从琼脂糖凝胶(Agarosgel)中回收DNA片段

实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。实验试剂1. 电泳缓冲液2. 荧光染料3. 电泳级琼脂糖粉4. 10′加样缓冲液5. DNA分子量标准(DL2000)6. DNA凝胶回收试剂盒实验设备1. 旋涡混合器2. 微量移液取样器3. 移液器吸头4. 1.5ml 微量离心管5. 双面微量离心管架6. 台式离心机7. 琼脂糖凝胶电泳系统8. 微波炉9. 恒温水浴实验步骤1. 配制TAE电泳缓冲液(10′储存液),10′加样缓冲液,1.5ml离心管装入铝制饭盒(灭菌)、移液器吸头装入相应的吸头盒(灭菌)。2. 操作步骤1) 用1′TAE配制1%琼脂糖凝胶。DNA用合适的酶切。2) 在胶上选定两个加样孔,分别加入少量(10μl)和大量(50μl )......阅读全文

从琼脂糖凝胶(Agaros-gel)中回收DNA片段

实验概要学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。主要试剂1. 电

从琼脂糖凝胶(Agaros-gel)中回收DNA片段

实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。实验试剂1. 电泳缓冲液2. 荧光染料3. 电泳级琼脂糖粉4. 10

从琼脂糖凝胶(Agaros-gel)中回收DNA片段

目的学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。2.原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。3.器材旋涡混合器,

从琼脂糖凝胶(Agaros-gel)中回收DNA片段实验

实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后,按分子量大小被分开,排列在琼脂糖凝胶中,可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来,加热或用特殊的试剂熔解凝胶,使DNA溶回到溶液中,再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。实验试剂1. 电泳缓冲液2. 荧光染料3. 电泳级琼脂糖粉4. 10

DNA片段的琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)

【原 理】琼脂糖凝胶电泳是重组DNA研究中常用的技术,可用于分离,鉴定和纯化DNA片段。不同大小、不同形状和不同构象的DNA分子在相同的电泳条件下(如凝胶浓度、电流、电压、缓冲液等),有不同的迁移率,所以可通过电泳使其分离。凝胶中的DNA可与荧光染料溴化乙锭(EB)结合,在紫外灯下可看到荧光条带,籍

从琼脂糖凝胶中纯化-PCR-片段实验

试剂、试剂盒 乙醇溴化乙锭电泳缓冲液PCR 片段琼脂糖凝胶细胞和组织仪器、耗材 微量离心管解剖刀紫外灯真空装置实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂(1)乙酵(95%)(2)嵌入染料,如溴化乙锭(3)TAE 电泳缓冲液         40 mmol/L 三羟甲基氨基甲烷-醋酸盐,pH8.2 

从琼脂糖凝胶中纯化-PCR-片段实验

            试剂、试剂盒 乙醇 溴化乙锭 电泳缓冲液 PCR 片段 琼脂糖凝胶 细胞和组织

从琼脂糖凝胶中纯化-PCR-片段实验

Wizard SV 胶和 PCR 纯化系统是利用硅基法从琼脂糖凝胶中或从 PCR 扩增反应混合物中直接纯化 PCR 片段的方法。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇溴化乙锭电泳缓冲液PCR 片段琼脂糖凝胶细胞和组织仪器、耗材微量离心管解剖刀紫外灯真空装置实验

脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收

            实验方法原理 低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中,然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵(Schedl et al. 1993) 或转染鼠

脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收

实验方法原理 低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中,然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵(Schedl et al. 1993) 或转染鼠胚胎干细胞(Choi et al. 1993) 时是非

脉冲场凝胶中浓缩DNA片段的回收

低熔点琼脂糖切片中的 DNA 首先通过电泳浓缩进入高百分比琼脂糖凝胶中,然后用琼脂糖酶处理而分离。最终 DNA 制备通过微透析纯化。这种方法在把分离的 DNA 注入小鼠受精卵(Schedl et al. 1993) 或转染鼠胚胎干细胞(Choi et al. 1993) 时是非常有效的。本实验来源「

脉冲场凝胶中DNA片段的直接回收

实验方法原理 低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切产生高分辨率酶切图谱或产生用于插入噬菌体或质粒载体的片段。实验材料 DNA 大小标准基因组 DNA试剂、试剂盒 溴化乙锭酚:氯仿仪器、耗材 水浴实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液溴化

脉冲场凝胶中DNA片段的直接回收

            实验方法原理 低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切产生高分辨率酶切图谱或产生用于插入噬菌体或质粒载体的片段。 实验材料

脉冲场凝胶中DNA片段的直接回收

低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 DNA 可以用限制酶酶切产生高分辨率酶切图谱或产生用于插入噬菌体或质粒载体的片段。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理低熔点琼脂糖制备规模的 PFGE 经常被用于 DNA 片段的分离。不同大小的 D

从聚丙烯酰胺凝胶中回收-RNA-片段

            试剂、试剂盒 溴化乙锭  洗脱缓冲液  储存液 8mol LLiCl 溶液   异丙醇   70% 乙醇   1XT

从聚丙烯酰胺凝胶中回收-RNA-片段

试剂、试剂盒 溴化乙锭 洗脱缓冲液 储存液 8mol LLiCl 溶液 异丙醇 70% 乙醇 1XTBE 缓冲液仪器、耗材 聚丙烯酰胺凝胶电泳槽 金属小铲 Whatman3 MM 滤纸 玻璃棒 表面皿 保鲜膜 透射紫外灯 刀片 Texta 笔 射线胶片实验步骤 一材料与设备1) 溴化乙锭:10 mg

