琼脂糖凝胶栓中DNA的限制性内切核酸酶消化
实验方法原理 从哺乳动物细胞、酵母或细菌分离的染色体 DNA 在琼脂糖栓中可用所需的内切酶消化。低熔点琼脂糖栓的孔足以使内切酶进入，与作为底物的基因组 DNA 相作用。消化后，经 PFGE 分离，然后回收或做 Southern 印迹分析。实验材料 限制酶基因组 DNA试剂、试剂盒 限制酶缓冲液TE仪器、耗材 脉冲场电泳用的凝胶水浴实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液1X 限制酶缓冲液TE ( pH 7.6)2. 酶和缓冲液限制酶3. 凝胶脉冲场电泳用的凝胶4. 核酸和寡核苷酸包埋在低熔点琼脂糖栓中的基因组 DNA5. 专用设备设定在酶切最佳温度的水浴二、方法1. 如果凝胶栓未在 TE 中存放（如通过邮寄收到的凝胶栓或一直存放在 0.5 mol/L EDTA 中的），则在 50 倍体积 TE ( pH 7.6) 室温温育 30 min。转移凝胶栓至新的 50 倍体积 TE ( pH 7.6) 室温温育第二个 30 min。......阅读全文
琼脂糖凝胶栓中DNA的限制性内切核酸酶消化
实验方法原理 从哺乳动物细胞、酵母或细菌分离的染色体 DNA 在琼脂糖栓中可用所需的内切酶消化。低熔点琼脂糖栓的孔足以使内切酶进入，与作为底物的基因组 DNA 相作用。消化后，经 PFGE 分离，然后回收或做 Southern 印迹分析。实验材料 限制酶基因组 DNA试剂、试剂盒 限制酶缓冲液TE仪
琼脂糖凝胶栓中DNA的限制性内切核酸酶消化
实验方法原理 从哺乳动物细胞、酵母或细菌分离的染色体 DNA 在琼脂糖栓中可用所需的内切酶消化。低熔点琼脂糖栓的孔足以使内切酶进入，与作为底物的基因组 DNA 相作用。消化后，经 PFGE 分离，然后回收或做 Southern 印迹分析。
琼脂糖凝胶栓中DNA的限制性内切核酸酶消化
一、材料1. 缓冲液和溶液1X 限制酶缓冲液TE ( pH 7.6)2. 酶和缓冲液限制酶3. 凝胶脉冲场电泳用的凝胶4. 核酸和寡核苷酸包埋在低熔点琼脂糖栓中的基因组 DNA5. 专用设备设定在酶切最佳温度的水浴二、方法1. 如果凝胶栓未在 TE 中存放（如通过邮寄收到的凝胶栓或一直存放在 0.5
琼脂糖凝胶栓中DNA的限制性内切核酸酶消化
从哺乳动物细胞、酵母或细菌分离的染色体 DNA 在琼脂糖栓中可用所需的内切酶消化。低熔点琼脂糖栓的孔足以使内切酶进入，与作为底物的基因组 DNA 相作用。消化后，经 PFGE 分离，然后回收或做 Southern 印迹分析。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理从哺乳动物细胞、
低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（用琼脂糖酶消化）
实验方法原理 可用琼脂糖酶消化的方法从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA ( Bumeister and lehrach 1989)。在这种方法中，琼脂糖酶使琼脂糖多聚体水解为双糖。这样获得的 DNA 再经酚抽提、乙醇沉淀进行纯化。由于该
低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（用琼脂糖酶消化）
实验方法原理 可用琼脂糖酶消化的方法从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA ( Bumeister and lehrach 1989)。在这种方法中，琼脂糖酶使琼脂糖多聚体水解为双糖。这样获得的 DNA 再经酚抽提、乙醇沉淀进行纯化。由于该法较为温和，因此特别适用从脉冲场琼脂糖凝胶中 回收高分子质
低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（用琼脂糖酶消化）
可用琼脂糖酶消化的方法从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA ( Bumeister and lehrach 1989)。在这种方法中，琼脂糖酶使琼脂糖多聚体水解为双糖。这样获得的 DNA 再经酚抽提、乙醇沉淀进行纯化。由于该法较为温和，因此特别适用从脉冲场琼脂糖凝胶中 回收高分子质量的 DNA，从恒强电
琼脂糖凝胶中DNA的检测
实验方法原理 琼脂糖凝胶中的核酸通过染色，可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法：溴化乙锭（ethidium bromide, EB ) 染色法和 SYBR Gold 染色法。试剂、试剂盒 溴化乙锭SYBR Gold实验步骤 1. 凝胶溴化乙锭染色法观察琼脂糖
琼脂糖凝胶中DNA的检测
琼脂糖凝胶中的核酸通过染色，可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法：溴化乙锭（ethidium bromide, EB ) 染色法和 SYBR Gold 染色法。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理琼脂糖凝胶中的核酸通过染色，可以在波长
琼脂糖凝胶中DNA的检测
实验方法原理 琼脂糖凝胶中的核酸通过染色，可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法：溴化乙锭（ethidium bromide, EB ) 染色法和 SYBR Gold 染色法。
关于琼脂糖凝胶块中DNA的限制性内切酶消化的简介
1．应使用消毒溶液及戴无菌手套以免DNA降解。 2．在Falcon试管中用1×TE溶液漂洗凝胶块20min 3次，以去除EDTA。 3．混合：酶反应缓冲液（高、中或低盐缓冲液），100mmol/L亚精胺（只用于高盐缓冲液状态），10～20单位的内切酶。20单位的内切酶就足以过夜完全消化10μ
从琼脂糖凝胶(Agaros－gel)中回收DNA片段
实验概要学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后，按分子量大小被分开，排列在琼脂糖凝胶中，可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来，加热或用特殊的试剂熔解凝胶，使DNA溶回到溶液中，再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。主要试剂1. 电
从琼脂糖凝胶（Agaros－gel）中回收DNA片段
实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后，按分子量大小被分开，排列在琼脂糖凝胶中，可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来，加热或用特殊的试剂熔解凝胶，使DNA溶回到溶液中，再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。实验试剂1. 电泳缓冲液2. 荧光染料3. 电泳级琼脂糖粉4. 10
从琼脂糖凝胶(Agaros－gel)中回收DNA片段
