磷酸缓冲液（phosphatebuffer）
按照下表所给定的体积，混合1 mol/L 的磷酸二氢钠（单碱）和1mol/L 磷酸氢二钠（双碱）贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1 mol/L 的磷酸二氢钠（NaH2PO4•H2O）贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠（Na2HPO4）贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。1mol/L 磷酸二氢钠（ml）1mol/L 磷酸氢二钠（ml）最终pH值8778508157757356856255655104503903302801231501852252653153754354905506106707206.06.16.26.36.46.56.66.76.86.97.07.17.2......阅读全文
Isolation－of－Actin－and－Myosin－Filaments
LEVEL IIIMaterialsRelaxing Solution0.1 M KCl0.001 M MgCl5 mM ATP0.016 M NaHPONaHPOAdjust pH to 7.30.05 M Sodium phosphate buffer, pH 7.00.001 M EDTA (
流式细胞术检测细胞凋亡
实验概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis. 实验原理Apoptosis is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal part o
细胞沉淀可以用蛋白loading－buffer溶解吗
细胞沉淀里面是可以用这个溶解的，只不过在溶解的时候它的速度可能会更快的。
红细胞裂解液（RBC－Lysis－Buffer,10×）－操作步骤
、组织细胞样本的常规操作1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～2min。 3、离心，弃红色上清。本步骤亦可在室温下操作。4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述
煮沸后的蛋白加入sds－buffer的储存方法
可以蛋白电泳1×loadingbuffer可以配制出来，但是却很难在实际使用的时候用上比如说蛋白电泳5×loadingbuffer，在使用的时候也就是1个体积的loadingbuffer要加上4个体积的蛋白样品。这样最后的蛋白电泳loadingbuffer就被稀释到1×loadingbuffer如果
PBS缓冲液和Hanks缓冲液的区别
万能缓冲液PBS我实验时经常用到PBS缓冲液，但是很多文献里面也用到了Hanks缓冲液，不知道这两种缓冲液在细胞培养 方面有什么区别吗?也就是说它分别适合于哪些情况?PBS ：磷酸缓冲盐溶液——具有pH缓冲作用的等渗盐溶液。PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液，一般选择K2HPO4和KH2PO4配制，因为钠
Acetylation－(or－Succinylation)－of－Amino－Groups－on－Proteins
Acetylation (or Succinylation) of Amino Groups on Proteins REFERENCE: Hanock and Benz. 1986. BBA. 860:699-707. PURPOSE: Derivitization of amino g
微生物培养基的原理、制作和现象：改良磷酸盐缓冲液
改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)成分 磷酸氢二钠(Na2HPO4 8.23g 磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O) 1.2g 氯化钠(NaCl) 5.0g 三号胆盐 1.5g 山梨醇
微生物培养基的原理、制作和现象：明胶磷酸盐缓冲液
成分 明胶 2g 磷酸氢二钠 4g 蒸馏水 1000mL pH6.2制法 加热溶解，校正pH，121℃高压灭菌15min。
Indirect－ELISA
实验概要 In the indirect ELISA, the enzyme-antibody conjugate uses an antibody against the type of antibody that is used to detect the antigen, kind of
Fixation－and－Embedding－of－Microtubules－for－Electron－Microscopy
(This procedure can also be used for virtually any material that must be pelleted prior to fixation and thin sectioning) Primary fix: 2% glutaralde
Radioiodination－of－protein
Radioiodination (by Jun Takagi,6/16/2000)Purpose and backgroundsPrinciple of radioiodinationAddition of oxidizing reagents (such as chloramine-T or pe
蛋白质提取的好办法
你试一试这两种方法:第一种：1）将细胞系放在冰上2）去除上清，用pH7。4的冷磷酸盐缓冲液洗涤单层细胞两次3）加入1ml2%TritonX溶液冰浴15min4)刮下单层细胞，4度下10 000g 5min离心5）溶液37度水浴 10min以分离水相和去污剂相，然后37度下2 000g离心5min6)