低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收(用琼脂糖酶消化)

            实验方法原理 可用琼脂糖酶消化的方法从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA ( Bumeister and lehrach 1989)。在这种方法中,琼脂糖酶使琼脂糖多聚体水解为双糖。这样获得的 DNA 再经酚抽提、乙醇沉淀进行纯化。由于该

低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收(用琼脂糖酶消化)

实验方法原理 可用琼脂糖酶消化的方法从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA ( Bumeister and lehrach 1989)。在这种方法中,琼脂糖酶使琼脂糖多聚体水解为双糖。这样获得的 DNA 再经酚抽提、乙醇沉淀进行纯化。由于该法较为温和,因此特别适用从脉冲场琼脂糖凝胶中 回收高分子质

低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收(用琼脂糖酶消化)

可用琼脂糖酶消化的方法从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA ( Bumeister and lehrach 1989)。在这种方法中,琼脂糖酶使琼脂糖多聚体水解为双糖。这样获得的 DNA 再经酚抽提、乙醇沉淀进行纯化。由于该法较为温和,因此特别适用从脉冲场琼脂糖凝胶中 回收高分子质量的 DNA,从恒强电

2.9-从聚丙烯酰胺凝胶中回收-RNA-片段

从聚内烯酰胺凝胶中回收 RNA 片段最好的方法是粉碎浸泡法。此法能从变性胶屮很好的回收高纯度的单链 RNA。但是此法不适用于长转录产物,因为它既费时间效率又低,例如: 超过 3kb 的 RNA 的回收效率不到30%。但是对于回收小片段 RNA 此方法是十分有效的。试剂、试剂盒溴化乙锭洗脱缓冲液储存液

DNA琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)分析

一、原理琼脂糖凝胶具有分子筛效应。在中性ppH值的电泳缓冲液体系中,DNA分子由于带负电荷,所以在电场作用下由负极向正极泳动。由于DNA分子的大小和构型不同,在相同的时间内迁移至不同的位置。凝胶经溴化乙锭染色后,紫外检测仪下观察,即可看见DNA片段按大小不同呈条带分布。由于在一定条件下,DNA的迁移

琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)检测DNA

原理: 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物,可作为电泳支持物,适用于分离大小范围在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离,与标准DNA片段进行对照,就可获知该样品分子量大小。在质粒抽提过程中,由于各种因素的影响,使质粒DNA呈现超螺旋的共

DNA酶解及DNA片段琼脂糖凝胶电泳

【目的要求】1.掌握限制性核酸内切酶概念、特点及作用原理,DNA酶解技术的应用2.掌握琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段原理及其操作3.熟悉电泳基本原理及其影响因素【教学内容】1.限制性核酸内切酶概念、特点及作用原理,DNA酶解技术的应用2.DNA片段琼脂糖凝胶电泳3.电泳概念、分类、应用、基本原理及其影

质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)

带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多,应用非常广泛,它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点,已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的:掌握琼脂糖凝胶电泳的原理,学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料:质粒DNA、BAC、植物总DN

DNA片段回收与纯化

    质粒、噬菌体等经酶切,电泳;PCR产物经电泳后,常常需要对一些DNA电泳片段进行回收和纯化,用于亚克隆、探针标记等。DNA回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法等,也有现成的试剂盒供应。一、冻融法1.  紫外灯下仔细切下含待回收DNA的胶条,将切下的胶条(小于0.6g)捣碎,置于

DNA片段的回收实验

树脂回收法 微量柱法 液氮冻融法 常规方法             实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法

DNA片段的回收实验

实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离出来,成为高度无盐的、不含其他大分子成分的纯化片断。在较宽的分子量范围内有较高的回收

琼脂糖凝胶DNA纯化回收试剂盒Promega

Promega Wizard  SV Gel and PCR Clean-up System 品牌:Promega回收范围:100bp-10kb价格:(50次包装的试剂盒报价为562元,11元/次)Promega的产品在进口品牌中一向以价格可亲而著称。这个胶回收试剂盒也不例外。并且这个试剂盒的性能参

DNA片段的琼脂糖凝胶电泳结果怎么分析

看来这时指核小体被酶切后的电泳图咯,效果有点差哦!1、4是Marker,2 是染色质,3是小球菌核酶(micro coccal nuclease)处理的染色质。现象描述:在约200-1000bp有明显的梯度带(每带隔约200bp),这时因为用一种能使DNA降解的小球菌核酶(micro coccal

低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收(有机溶剂抽提)

实验方法原理 羟乙基修饰的琼脂糖可降低链间的氢键数目,并可在比标准琼脂糖更低的温度下熔化和凝固。多糖链上这种替换发生的程度决定了琼脂糖熔化与凝结的确切温度。这 一特性构成了从凝胶中回收及操作 DNA 的基础(Wielander 1979; Parker and Seed, 1980)。实验材料