脑脊液蛋白质总量测定实验
实验方法原理 饱和硫酸铵可以沉淀球Pr.正常脑脊液中球Pr含量很低.故现阳性结果,若球Pr增多,则Ross-jones试管阳性,除去球Pt后再以乙酸沸法则ALB(白Pr).实验材料 脑脊液试剂、试剂盒 饱和硫酸铵溶液乙酸实验步骤 一、实验试剂:l、饱和硫酸铵溶液,硫酸铵85g加蒸馏水至100ml即得.2、O.8mmol/L乙酸.二、实验操作:l. 于小试管内盛放0.5ml饱和(NH4)2SO4用滴管将0.5ml脑脊液沿管避徐徐加入,3分钟内在两液交界面形成白色混浊环,因为Ross-jones(+)2. 将试管内两种液体振摇混匀,3分钟出现白色混浊或沉淀,为Nonne-Apert试验I相阳性,提示球Pr增高.3. 将上述混合液过滤,加O.8mmol/L乙酸少许使之成为酸性,再加热煮沸,3分钟有白色沉淀出现为Nonne-Apert试管Ⅱ相阳性,提示白Pr增高.注意事项 1. RBC过多时,须离心沉淀,吸取上清液进行试验.2. 试验中......阅读全文
脑脊液检查/酸碱度/蛋白质/化学检查
1.酸碱度正常脑脊液pH为7.13~7.34,比动脉血的pH低。目前认为二氧化碳易通过血脑屏障,使脑脊液PCO2比动脉血高0.5~1.5kpa(4~11mmHg),而HCO-不易通过血脑屏障,脑脊液中浓度一般比动脉血低。脑脊液pH比较恒定,即使全身酸碱失衡时对它的影响也甚小,在中枢神经系统炎症时脑脊
哪些原因可导致脑脊液中蛋白质增高?
哪些原因可导致脑脊液中蛋白质增高?:1.椎管梗阻脊髓压迫症,如脊髓肿瘤、肉芽肿、硬膜外脓肿、粘连性脊髓蛛网膜炎、脊椎结核、椎间盘脱出等,可造成椎管部分或完全梗阻。当椎管完全梗阻时,使脑与医.学全在线脊髓蛛网膜下腔互不相通,血浆由脊髓中的静脉渗出, 脑脊液蛋白增高最显著,有时竟达30.0~50.0g/
读懂脑脊液实验室检查
当中枢神经系统发生感染、外伤或肿瘤时,可引起脑脊液性质、成分和量的改变。脑脊液实验室检查对中枢神经系统疾病的诊断、鉴别诊断、疗效及预后观察都具有十分重要的意义。一、一般性状检查(一)颜色正常脑脊液为无色透明的液体,在病理情况下可呈现出不同的颜色。1.红色见于蛛网膜下腔出血和脑室出血,但需要与穿刺损伤
实验动物实验标本的采集实验——实验动物脑脊液采集
实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤(1) 狗、兔脑脊液的采集:通常采取脊髓穿刺法,穿刺部位在两髂连线中点稍下方第七腰椎间隙。动物麻醉后侧卧位固定,头尾部尽量弯向腰部,去被毛。消毒后一手固定穿刺部位的皮肤,腰穿针垂直刺入,当有落空感及动物的后肢跳动时,针已达椎管内,抽去针芯,即
氨基酸总量(氨态氮)的测定
一、目的与原理: 1、了解掌握单指示剂与双指示剂甲醛滴定法测氨基酸总量的方法与原理: 二、单指示剂甲醛滴定法: (一)原理:氨基酸具有酸、碱两重性质,因为氨基酸含有-COOH基显示酸性,又含有-NH2基显示碱性。由于这二个基的相互作用,使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液
氨基酸总量(氨态氮)的测定
一、目的与原理:1、了解掌握单指示剂与双指示剂甲醛滴定法测氨基酸总量的方法与原理:二、单指示剂甲醛滴定法:(一)原理:氨基酸具有酸、碱两重性质,因为氨基酸含有-COOH基显示酸性,又含有-NH2基显示碱性。由于这二个基的相互作用,使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时,-NH2与甲醛结合,其碱性消
氨基酸总量(氨态氮)的测定
一、目的与原理: 1、了解掌握单指示剂与双指示剂甲醛滴定法测氨基酸总量的方法与原理: 二、单指示剂甲醛滴定法: (一)原理:氨基酸具有酸、碱两重性质,因为氨基酸含有-COOH基显示酸性,又含有-NH2基显示碱性。由于这二个基的相互作用,使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时,-NH2
蛋白质含量测定实验——folin—酚试剂法
蛋白质含量测定实验可以用于:(1)测定蛋白质浓度;(2)检测所提取的蛋白质含量。实验方法原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即f
