2.5％X－gal（5溴4氯3吲哚－β半乳糖苷）配制方法
溶解25mg的X－gal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管，贮存于-20℃。......阅读全文
2.5％－X－gal（5溴4氯3吲哚－β半乳糖苷）配制方法
溶解25mg的X－gal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管，贮存于-20℃。
实现胞外衰老相关β半乳糖苷酶活性的快速灵敏检测
近日，中国科学院合肥物质科学研究院健康与医学技术研究所研究员杨良保课题组在胞外衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）活性灵敏检测方面取得新进展。相关研究成果发表在Analytical Methods上。 细胞衰老是生物衰老的潜在原因之一，也与原发性卵巢癌及多种衰老相关疾病相关。β-半乳糖苷
关于重组子的筛选方法介绍
1、抗生素筛选法：菌株为某种抗生缺陷型，而质粒上带有该抗性基因（如氨苄青霉素，卡拉霉素等）这样只有转化子才能在含该抗生素的培养基上长出。本实验利用抗生筛选转化子。 2、互补法：至今使用的许多载体（如PUC系列）有含有一个大肠杆菌DNA的短区段，其中含有β－半乳糖苷酸基因（lacZ）的调控序列和
重组DNA分子导入原核细胞及PCR检测
一、目的与意义 学习使用大肠杆菌感受态细胞导入外源DNA，使学生掌握DNA分子进入细胞的原理和实验操作技术; 掌握PCR法快速鉴定重组载体的基本操作。 二、实验原理 转化是指将质粒DNA或构建的重组子导入细胞的过程。细菌细胞在低温，低渗（CaCl2溶液）中膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成了抗DN
噬菌体展示技术研究RNA结合蛋白实验（一）
实验方法原理 噬菌体展示技术是将外源基因与噬菌体的表面蛋白基因融合，在融合了外源基因的噬菌体颗粒的表面就会表达相应的外源蛋白，即外源基因编码的蛋白被展示在噬菌体颗粒的表面。实验材料 载体tRNA抗体寡核苷酸试剂、试剂盒 抗生素储存液BCIP葡萄糖储存液X-Gal磁珠洗液蛋白酶抑制剂RNase 抑制剂
重组子的筛选的原理和方法
根据载体 的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS)，它并不破坏读框，但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而
检测实验室常见120种有毒物质介绍（五）
(81)三氯乙酸：有很强的腐蚀性。戴好手套和护目镜。 (82)三乙胺：有剧毒，易燃。对皮肤、眼睛、黏膜和上呼吸道有强腐蚀性。吸入，摄入，皮肤吸收可造成损伤。戴好手套和护目镜。始终在通风橱内操作。远离热源、火花和明火。 (83)三乙醇胺：吸入，摄入，皮肤吸收可造成损伤。戴好手套和护
重组质粒的筛选（抗生素平板筛选和α互补筛选）
重组DNA转化受体细胞后，须在不同水平上进行筛选，以区别转化子与非转化子、重组子与非重组子以及鉴定所需的特异性重组子。在转化过程中，并非每个受体细胞都被转化；即使获得转化细胞，也并非都含有目的基因，所以需采用有效方法进行筛选。筛选的方法包括根据遗传表型筛选、限制性内切酶分析筛选、核酸探针筛选、PCR
药理毒理动物实验技术服务|实验技术服务
测序实验流程：药理毒理动物实验服务供应人elisa试剂盒、大鼠elisa试剂盒、小鼠elisa试剂盒、兔elisa试剂盒等。标本有：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。常用生化试剂作用： 1
大肠杆菌感受态细胞的制备、重组DNA的转化、克隆筛选－一
1. 实验目的和要求通过本实验学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞和外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术以及筛选转化体的技术。了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2. 相关知识及原理感受态细胞(Competent cells)：受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl2，RuCl等化学试剂法）
重组质粒的连接、转化及筛选
实验概要本技术以pBS质粒、E. coli DH5α为例介绍了重组质粒的连接、转化及筛选。实验原理本实验所使用的载体质粒DNA为pBS，转化受体菌为E.coli DH5α菌株。由于pBS上带有Ampr 和lacZ基因，故重组子的筛选采用Amp抗性筛选与α-互补现象筛选相结合的方法。因pBS带有Amp
实验常用试剂的制备与储藏（一）
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（amm
β半乳糖苷酶基因在基因工程中的应用介绍
β-半乳糖苷酶基因在基因工程中的应用：β-半乳糖苷酶基因被广泛地应用于包括作为报告基因、构建载体、转基因研究和基因治疗等多个分子生物学研究领域。具体介绍如下：1在载体构建中的应用β-半乳糖苷酶可催化X-ga1（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷） 水解，产物呈蓝色，易于检测和观察，基于这一特
利用α互补现象筛选带有插入片段的重组克隆的原理
现在使用的许多载体都带有一个E.coli DNA的短区段，其中含有β-半乳糖苷酶的-α肽基因（lacZ’）的调控序列和头146个氨基酸的编码信息。这个编码区中插入了一个MCS，它并不破坏读框，但是可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能，这种载体适用于编码β-半乳糖苷酶C端部分序列
β半乳糖苷酶基因在基因工程中的应用