Nif对花粉管微丝骨架介导的胞吞、胞吐作用的调节
实验概要了解Nif对花粉管微丝骨架介导的胞吞、胞吐作用的调节作用。主要试剂FM4-64 (Molecular Probes，Inc. Eugene，OR)用DMSO溶解，配制成200µM的母液，-20℃避光保存。主要设备摇床激光共聚焦显微镜（ZEISS，META550）JEM-1230电子显微镜（J
缓冲配对离子的定义和功能
中文名称缓冲配对离子英文名称buffer counterion定 义缓冲体系中带相反电荷的离子。如磷酸钠缓冲液中带负电荷的磷酸根与带正电荷的钠离子互为配对离子；离子交换层析流动相(缓冲液)中与固定相(离子交换树脂)本身所带电荷相反的离子等。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级
porcine－brain－tubulin－prep
Although many protocols for tubulin preparation are available, the procedure described below is the simplest and highest yielding preparation I have d
Histochemical－staining－of－sea－urchin－embryos－for－(AP)－enzyme－activity
Histochemical staining of sea urchin embryos for alkaline phosphatase (AP) enzyme activity1. Obtain embryo samples, tube of AP substrate buffer and tu
三氟拉嗪对花粉管顶端胞吞胞吐活性和细胞器状态的影响
实验概要本实验主要应用荧光标记技术、透射电镜技术等手段，分析白杄花粉管中钙-钙调素信号系统受到抑制之后，细胞结构、细胞器分布与状态、胞吞/胞吐以及细胞超微结构等的变化。主要试剂1. FM4-64 (Molecular Probes，Inc. Eugene，OR) 用DMSO溶解，配制成200 µM的
OsAGAP蛋白的Arf－GTPase激活活性测定
实验概要本实验诱导表达了Arf-GST和OsAGAP-GST融合蛋白，纯化后测定了OsAGAP蛋白的Arf GTPase激活活性。主要试剂1. GST融合蛋白纯化试剂盒(Pharmacia公司)2. Enzcheck TM Phosphate检测试剂盒(Molecular ProbesCo.)实验步
DNA－laddering－assay－for－treated－cells
Characteristics of this procedure: I found the procedure described by Gong et al. to be a convenient and successful method to detect DNA ladderin
分子生物学实验常用试剂配置
一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammon
分子生物学实验常用试剂配置
常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺（ammonium ac
分子生物学实验常用试剂配置
一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammo
Radioiodination
Purpose and backgrounds Principle of radioiodination Addition of oxidizing reagents (such as chloramine-T or peroxidase+H202) converts I- to I+ or I3
MitoProbe™－DiIC1(5)－Mitochondrial－Membrane－Potential－Protocol
实验概要Cationic cyanine dyes have been shown to accumulate in cells in response to membrane potentialand membrane potential changes have been studied i
Isotype胞内染色有哪些学问？来看看这篇文章怎么说
对科研党来说，流式细胞术一点都不陌生，它以自己特有的方式从细胞蛋白水平定量检测目标蛋白的表达，并且能get到目标蛋白在各个细胞亚群中的表达，同时在细胞功能上也有很重要的作用，包括细胞凋亡，细胞周期，细胞增殖等等。 流式细胞术以细胞为研究对象，在流式细胞仪的作用下定量检测样品细胞的物理化学特征，
各种常见缓冲液的配制方法(在线计算)
磷酸盐缓冲液，Tris缓冲液和柠檬酸缓冲液等是生物学实验中常用的缓冲液，也是PeproTech重组细胞因子和蛋白溶解所需的常用缓冲液。然而，这些缓冲液的配制比较麻烦，尤其当要获得特定pH值的缓冲液时，调节pH值是费力、费时的事情。对于Tris等缓冲液等，pH计是无法准确测量其pH值的。那么，有没有简
Western－blotting－Protocol(试剂配方和实验操作)
一、 试剂配方：1X TBS: Tris-base 12.11gNacl 8.775g用HCl 调pH7.4，用纯水稀释至1L5X Transfer buffer: Tris-base 15.1gGlycine 72.0gTo 1 L10X碱性磷酸酶缓冲液： 1 mol/L Tris-HCl pH
免疫细胞化学常用试剂介绍
一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽
免疫细胞化学常用试剂介绍
一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