N-端封闭蛋白质内部序列测定实验
实验方法原理 实验材料 蛋白质样品(约 200 mol)试剂、试剂盒 1%乙酸溶液(含丽春红 S 染料)1% 乙酸0.2 mol/L NaOH0.1 mol/L 乙酸溶液(含PVP-40) 消化缓冲液 1 mg/ml 胰蛋白酶层析溶液 A 层析溶液 B仪器、耗材 0.22 μm 硝酸纤维素膜酸洗过的
N-端封闭蛋白质内部序列测定实验
实验材料蛋白质样品(约 200 mol) 试剂、试剂盒1%乙酸溶液(含丽春红 S 染料)1% 乙酸0.2 mol/L NaOH0.1 mol/L 乙酸溶液(含PVP-40)消化缓冲液1 mg/ml 胰蛋白酶层析溶液 A层析溶液 B仪器、耗材0.22 μm 硝酸纤维素膜酸洗过的玻璃/Petri 培养皿
用-Bradford方法测定蛋白质含量实验
实验方法原理 溶解蛋白质,与染料混匀,l0min 后阅读 O.D.。 实验步骤 材料 十二烷基硫酸钠(SLS,SDS),水溶 3.5 mmol/L
用-Bradford方法测定蛋白质含量实验
实验方法原理 溶解蛋白质,与染料混匀,l0min 后阅读 O.D.。实验步骤 材料十二烷基硫酸钠(SLS,SDS),水溶 3.5 mmol/L 或 0.3mol/L NaOH。考马斯亮蓝 G-250, 0.12 mmol/L(0.01%),溶于 4.7 % 乙醇和 85 % (W/V ) 磷
蛋白质含量的测定实验——OLIN酚法
实验方法原理FOLIN 酚法所用的试剂有两部分组成。试剂甲可与蛋白质中的肽键起显色反应, 试剂乙在碱性条件下极不稳定, 易被酚类化合物还原成蓝色(蛋白质中的酚基将磷钼酸-磷钨酸还原成蓝色复合物)。在一定条件下, 蓝色强度与蛋白质的量成正比, 范围约在25~250 μg/ ml 蛋白质浓度。实验材料蛋
蛋白质浓度测定(双缩脲法)实验
实验原理测定蛋白质的定量方法有很多,目前常用的有凯氏定氮法;比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法;紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法:在碱性溶液中,双缩脲(H2N—CO—NH—CO—NH2)与二价铜离子作用形成紫红色的络合物,这一反应称双缩脲反应。凡分子中含二个或二个以上
N-端封闭蛋白质内部序列测定实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 蛋白质样品(约 200 mol)
用-Bradford方法测定蛋白质含量实验
实验方法原理溶解蛋白质,与染料混匀,l0min 后阅读 O.D.。实验步骤材料十二烷基硫酸钠(SLS,SDS),水溶 3.5 mmol/L 或 0.3mol/L NaOH。考马斯亮蓝 G-250, 0.12 mmol/L(0.01%),溶于 4.7 % 乙醇和 85 % (W/V ) 磷酸:将 10
脑脊液环磷酸腺苷的测定原理
cAMP是一种小分子半抗原,其特异性抗体是以人工合成的2'-O-ScAMP-BSA结合物免疫动物所获得。抗体对2'-O-位有取代基的cAMP的亲和力较无取代基的cAMP约大100倍。为提高测定方法的灵敏度,测定时应将[3H]标记cAMP,样品和标准同时进行琥珀酰化反应,然后和抗体反应。从标准曲线
脑脊液的免疫球蛋白测定
1、IgG增高:常见于神经梅毒、化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、小舞蹈病、神经系统肿瘤。 2、IgA增高:常见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤等。 3、IgM增高:常见于化脓性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤、多发性硬化症等。 4、IgE增高:常见于脑寄生虫病等。
血清、脑脊液葡萄糖的测定
干扰因素 严重脂血、严重溶血、高胆红素、高尿酸、抗坏血酸,肌酐、EDTA可能干扰测定。 质量控制 每批测定都使用贝克曼公司(与相应仪器配套的质控品)质控品做质量控制,且每天做二个水平的质控。 分析范围: 当样本∶试剂为1∶30时,血清、脑脊液:0.3-38.8mmol/L,超出此范围应