β-半乳糖苷酶基因被广泛地应用于包括作为报告基因、构建载体、转基因研究和基因治疗等多个分子生物学研究领域。具体介绍如下：1在载体构建中的应用β-半乳糖苷酶可催化X-ga1（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷） 水解，产物呈蓝色，易于检测和观察，基于这一特点，β-半乳糖苷酶基因常作为载体组分，
概述β半乳糖苷酶基因在基因工程中的应用
β-半乳糖苷酶基因被广泛地应用于包括作为报告基因、构建载体、转基因研究和基因治疗等多个分子生物学研究领域。具体介绍如下： 1、在载体构建中的应用 β-半乳糖苷酶可催化X-ga1（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷） 水解，产物呈蓝色，易于检测和观察，基于这一特点，β-半乳糖苷酶基因常
快速蛋白质斑点印迹试验
试剂、试剂盒 Tris缓冲盐溶液(TBS) TBS+1%牛血清白蛋白 TBS+0.1%Tween-20(TBST) 5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸 氮蓝四唑(BCIP NBT)显
快速蛋白质斑点印迹试验
试剂、试剂盒Tris缓冲盐溶液(TBS)TBS+1%牛血清白蛋白TBS+0.1%Tween-20(TBST)5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸 氮蓝四唑(BCIP NBT)显色试剂鼠抗σ32单克隆抗体3RH2(MAb 3RH2)兔抗鼠免疫球蛋白G(IgG)~碱性磷酸酶缀合物仪器、耗材硝酸纤维素膜实验步骤
快速蛋白质斑点印迹试验
试剂、试剂盒 Tris缓冲盐溶液(TBS)TBS+1%牛血清白蛋白TBS+0.1%Tween-20(TBST)5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸 氮蓝四唑(BCIP NBT)显色试剂鼠抗σ32单克隆抗体3RH2(MAb 3RH2)兔抗鼠免疫球蛋白G(IgG)~碱性磷酸酶缀合物仪器、耗材 硝酸纤维素膜
盐酸阿比朵尔的基本介绍
中文名称:盐酸阿比朵尔 中文别名:6-溴-4-(二甲氨甲基)-5-羟基-1-甲基-2-(苯硫甲基)-1H-吲哚-3-羧酸乙酯盐酸盐；盐酸阿比多尔；6-溴-4-(二甲氨甲基)-5-羟基-1-甲基-2-(苯硫甲基)-1H-吲哚-3-羧酸乙酯盐酸盐一水合物；盐酸阿米朵尔；盐酸阿比朵儿 英文
吲哚3乙酸的制备方法
由吲哚、甲醛与氰化钾在150℃，0.9～1MPa下反应生成3-吲哚乙腈，再在氢氧化钾作用下水解生成。或由吲哚与羟基乙酸反应而得。在3L不锈钢高压釜中，加入270g（4.1mol）85%在氢氧化钾，351g（3mol）吲哚，然后慢慢地加入360g（3.3mol）70%的羟基乙酸水溶液。密闭加热至250
非放射性Dig－dUTP
[原理]DNA是通过异羟基洋地黄毒苷（digoxigenin，Dig）配基标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸（dUTP）随机插入结合而被标记。dUTP通过间臂连结类固醇半抗原异羟基洋地黄毒苷酸基，形成Dig-dUTP，杂交反应后，杂交的靶DNA通过酶联免疫法与一个抗体复合物[抗异羟基洋地黄毒苷配基碱性磷酸酶
大肠杆菌感受态细胞的几种制备方法
常态的细胞不能摄入外部溶液中的 DNA，，所以要转化质粒 DNA 进入大肠杆菌必须首先 制备感受态的大肠杆菌细胞。受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl，RuCl 等化学试剂法） 的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源 DNA 的载体分子通过的感受态细 胞(competent ce
重组质粒（dna－recombinant－plasmid）的连接、转化及筛选2
第二节 材料、设备及试剂一、 材料外源DNA 片段: 自行制备的带限制性末端的DNA 溶液,浓度已知; 载体DNA : pBS质粒(Ampr ,lacZ),自行提取纯化,浓度已知; 宿主菌: E. coli DH5α,或JM系列等具有α-互补能力的菌株。二、 设备恒温摇床，台式高速离心机，恒温水浴锅
常用报道基因的功能对比
道基因的对比报道基因作用方式优点缺点氯霉素乙酰基转移酶（CAT；细菌）CAT通过使乙酰基与抗生素共价连接的方式来解除氯霉素的毒性，报道基因实验通常检测n-丁酰基的一半从辅助因子n-丁酰辅酶A转移到具有放射活性的氯霉素上，被修饰的氯霉素的迁移率发生改变，并且能够掺入有机溶剂。没有内源活性；可使用自动化
常用贮液与溶液（一）
1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：
细菌性阴道病：4－种检验方法手把手学会
在因外阴瘙痒及白带恶臭就诊的女性患者中，细菌性阴道病（Bacterial Vaginosis，BV）是主要病因，但大部分细菌性阴道病患者并无明显的临床症状。那么，什么是细菌性阴道病？为何会患病？检验科怎样检测出来？今天就来一起聊聊细菌性阴道病这个话题。什么是细菌性阴道病？健康女性的阴道中有相对稳定的
蓝白斑筛选及其原理
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法： 是根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使
细菌的转化与平板筛选
实验概要本实验介绍了细菌的转化与平板筛选的原理及操作步骤。实验原理 感受态是指细菌处于容易吸收外源DNA的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导人细菌的过程。其原理是细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面
分子生物学常用贮存液的配制
分子生物学常用贮存液的配制 1、30%丙烯酰胺溶液 【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml.用滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。