Hanks液(原液)的配制
Hanks液(原液)原液甲: NaCl 160gKCl 8gMgSO4·7H2O &n......阅读全文
Hanks液(原液)的配制
原液甲: NaCl 160g KCl 8g MgSO4·7H2O 2g MgCl2·6H2O 2g 上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。 CaCl2 2.8g溶于100ml双蒸水 上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4
Hanks液、TBS与PBS
Hanks液的配制方法甲液:Na2HPO4•2H2O 0.06克 KH2PO4 0.06克 MgSO4•7H2O 0.20克葡萄糖 1.00克 NaCl 8.00克三蒸水 750毫升乙液:CaCl2 0.14克三蒸水 100毫升①将乙液徐徐加入甲液中。②将0.35克NaHCO3溶解在37℃ 100毫
Hanks液(原液)的配制
Hanks液(原液)原液甲: NaCl 160gKCl 8gMgSO4·7H2O 2gMgCl2·6H2O 2
PBS缓冲液和Hanks缓冲液的区别
万能缓冲液PBS我实验时经常用到PBS缓冲液,但是很多文献里面也用到了Hanks缓冲液,不知道这两种缓冲液在细胞培养 方面有什么区别吗?也就是说它分别适合于哪些情况?PBS :磷酸缓冲盐溶液——具有pH缓冲作用的等渗盐溶液。PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液,一般选择K2HPO4和KH2PO4配制,因为钠
细胞换液为什么用DHANKS液洗
细胞换液为什么用D-HANKS液洗知不知道细胞很小的,你细胞衰老后会被水解掉留下部分营养物质于细胞外液中供新分化的利用,位置恰不恰当当然恰当,这是基因决定的,再说了细胞可在特定范围内流动,新细胞在此范围里就可以了.。总之,就是基因的作用,让你细胞该在哪就在哪可能有多种原因: 目标蛋白对细胞有毒性,导
无Ca2+、Mg2+Hanks液的配制
无Ca2+、Mg2+Hanks液 NaCl 4.5g KCl 0.2g NaHCO3 0.175g Na2HPO4·12H2O 0.076g KH2PO4 0.03g 葡萄糖 0.5g 0.4%酚红 2.5ml 将上述成分
无Ca2+-、Mg2+Hanks液的配制方法
无Ca2+ 、Mg2+Hanks液 NaCl 4.5g KCl 0.2g NaHCO3
Hanks平衡盐溶液(5×HBSS,含酚红)使用说明
平衡盐溶液(BalancedSaltSolution,BSS)与细胞生长状态下的pH值、渗透压等环境状态一致,具有维持渗透压、控制酸碱平 衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用,可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。主要由无机离子组成,有时含有碳酸氢钠、葡 萄糖
E玫瑰花环形成试验(E-Rosette-Test)
【原理】 正常人外周血中T细胞在体外能直接和绵羊红细胞(SRBC)结合形成玫瑰花样细胞团,这是因为人的T细胞膜具有能和SRBC膜上的糖蛋白相结合的受体,称为E受体。已证实E受体是人T细胞所特有的表面标志,也是T细胞的常用方法之一。 【材料】 肝素抗凝人外周血1ml 淋巴细胞分层液(见附录)2ml 0
关于脂肪干细胞的流式检测介绍
通过酶消化法将细胞收集到离心管中,细胞悬液调整密度为1×105 mL-1,800r/min(120g),离心5 min,弃掉上清,用4℃的冷D-Hanks 冲洗重悬细胞,再次将细胞悬液以800 r/min,离心5 min,之后弃去上清。然后用D-Hanks 将细胞重悬至1 mL,加入抗体5~10
抗体产生细胞的检测—溶血空斑实验
实验材料健康小鼠试剂、试剂盒绵羊红细胞悬液Hanks液凡士林油仪器、耗材注射器平皿漏斗纱布研钵实验步骤1. 免疫动物取25%绵羊红细胞悬液1毫升,无菌操作注入小鼠腹腔中。2. 脾细胞液的制备(1)小鼠免疫4天后,颈椎脱位处死,取脾脏,去除脂肪组织,放平皿内,用冷Hanks液洗1~2次。(2)取出
抗体产生细胞的检测:溶血空斑实验
实验材料 健康小鼠试剂、试剂盒 绵羊红细胞悬液Hanks液凡士林油仪器、耗材 注射器平皿漏斗纱布研钵实验步骤 1. 免疫动物取25%绵羊红细胞悬液1毫升,无菌操作注入小鼠腹腔中。2. 脾细胞液的制备(1)小鼠免疫4天后,颈椎脱位处死,取脾脏,去除脂肪组织,放平皿内,用冷Hanks液洗1~2次。(
怎样配置胰蛋白酶消化液
1.D.Hanks液高压灭菌之后,晾至室温,4℃保存备用。2.称取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中(夏天时研磨器应放在冰浴中),加入少量D-Hanks液研磨1 000次左右,调制成糊状。再放入4℃预冷的适量D-Hanks液中,4℃下磁力搅拌使完全溶解。3.用NaHC03干粉将胰酶溶液的pH值调至8.0左
Hank′s-平衡盐溶液(HBS)和Earle′s平衡盐溶液(EBS)有什么本质...
