核提取物的制备实验

实验材料 哺乳动物试剂、试剂盒 PBS低渗缓冲液低盐缓冲液透析缓冲液仪器、耗材 转子离心机电导计透析膜匀浆机离心管实验步骤 1a. 收集转瓶培养的细胞:将浓度为5~10×108细胞/l 的培养液用1 L 的塑料瓶1 850 g 离心20 min,将细胞收入50 ml 锥形离心管中(每管收2~3 L 培养液中的细胞)。进行步骤2。1b. 收集单层培养的细胞:单层细胞长满后去掉培养液。用PBS洗1次。将细胞刮入新鲜PBS液里,倒进锥形离心管中。进行步骤2。2. 1 850 g 离心10 min。3a. 转瓶培养细胞:测量压紧后细胞的体积。将细胞重悬于约5倍于其pcv的PBS液中,1 850 g 离心10 min。进行步骤4。3b. 单层培养细胞:测量pcv,进行步骤4。4. 快速地将沉淀的细胞重悬于5倍体积的低渗缓冲液中,1 850......阅读全文

外周血单个核细胞样本的制备

实验方法原理 血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料 外周血试剂、试剂盒 肝素生理盐水实验

脾脏单个核细胞悬液如何制备

(1)大鼠断颈处死后,无菌取脾置于消毒平皿中称重;(2)超净工作台上置10cm直径无菌平皿,加入5~10ml D-hanks平衡液 ,置一80目的不锈钢筛于平皿中,脾脏置于筛网中,用剪刀剪碎脾,用5ml玻璃注射器针芯轻轻捻磨脾脏,使分散的细胞滤过金属网进入平皿的液体中, D-hanks冲洗一次;(3

抗核提取物(ENA)抗体检测的临床意义

  BNP阳性:混合结缔组织病、SLE、硬皮病。 Sm阳性:Sm抗体为SLE的特异性抗体,其他疾病极少出现假阳性,但在SLE中阳性率不高。

用于基因组文库的真核DNA的部分酶切(制备反应)实验

            实验方法原理 通过限制酶部分酶切可将高分子质量 DNA 片段化。在预实验中,建立了适宜的部分酶切条件。对于将用于克隆的基因组 DNA 来说,预实验的结果确定了对其进行制备的三个大规模反应的条件,这将在本方案叙述。

用于基因组文库的真核DNA的部分酶切(制备反应)实验

通过限制酶部分酶切可将高分子质量 DNA 片段化。在预实验中,建立了适宜的部分酶切条件。对于将用于克隆的基因组 DNA 来说,预实验的结果确定了对其进行制备的三个大规模反应的条件,这将在本方案叙述。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理通过限制酶部分酶切可将高分子质量 DNA

用于基因组文库的真核DNA的部分酶切(制备反应)实验

实验方法原理 通过限制酶部分酶切可将高分子质量 DNA 片段化。在预实验中,建立了适宜的部分酶切条件。对于将用于克隆的基因组 DNA 来说,预实验的结果确定了对其进行制备的三个大规模反应的条件,这将在本方案叙述。实验材料 限制性内切核酸酶基因组 DNAλ 噬菌体 DNA质粒寡聚体试剂、试剂盒 乙酸铵

血清制备实验

抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。实验材料血仪器、耗材低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让

血清制备实验

血清制备实验             实验材料 血 仪器、耗材

血清制备实验

实验材料 血仪器、耗材 低温离心机4℃冰箱试管–80℃低温储藏箱实验步骤 1. 取血后,37℃下,让血液凝固1 到2 小时(不加抗凝剂);2. 4℃冰箱过夜(让血块固缩);3. 当血清自然析出后, 4℃,3000 转/分,离心10 分钟,分离血清,弃去不溶物;4. 将血清移至一干净试管,并分装成小份

制备电泳实验

实验方法原理 严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品通过某种电泳方法进一步分离纯化后,再用扩散洗脱或电泳洗脱收集纯样品,继而用作其他分析的需要。实验材料 凝胶切片仪器、耗材 解剖刀匀浆器实验步骤 1. 扩散洗脱扩散洗脱是用解剖刀或匀浆器将凝胶切片捣

