原理。阿贝成像原理的意义在于:它以一种新的频谱语言来描
共激光扫描共聚焦显微镜
共激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope,LSCM)是一种先进的分子生物学和细胞生物学研究仪器。它在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,结合数据化图像处理技术,采集组织和细胞内荧光标记图像,在亚细胞水平观察钙等离子水平的变化,并结合电生理等技术
平面式叶绿素荧光成像简介和特点
平面式叶绿素荧光成像系统是一款定制型的荧光成像系统,用于大型生长盘中样品的通量成像和多谱段分析。机体采用金属柜体设计,可以轻松移动、安全存储和运输,样品可以轻松的放入测量区域,柜子内部是自动控制高度和位置的光源是相机。 平面式叶绿素荧光成像系统特点: ·测量面积80cm x 40cm; ·
激光共聚扫描显微镜的技术原理
从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。 共焦显微镜[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dichr
活细胞成像是直接把培养的细胞放到工作站吗
一、活细胞成像系统原理目前主流的活细胞成像系统从原理上可以分为两大类:基于宽场反卷积技术基于共聚焦技术两种技术作为目前最流行的活细胞成像技术,均可以实现在维持细胞存活的情况下,快速获取单一焦平面的信号,在具体性能上则各有擅长。宽场反卷积技术对光线进行反卷积运算是光学成像领域的成熟技术,最早由美国国家
活细胞成像是直接把培养的细胞放到工作站吗
一、活细胞成像系统原理目前主流的活细胞成像系统从原理上可以分为两大类:基于宽场反卷积技术基于共聚焦技术两种技术作为目前最流行的活细胞成像技术,均可以实现在维持细胞存活的情况下,快速获取单一焦平面的信号,在具体性能上则各有擅长。宽场反卷积技术对光线进行反卷积运算是光学成像领域的成熟技术,最早由美国国家
激光聚焦显微镜的原理
激光聚焦显微镜是一种高分辨率的显微成像技术。普通的荧光光学显微镜在对较厚的标本(例如细胞)进行观察时,来自观察点邻近区域的荧光会对结构的分辨率形成较大的干扰。共聚焦显微技术的关键点在于,每次只对空间上的一个点(焦点)进行成像,再通过计算机控制的一点一点的扫描形成标本的二维或者三维图象。在此过程中,来
共聚焦扫描仪的原理
激光扫描共聚焦扫描仪的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源,在荧光标记标本的焦平面上逐点扫描,采集点的光信号通过探测针孔到达光电倍增管(PMT),再经过信号处理,在计算机监视屏上形成图像。对于物镜焦平面的焦点处发出的光在针孔处可以得到很好的会聚,可以全部通过针孔被探测器接收。而在焦平面上下
共聚焦扫描仪的原理
激光扫描共聚焦扫描仪的主要原理是利用激光扫描束通过光栅针孔形成点光源,在荧光标记标本的焦平面上逐点扫描,采集点的光信号通过探测针孔到达光电倍增管(PMT),再经过信号处理,在计算机监视屏上形成图像。对于物镜焦平面的焦点处发出的光在针孔处可以得到很好的会聚,可以全部通过针孔被探测器接收。而在焦平面上下
前沿显微成像技术专题——转盘式共聚焦显微镜(1)
传统的荧光显微技术在生物成像领域有两个难以克服的挑战:一是对生物样品的结构做3D成像。在传统宽场荧光显微镜中,照明光会照亮光路上的整个样品,来自非焦平面的杂散光信号也会被成像物镜收集到(图1),干扰所要观察的样品信号,不但降低横向分辨率,轴向分辨率也只能达到2.5µm左右,比大多数生物结构都要大,因
从原理到实践-如何拍出高质量TEM照片
作为材料研究人员,最关心的问题之一就是材料性能与微观结构之间的关系。透射电子显微镜自上个世纪三十年代发明以来,就一直为材料的结构和成分表证提供强有力的支持。废话不多说,咱们直奔主题吧,相信点进来看这篇文章的各位都是有一定电镜基础的童鞋,但是为了更好的理解透射电镜的操作和拍摄技巧,咱们
共聚焦显微镜拍照与普通荧光显微镜拍照有什么不同
共聚焦显微镜拍照与普通荧光显微镜拍照有什么不同 共聚焦显微镜用激光做光源,光电倍增管做检测器,逐点扫描,对应每个像素其能量比较高;普通荧光显微镜用汞灯作为光源,虽然总功率高,但属于场照明,对应每个像素的能量并没有激光高。 共聚焦利用针孔成像,可以排除焦平面上焦点以外及非焦平面杂
关于共聚焦显微镜的知识
共聚焦显微镜是由显微镜光学系统、激光光源、扫描器及检测及处理系统4部分组成,采用相干性较好的激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对图象进行处理的一套观察、分析和输出系统。 共聚焦显微镜的共聚焦成像能有效抑制焦平面外的杂散光和非测量光进入探测器,实现单一焦
前沿显微成像技术专题之:光片荧光显微镜(一)
在过去二十多年中,光学显微成像技术发展迅速,不断突破传统极限。生命科学研究,要求成像系统在不影响生物活性的前提下,实现更大视野,更高分辨率,更高速度的三维成像。这也意味着对成像探测器 - 科研相机的要求也越来越高。从本周开始,我们将为大家带来前沿显微成像技术专题系列,和大家一起探讨前沿的显微成像技术
快速超分辨激光共聚焦STELLARIS8-FalconSTED共享
仪器名称:快速超分辨激光共聚焦STELLARIS8 Falcon-STED仪器编号:A21000020产地:德国生产厂家:LEICA型号:STELLARIS 8出厂日期:20230814购置日期:20221214所属单位:生命学院>蛋白质研究技术中心>细胞影像平台放置地点:生物医学馆U6-101固定
告别传统课堂,《人工智能通识》如何用AI学AI
8月30日,记者从西南交通大学获悉,为积极贯彻落实国家教育数字化战略行动,以数字化开辟教育发展新赛道、塑造发展新动能,进一步推动人工智能赋能教育教学转型,学校将打造面向全校师生的人工智能通识课程《人工智能通识》,该课程是学校的首门AI课程。《人工智能通识》课程将于2024年秋季学期在线上线下同步上线
【锐赛小课堂】miRNA研究之RNA标记
RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求: 1. 操作简单,灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性
讲讲透射电镜既能得到衍射谱又能观察像的原因
透射电镜(TEM)应用领域非常广泛,如癌症研究、病毒学、材料科学、以及纳米技术、半导体研究等等。下面就给大家讲讲它的成像原理。 根据电子光学中的衍射谱和两次衍射成像原理,当一平行光束照射到具有周期结构特点的物样时会产生衍射现象。除零级衍射束外还有各级衍射束,经过物镜的聚焦作用,在其后焦面上
共聚焦的共焦显微
共焦显微技术是由美国科学家M.Minsky在1957年提出的,当时的主要目的是消除普通光学显微镜在探测样品时产生的多种散射光。20世纪60年代通过提高扫描精度突破了普通宽场成像的分辨率限制,在20世纪80年代研制成商用共焦显微镜。共焦显微镜分为普通光照明激发和激光照明激发两种类型,而以后者应用最为广
激光扫描共聚焦显微镜技术原理
光学显微镜作为细胞生物学的研究工具,可以分辨出小于其照明光源波长一半的细胞结构。随着光学、视频、计算机等技术飞速发展而诞生的激光扫描共聚焦显微镜 (Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM),则使现代显微镜有能力研究和分析细胞在变化过程中的结构。特别是