用蛋白酶K和SDS从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA实验
实验方法原理 通过一种有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及随后的酚：氯仿抽提，就能从大规模制备的 λ 噬菌体中很好地分离到 DNA。该方法也适用于小量（50~100 ml ) 制备物。实验材料 蛋白酶 K限制性内切核酸酶λ 噬菌体颗粒试剂、试剂盒 氯仿透析缓冲液EDTA乙醇酚酚：氯仿SDS乙酸钠TE仪器、耗材 琼脂糖凝胶Sorvall SS-34 转子或相当型号硼硅酸盐巴斯德吸管水浴实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液(1) 氯仿(2) 透析缓冲液10 mmol/L NaCl50 mmol/L Tris-Cl（pH 8.0)10 mmol/L MgCl2需要两份透析缓冲液，每份为噬菌体溶液体积的 1000 倍，室温保存。(3) EDTA ( 0.5 mol/L，pH 8.0)(4) 乙醇(5) 酚(6) 酚：氯仿（1:1，V/V）(7) SDS (10%，m/V)(8) 乙酸钠（3 mol/L，pH 7.0)(9) TE......阅读全文
动物细胞基因组DNA提取实验
实验原理真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内，制备DNA将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，同时保持DNA分子的完整。提取DNA的过程是指将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基硫酸钠）和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质，再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从
高质量－DNA－的纯化实验
实验材料 乳腺瘤组织试剂、试剂盒 EDTA异丙醇裂解缓冲液细胞核裂解缓冲液Triton 裂解缓冲液仪器、耗材 水浴锅破璃棒实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂EDTA，100 mmol/L异丙醇裂解缓冲液10 mmol/LTris-HCl1mmol/LEDTA150 mmol/LNaCl0.5
高质量－DNA－的纯化实验
实验材料 乳腺瘤组织 试剂、试剂盒 EDTA 异丙醇裂解缓冲液 细胞核裂解缓冲液
重组M13噬菌体克隆分析
在本方案中，当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时，用重组 M13 噬菌体克隆感染细菌后释放至周围培养基中的单链 DNA 进行凝胶电泳分析即可鉴定。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理在本方案中，当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时，用重组 M13 噬菌
科学家从古代“口香糖”中成功提取DNA
该技术有望成为考古学研究的重要补充 几十年来，Steven LeBlanc——考古学家、美国马萨诸塞州剑桥市哈佛大学皮博迪博物馆的标本主管——做梦都想找到古代人类的脱氧核糖核酸（DNA），然而存放在博物馆的史前古器物却不可能给他带来任何好运气。直到有一天，LeBlanc想出了一个主意。他将目光投向
λ噬菌体DNA的制备
实验概要本实验介绍了λ噬菌体DNA的制备、操作步骤和注意事项。实验原理λ噬菌体是最早使用的克隆载体，λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子，它在宿主细胞有两种生活途径：其一是裂解生长，环状DNA 分子在细胞内多次复制，合成大量噬菌体基因产物，装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌再进行下一次
DNA－酶－I－超敏感位点作图
DNA 酶 I 超敏感位点作图法经常用于定位真核基因的调控区。由于还未被理解的原因，基因带有对 DNA 酶 I 切割敏感的分开的序列，而且这些所谓超敏感位点图谱是随基因的激活状态而变化的（Weintrauband Gmudine1976)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J.
高质量－DNA－的纯化实验
应用经过修改的 Miller 等（1988) 的盐沉淀方法纯化 DNA，不使用酚和氯仿，比较温和，有效防止了长的染色体 DNA 的断裂。在第 9 章中讲述了另一种 DNA 纯化的方法。这种方法可以沉淀细胞核，已被成功地用于对血液样品、培养的细胞和乳腺瘤组织DNA 的纯化。本实验来源于 PCR 实验指
蛋白酶k概念和作用
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化
土壤微生物总DNA的提取方法比较
实验概要通过对比不同DNA提取及纯化方法，选择和优化适合于土壤样品不同分子量DNA提取及纯化的技术路线。实验原理土壤是微生物最大的栖息地，20世纪80年代，微生物学家采用免培养(culture-in-dependent)方法，即直接从土壤中提取微生物总DNA的技术，使得在基因水平研究这些未培养微生物
重组M13噬菌体克隆分析
实验方法原理 在本方案中，当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时，用重组 M13 噬菌体克隆感染细菌后释放至周围培养基中的单链 DNA 进行凝胶电泳分析即可鉴定。实验材料 重组 M13 噬菌体单链 DNAM13 噬菌体重组噬菌斑M13 噬菌体非重组载体噬菌斑大肠杆菌 F' 菌株试剂
石蜡包埋组织DNA提取方法
近10年来，现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域，为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为，人类基因组并非人们想像的那样稳定，诸如基因重排、扩增、缺失，突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生，这些改变对于基因表过和调控，以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义
动物、植物、微生物中提取高质量的基因组DNA（二）
5. 仔细移取上清液至另一50ml离心管,加入1倍体积异丙醇,混匀,室温下放置片刻即出现絮状DNA沉淀。 6. 在1.5ml eppendorf中加入1ml TE。用钩状玻璃棒捞出DNA絮团,在干净吸水纸上吸干,转入含TE的离心管中,DNA很快溶解于TE。 7. 如DNA不形成絮状沉淀,则可用500
质粒DNA的大量提取和纯化实验
碱法 实验材料 细菌 试剂、试剂盒 ST