目的学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。2．原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后，按分子量大小被分开，排列在琼脂糖凝胶中，可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来，加热或用特殊的试剂熔解凝胶，使DNA溶回到溶液中，再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。3．器材旋涡混合器，
如何配DNA琼脂糖凝胶
琼脂糖凝胶的配制是分子实验室比较基本的操作，因此正确地操作对整个实验来讲很有必要，大体流程如下：称量、熔胶、倒胶、拔梳。1.称量 我们通常所说的0.8%、1%的胶都是指的质量体积分数，即所称取的琼脂糖粉的质量（g）比所加的TBE缓冲液的体积（mL）即胶的浓度。缓冲液的体积根据胶板的大小而定。如小胶板
DNA的琼脂糖凝胶电泳
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点，已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的：掌握琼脂糖凝胶电泳的原理，学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料：质粒DNA、BAC、植物总DN
DNA的琼脂糖凝胶电泳
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点，已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的：掌握琼脂糖凝胶电泳的原理，学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料：质粒DNA、BAC、植物总DN
通过PCR扩增在扩增DNA产物末端引入限制性核酸内切酶酶...
通过PCR扩增在扩增DNA产物末端引入限制性核酸内切酶酶切位点实验方法原理 实验材料 噬菌体 T4 DNA 连接酶限制性内切核酸酶靶 DNA试剂、试剂盒 氯仿EDTA乙醇酚氯仿乙酸钠TE仪器、耗材 琼脂糖凝胶水浴箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液与溶液氯仿EDTA ( 0.5 mol/L, pH 8.
PCR扩增在扩增DNA产物末端引入限制性核酸内切酶酶切位点
实验方法原理 实验材料 噬菌体 T4 DNA 连接酶 限制性内切核酸酶 靶 DNA
PCR扩增在扩增DNA产物末端引入限制性核酸内切酶酶切位点
实验方法原理实验材料噬菌体 T4 DNA 连接酶限制性内切核酸酶靶 DNA试剂、试剂盒氯仿EDTA乙醇酚氯仿乙酸钠TE仪器、耗材琼脂糖凝胶水浴箱实验步骤一、材料1. 缓冲液与溶液氯仿EDTA ( 0.5 mol/L, pH 8.0)乙醇酚：氯仿（1:1，V/V)乙酸钠（3 mol/L, pH 5.2
从琼脂糖凝胶(Agaros－gel)中回收DNA片段实验
实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后，按分子量大小被分开，排列在琼脂糖凝胶中，可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来，加热或用特殊的试剂熔解凝胶，使DNA溶回到溶液中，再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。实验试剂1. 电泳缓冲液2. 荧光染料3. 电泳级琼脂糖粉4. 10
DNA的酶切消化与凝胶回收
[实验原理]限制性内切酶是分子操作中重要的工具酶，是一类能够识别双链DNA分子某种特定的核苷酸序列并切割双链DNA分子的核酸内切酶。可分为3类，Ⅰ和Ⅲ类限制酶兼有甲基化等修饰作用及以来ATP的限制性切割活性，前者结合于识别位点随即切割DNA，后者则在识别位点切割。Ⅱ类限制酶是由两种酶分子组成的复合体
如何通过琼脂糖凝胶检测DNA
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就
琼脂糖凝胶电泳检测DNA
目的：学习水平式琼脂糖凝胶电泳，检测质粒DNA的构型、分子量的大小。原理： 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物，可作为电泳支持物，适用于分离大小范围在0.2～50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离，与标准DNA片段进行对照，就可获知该样品分子量大小。
琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA
【实验目的】 通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA的原理与方法。 【实验原理】 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种杂聚多糖，是由D型和L型半乳糖以α-1，3和β-1，4糖苷键相连形成的线状高聚物（如下图所示）。琼脂糖遇冷水膨胀，溶于热水成溶胶，冷却后成为孔径范围从50nm到大于200nm的凝胶。琼脂糖凝
DNA琼脂糖凝胶电泳原理
琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA的方法，这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物，利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即分子本身的大小和构型
DNA琼脂糖凝胶电泳原理
琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA的方法，这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物，利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即分子本身的大小和构型
DNA琼脂糖凝胶电泳原理
琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA的方法，这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物，利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即分子本身的大小和构型
DNA琼脂糖凝胶电泳原理
琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA的方法，这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物，利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电，在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下，DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应，即分子本身的大小和构型
如何通过琼脂糖凝胶检测DNA
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就