脑脊液糖测定的注意事项
1.检查前:受检查者应停止服用一切药物,并保持合理的饮食和作息。 2.脑脊液收集好后,必须立即送检。如果放置过久,脑脊液中葡萄糖会分解,从而影响检查结果。
脑脊液糖测定的临床意义
当发生某些疾病波及到神经系统时,脑脊液中葡萄糖含量将发生相应变化。 1.增高:饱餐或注射葡萄糖后、脑出血、脑外伤影响到脑干、糖尿病、脑肿瘤、脑水肿等。 2.降低:化脓性、结核性、霉菌性、隐球菌性脑膜炎,脑部恶性肿瘤、神经梅毒、低血糖等。病毒性脑膜炎时含量正常,此点可与细菌性脑膜炎鉴别。
脑脊液显微镜检查实验
实验步骤 一、细胞总数:1、直接计数法 csf标本观察,清亮或仅微混,可用此法用滴管吸取已摇匀 csf标本少许直接充入计数板计数室内,静置2-3分钟低倍镜下计数两个计数池四角和中央共10大格内细胞数,即1微升csf的细胞总数.2、稀释计数法 如标本中cell过多,可用生理盐水和RBC稀释液稀释按上
脑脊液显微镜检查实验
实验步骤一、细胞总数1、直接计数法 csf标本观察,清亮或仅微混,可用此法用滴管吸取已摇匀csf标本少许直接充入计数板计数室内,静置2-3分钟低倍镜下计数两个计数池四角和中央共10大格内细胞数,即1微升csf的细胞总数。2、稀释计数法 如标本中cell过多,可用生理盐水和RBC稀释液稀释按上法计数,
脑脊液的实验室检查项目
1.脑脊液检查站 对有颅内高压的病人作此检查应予慎,以防脑疝形成。脑脊液增高,细胞数正常而蛋白含量增高(超过0.45g/l)则较符合脑室内或脑表面肿瘤及神经鞘瘤。脑脊液作离心沉淀细胞检查有助于发现肿瘤脱落细胞。髓母细胞瘤、室管膜瘤、脉络丛乳头状瘤及脑膜转移瘤等病例中,可得到阳性结果。脑脊液糖
涂料中重金属总量的测定方法研究
涂料作为一种装饰及功能性材料,已广泛应用于现代工业和生活中。随着人们生活水平的提高及安全健康意识的增强,人们对装饰材料中的各种涂料的质量要求越来越高,尤其对其中所含的各种有害重金属元素,更加关注。有害重金属元素的检测一直是涂料中必不可少的环节,但一般仅限于可溶性重金属元素的测定,包括欧共体标准化委员
植物组织中游离氨基酸总量的测定
测定植物体内游离氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。【原理】游离氨基酸的氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,其颜色的深浅与游离氨基酸的含量成正比。【仪器设备】分光光度计;电子天平;容量瓶25ml或50ml 3个;漏斗
固体总量测定法有哪几种?
本法系在一定温度下,使供试品的液体成分蒸发,用剩余的固体成分计算供试品的固体总量。 测定法 第一法 105℃干烤法 精密量取一定体积供试品于干燥至恒重的适宜玻璃称量瓶中,置干烤箱中于105℃烘至恒重。 第二法 50℃干烤法 精密量取一定体积供试品于干燥至恒重的适宜玻璃称量瓶中,置干烤箱中于
斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验
实验材料待测蛋白质样品试剂、试剂盒10%三氯醋酸(TCA)考马斯亮蓝凝胶染色液考马斯亮蓝凝胶脱色液仪器、耗材Whatman 3 MM 滤纸实验步骤1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格;2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品;3. 将滤纸凉干,大约需要 15 mi
蛋白质磷酸化的测定实验—代谢标记
实验材料细胞仪器、耗材培养瓶实验步骤1. 用 60 mm 或 100 mm 培养瓶,在完全培养基中培养细胞至所希望的密度。2. 用预热的低磷酸培养基(无放射性磷酸盐)冲洗两次,然后加入含 0.5~1 mCi32P/ml 的低磷酸培养基(50~100 μmol/L 无机磷酸)。3. 培养结束后,回收
280-纳米光吸收法测定蛋白质浓度实验
280纳米(A280)光吸收法 实验方法原理 由于蛋白质分子中常酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等苯环结构,在紫外 280 nm 波长处有最大吸收峰,其吸收值与蛋白质