质粒DNA的大量提取和纯化实验
实验材料 细菌试剂、试剂盒 STE酚 氯仿NaClPEG乙醇仪器、耗材 离心管离心机抽干机实验步骤 1、取培养至对数生长后期的含pBS质粒的细菌培养液250 ml，4 ℃下5000 g离心15分钟,弃上清,将离心管倒置使上清液全部流尽。2、将细菌沉淀重新悬浮于50 ml用冰预冷的STE中（此步可省略
小鼠肝基因组DNA制备
原理DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中，制备 DNA 的原则是既要将 DNA 与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及链霉蛋白酶 E 的应用使这两个原则得到了保证。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。
小鼠肝基因组DNA制备
原理DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中，制备 DNA 的原则是既要将 DNA 与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及链霉蛋白酶 E 的应用使这两个原则得到了保证。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。
细菌基因组DNA提取试剂使用说明（一）
细菌基因组DNA提取试剂使用说明书◆ 产品说明基于硅胶柱纯化方式。试剂中的溶菌酶消化去除细菌的细胞壁，革兰氏阳性细菌还可加入玻璃珠涡旋破壁，在裂解液和蛋白酶作用下裂解消化，DNA释放到裂解液中。加入乙醇后，转移至吸附柱中过滤，DNA被吸附至吸附柱的膜上，而蛋白质则被去除。吸附柱经Buffer G
知识分享：动物细胞基因组DNA提取
实验原理 真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内，制备DNA将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，同时保持DNA分子的完整。提取DNA的过程是指将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基硫酸钠）和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质，再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉
质粒DNA提取实验
实验方法原理 碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性，再将pH值调至中性使其复性，复性的为质粒DNA，而染色体DNA不会复性，缠结成网状物质，通过离心除去。
DNA的提取实验
实验方法原理 酚为有效的蛋白质变性剂，并且饱和的酚与水相有效的分开．因此，在含核酸的样品加入酚，可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层，位于水相与有机相的界画，从而达到纯化核酸的目的．但酚不能完全抑制RNA酶的活性，而且酚层中含有10－15%的水,从而溶解一部分poly－（A）RNA。将酚与氯仿联合使用
植物DNA提取实验
实验方法原理 真核细胞基因组在提取过程中一般有以下几步，首先是机械法破细胞抽提；然后去除蛋白质，糖类等细胞内杂质污染；最后纯化出DNA。实验材料 幼嫩的植物材料试剂、试剂盒 液氮CTAB抽提缓冲液NaACTris-HCl EDTA氯仿异戊醇TE buffer仪器、耗材 瓷研钵离心管离心机实验步骤 一
dna提取实验步骤
利用核酸溶解于水的性质，将组织细胞破碎后，用低盐溶液除去RNA，将沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中，离心后收集上清液。在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M。加入2倍体积95%乙醇，立即用搅拌法搅出。分别用66%，80%和95%乙醇以及丙铜洗涤，最后在空气中干燥，既得DNA样品。此法提取的DNA中
动物DNA提取实验
实验方法原理 在浓氯化钠（1-2 mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小，在稀氯化钠（0.14 mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很小，核糖核蛋白的溶解度很大。因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液，将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。 将抽提得的
动物DNA提取实验
标签： 动物肝脏 DNA 提取动物肝脏DNA提取可以：（1）用于法医学鉴定；（2）
质粒DNA提取实验
实验方法原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子，是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作，进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。 提取质粒的基本步骤分为三步：①细菌的培养和质粒的扩增②细菌菌体的裂解③质粒DNA的纯化实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒
植物DNA提取实验
机械法 实验方法原理 这是一种快速简便提取植物总DNA的方法。先将新鲜的叶片在液氮中研磨，以机械力破碎细胞壁，然后加入十六烷三甲基溴化铵分离缓冲液，使细胞膜破
质粒DNA提取实验
碱解法SDS碱裂解法（试剂盒提取）实验方法原理碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性，再将pH值调至中性使其复性，复性的为质粒DNA，而染色体DNA不会复性，缠结成网状物质，通过离心除去。实验材料大肠杆菌
DNA的提取实验
掌握核酸提取与纯化的方法，离心技术的合理使用．酚为有效的蛋白质变性剂，并且饱和的酚与水相有效的分开．因此，在含核酸的样品加入酚，可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层，本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导实验方法原理酚为有效的蛋白质变性剂，并且饱和的酚与水相有效的分开．因此，在含核酸
DNA的提取实验
实验方法原理 酚为有效的蛋白质变性剂，并且饱和的酚与水相有效的分开．因此，在含核酸的样品加入酚，可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层，位于水相与有机相的界画，从而达到纯化核酸的目的．但酚不能完全抑制RNA酶的活性，而且酚层中含有10－15%的水