制备克隆实验

试剂、试剂盒ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱水浴箱实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mmol/L

制备电泳实验

洗脱 连续电泳 等电聚焦制备电泳             实验方法原理 严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品

制备克隆实验

            试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶 平末

制备克隆实验

试剂、试剂盒 ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材 FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱 水浴箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mm

线粒体和细胞核的制备与观察

实验概要本实验介绍了线粒体和细胞核制备的基本原理及操作。对分离得到的细胞核及线粒体进行了活性鉴定,有助于掌握用差速离心技术分离制备动物细胞核及线粒体的方法。实验原理利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来(差速离心技术)。线粒体是真核细胞

HeLa-细胞核提取物的-Sephacryl-S300-HR-柱

HeLa 细胞核提取物的 Sephacryl S-300 HR 柱层析实验             试剂、试剂盒 HeLa 细胞核提取物

细菌细胞的制备实验实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基             实验材料

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液                        

细菌RNA制备实验

实验材料 RNA试剂、试剂盒 STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1.  培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期,加入1/20体积终止缓冲液,置于冰上。2.  于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3.

巧克力平板制备实验

实验方法原理 巧克力平板应用羊血或免血制备。因其中含有Ⅹ和Ⅴ因子,嗜血杆菌、奈瑟氏菌等生长良好,凡疑有这些菌种存在的标本,均须接种巧克力平板。血液标本培养,增苗后有细苗生长,若移种巧克力平板上,有利于分离到更多的细菌。实验步骤 成分:牛肉浸出液:              1000 ml蛋白胨:  

散剂的制备实验

示例法             实验材料 碳酸氢钠 氧化镁 试剂、试剂盒

桥粒的制备实验

从牛舌或牛口鼻部分离桥粒分级分离桥粒实验材料牛口鼻部或舌头                                                          试剂、试剂盒柠檬酸缓冲液                                                  

细菌RNA制备实验

革兰氏阴性细菌中提取 革兰氏阳性细菌中提取             实验材料 RNA 试

血平板制备实验

实验方法原理肉汤琼脂中加羊血或兔血均可。用血量为5-7%。在血平板上除了可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血。菌落周围成绿色为α-溶血。溶血情况可以显微镜下用低倍镜观察。实验步骤成分:牛肉浸出液:          1000 ml蛋白胨:        

巧克力平板制备实验

实验方法原理主要是蛋白胨和牛肉粉用来提供细菌生长所需的碳源、氮源、氨基酸以及维生素。氯化钠维持培养基中的渗透压,琼脂用做凝固剂。脱纤维羊血提供氯化血红素和辅酶I,为嗜血杆菌属的生长提供特殊营养。巧克力平板培养基还能够培养其他细菌,主要的原因是血液中有V、X因子,这两种因子是位于红细胞中的,一般细菌不

桥粒的制备实验

从牛舌或牛口鼻部分离桥粒 分级分离桥粒             实验材料 牛口鼻部或舌头

血平板制备实验

实验方法原理 肉汤琼脂中加羊血或兔血均可。用血量为5-7%。在血平板上除了可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血。菌落周围成绿色为α-溶血。溶血情况可以显微镜下用低倍镜观察。实验步骤 成分:牛肉浸出液:          1000 ml蛋白胨:      

制备电泳实验——洗脱

蛋白质的分离纯化是研究其结构、特性和功能的基础,诸如一级结构、溶液构象、晶体结构、免疫功能和生物机理等研究都必须用一定量并具有活性的纯样品作为研究材料。本实验来源「蛋白质电泳实验技术」主编:郭尧君。实验方法原理严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品

“高挂草提取物的制备方法”获国家发明ZL授权

  8月26日获悉,由中国科学院兰州化学物理研究所中科院西北特色植物资源化学重点实验室(甘肃省天然药物重点实验室)药物化学成分研究组发明的ZL“高挂草提取物的制备方法”(ZL号:200710307291.9)获得国家发明ZL授权。   该发明将粉碎后的高挂草药材通过溶剂提取和不同极性的有机溶剂石油