Hank′s 平衡盐溶液(HBS)和Earle′s平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别?HBS和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagle′s (2.2g/L)中比在Hanks′ (0.35g/L) 中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡,以维持溶液的PH值。Eagle′s液在空气水
抗体产生细胞的检测——溶血空斑实验
实验概要本实验用溶血空斑实验进行了抗体产生细胞的检测。取绵羊细胞免疫的小鼠脾脏,制成脾细胞悬液,与一定量的指示细胞(绵羊细胞)和补体结合,注入自制的小室内,经37℃孵育后,单个散在的抗体形成释放抗体,抗体与周围的绵羊红细胞(抗原)结合,并在补体参与下,使绵羊细胞溶解,结果在抗体形成细胞周围形成肉眼可
抗体产生细胞的检测——溶血空斑实验
实验概要本实验用溶血空斑实验进行了抗体产生细胞的检测。取绵羊细胞免疫的小鼠脾脏,制成脾细胞悬液,与一定量的指示细胞(绵羊细胞)和补体结合,注入自制的小室内,经37℃孵育后,单个散在的抗体形成释放抗体,抗体与周围的绵羊红细胞(抗原)结合,并在补体参与下,使绵羊细胞溶解,结果在抗体形成细胞周围形成肉眼可
大鼠胰岛细胞培养实验
实验方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单细胞。实验材料 一周龄Wistar 大鼠 试剂、试剂盒 D-Hanks’液 胰蛋白酶 Ⅴ型胶原酶 葡萄糖 碘乙酸 仪器、耗材 手术剪 手术钳 眼科剪刀 眼科镊子
Hanks-平衡盐溶液(HBS)要在空气中使用,不需要CO2培养箱...
Hank's 平衡盐溶液(HBS)要在空气中使用,不需要CO2培养箱。原因是什么?Hank's 平衡盐溶液(HBS)和Earle's平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别? HBS和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagles (2.2g/L)中比在Hanks (
支原体的检测实验_荧光染色法
实验方法原理荧光显微镜检查法,荧光染料用 Hoechst 33258,它是一种能与DNA 特异结合的荧光染料。支原体内含有DNA,能着色,是现有检测法中最方便和最有效的一种。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks醋酸甲醇蒸馏水仪器、耗材盖片显微镜实验步骤1. 标本盖片培养细胞汇合前从瓶中取出(如细胞已
组织的分离实验_EDTA-消化分离法
实验方法原理EDTA是一种非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。关于EDTA的作用机制一般认为是:一些组织,尤其是上皮组织,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能维持组织的完整性。EDTA能从这些组织生存环境中吸收这些离子,形成螯合物,能促进细胞相互分离。EDTA 作
红细胞免疫功能的检测方法
实验概要人及多种动物红细胞与白细胞一样,也具有重要的免疫功能。其基础是红细胞表面具有C3b受体(C3bR)。红细胞可通过其表面的C3bR,发挥清除免疫复合物(IC)、促进吞噬、提呈抗原及激活补体等多种作用。因此,建立的检测红细胞免疫功能的各种方法,也多以红细胞表面的C3bR为基础设计的。现已建立的方
红细胞免疫功能的检测方法
实验概要人及多种动物红细胞与白细胞一样,也具有重要的免疫功能。其基础是红细胞表面具有C3b受体(C3bR)。红细胞可通过其表面的C3bR,发挥清除免疫复合物(IC)、促进吞噬、提呈抗原及激活补体等多种作用。因此,建立的检测红细胞免疫功能的各种方法,也多以红细胞表面的C3bR为基础设计的。现已建立的方
神经胶质细胞培养实验_胰蛋白酶消化法
实验材料大鼠试剂、试剂盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤一、原代培养1. 选用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,断头取其大脑皮层组织。 2. 解剖显微镜下,剥离脑膜,切除大脑髓质部分。 3. 将大脑皮质在无Ca2+、Mg2+Hanks液(CM
常规组织培养法
一、初代消化培养法1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3、 处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分
传代培养法/组织块培养法/初代消化培养常规组织培养法
一、初代消化培养法 1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的
正常大兔脑微血管内皮细胞的培养
实验材料:1. 正常兔大脑皮质组织;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. M199培养液(含20%小牛血清、肝素25U/ml、HEPES 10mmol/L、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素);D-Hanks液;
大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞培养实验 实验方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单
大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞可用于:(1)实验室胰岛细胞功能深入研究的实验材料;(2)糖尿病新药的细胞筛选模型。实验方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单细胞。 实验材料一周龄Wistar 大鼠试剂、试剂盒D-Hanks’液
E玫瑰花环形成实验
[ 实验原理 ] 人外周血T淋巴细胞表面具有绵羊红细胞受体,在体外一定条件下将人淋巴细胞与绵羊红细胞两者混合,可以形成以T细胞为中心,周围黏附着多个绵羊红细胞的花环,为E花环试验(erythrocyte rosette test)。应用最广的有总E花环试验(Et,t为total的缩写)和活性
大鼠胰岛细胞培养实验
大鼠胰岛细胞培养实验 实验方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单