核提取物的制备实验

实验材料 哺乳动物试剂、试剂盒 PBS低渗缓冲液低盐缓冲液透析缓冲液仪器、耗材 转子离心机电导计透析膜匀浆机离心管实验步骤 1a. 收集转瓶培养的细胞:将浓度为5~10×108细胞/l 的培养液用1 L 的塑料瓶1 850 g 离心20 min,将细胞收入50 ml 锥形离心管中(每管收2~3 L 培养液中的细胞)。进行步骤2。1b. 收集单层培养的细胞:单层细胞长满后去掉培养液。用PBS洗1次。将细胞刮入新鲜PBS液里,倒进锥形离心管中。进行步骤2。2. 1 850 g 离心10 min。3a. 转瓶培养细胞:测量压紧后细胞的体积。将细胞重悬于约5倍于其pcv的PBS液中,1 850 g 离心10 min。进行步骤4。3b. 单层培养细胞:测量pcv,进行步骤4。4. 快速地将沉淀的细胞重悬于5倍体积的低渗缓冲液中,1 850......阅读全文

制备电泳实验——等电聚焦制备电泳

实验方法原理等电聚焦制备电泳是一种非变性制备技术。由于等电聚焦电泳技术的特点,因而是一种理想的制备方法。试剂、试剂盒电极液两性电解质Ultrodex实验步骤一、液体介质垂直柱状蔗糖密度梯度等电聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制备和分析目的的等电聚焦方法。载体两性电解质在蔗糖密度梯度柱中形成 pH

蛋白质和多肽MALDIMS分析的一般方法实验

HeLa 细胞核提取物的制备实验             试剂、试剂盒 甘油 液氮 MgCl2•6 H2O

细菌细胞的制备实验实验——细胞抽提物的制备

实验材料细胞试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材弗氏破碎器实验步骤1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为 2 μ

酵母前体mRNA剪接提取物实验

            实验方法原理 剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体聚合酶体外转录的方法来制备。

酵母前体mRNA剪接提取物实验

真核生物前体 mRNA ( pre-mRNA ) 的剪接分为两步,即先从前体切去内含子,然后将两个外显子连接在一起形成成熟的  mRNA。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使

细胞核连缀分析实验

从组织中制备细胞核体外细胞核连缀反应体外细胞核连缀反应产物的分析实验材料动物组织                                                          试剂、试剂盒PBS                                          

单个核细胞(MNCs)获取实验

实验方法原理 实验材料 脐血试剂、试剂盒 灭菌合适的培养基或冷冻液PBSA仪器、耗材 Ficoll-Hypague(密度1.077g L)巴氏吸管50mL离心管实验步骤 (a) 将脐血样品用PBSA按1:1比例稀释。(b) 将15mLFicoll-Hypague吸入50mL离心管。(c) 将30mL

单个核细胞(MNCs)获取实验

基本方案实验方法原理实验材料脐血                                                          试剂、试剂盒灭菌合适的培养基或冷冻液                                                          

核转位筛选实验(一)

优点· 可重复性表型检测· 既高通量又不牺牲质量的图像获取· 应用交互式预览,大大减少分析设置时间· 统一的统计方法使结果更准确  躁郁症(BD)是一种高度遗传性的心理疾病,它影响到全球大概1%的人口。1949 年锂被第一次应用于躁郁症,到目前为止锂仍是治疗BD 的主要药物。然而在一半的病例中,锂并

核转位筛选实验(二)

利用交互式的灵活的软件分析数据MetaXpress® 软件中的Translocation-Enhanced 应用模块可以被用来鉴定核中以及定量与细胞核相关的其余部分中ß-catenin-EGFP 的量(图3)。对细胞核区间的划分来源于被Hoechst 核染料染色的区域。然后用第二种波长的光(

单个核细胞(MNCs)获取实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 脐血

细胞核连缀分析实验

从组织中制备细胞核 体外细胞核连缀反应 体外细胞核连缀反应产物的分析             实验材料 动物组织

单个核细胞(MNCs)获取实验

实验材料脐血试剂、试剂盒灭菌合适的培养基或冷冻液PBSA仪器、耗材Ficoll-Hypague(密度1.077g L)巴氏吸管50mL离心管实验步骤(a) 将脐血样品用PBSA按1:1比例稀释。(b) 将15mLFicoll-Hypague吸入50mL离心管。(c) 将30mLPBSA稀释的脐血样品

实验动物组织标本的制备实验

实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2

单克隆抗体上清制备实验——大量制备

实验材料目的杂交瘤试剂、试剂盒完全 DMEM-10 培养液(含 5~10 mmol/L HEPES pH 7.2~7.4)仪器、耗材250 ml 无菌锥形离心管转瓶培养装置850 cm2 旋转培养瓶175 cm2 组织培养瓶实验步骤1. 重复基本方案 1 步骤 1,并按 1:10 分传到终体积为 1

细胞核连缀分析实验_体外细胞核连缀反应

实验材料组织试剂、试剂盒EDTASDS蛋白酶 K仪器、耗材玻璃试管实验步骤1. 融解从 1 g 组织或 5 瓶培养皿细胞制备、冻存于 NSB 中的细胞核。1000 g 离心 5 分钟,去上清,用 200 μl HRB 轻轻吹打重悬。2. 将悬液转至一个带有抗酚螺帽的硅化玻璃试管,37℃ 水浴 5 到

固体所在核材料制备研究方面取得新进展

  近期,中科院合肥物质科学研究院固体物理所内耗与固体缺陷实验室方前锋课题组在钨基材料和氧化物弥散强化(ODS)铁素体钢的制备和性能表征研究方面取得新进展。研究人员连续在核材料领域的主流期刊《核材料杂志》(Journal of Nuclear Materials)上发表4篇学术论文。

外周血单个核细胞(PBMC)制备方法及注意事项

外周血单个核细胞(PBMC)制备方法及注意事项外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC),是指外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞(Lymphocyte)、单核细胞(Monocyte)、树突状细胞(DC)和其他少量细胞。PBMC可利用健康人或动

制备电泳实验——连续电泳

仪器、耗材聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖电泳实验步骤1. 连续洗脱电泳使用连续洗脱的聚丙烯酰胺凝胶电泳或琼脂糖电泳能制备微克到毫克级的多肽,蛋白或核酸。装置可以是各种各样的。有的是把样品直接加在固体凝胶的表面,分子经过电泳分离后,由流动的缓冲液洗脱,纯化后的分子被浓缩,并由蠕动泵和部分收集器收集。2. 连

制备肌动蛋白实验

从肌肉制备丙酮粉用于纯化肌动蛋白 由骨骼肌丙酮粉制备肌动蛋白 将肌动蛋白纯化成纯品             实验材料 肌球蛋白

反义RNA的制备实验

实验材料 限制性内切核酸酶酶水解模板 DNA大肠杆菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ试剂、试剂盒 氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液转录缓冲液Tris-Cl盐酸亚精胺NaCl胎盘RNase抑制物牛血清白蛋白RNA聚合酶DEPC仪器、耗材 DNA合成仪琼脂糖凝胶电泳微量离心管实验步骤 一、化学合成的 RN

磷酸酶制备实验

蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A)膜蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒缓冲盐清洗液                              

金相试样的制备实验

  一、实验目的  1. 学会金相试样的制备方法。  2. 熟悉常用化学浸蚀试剂及其使用方法。  二、实验内容  按照金相试样的制备方法,每人制备出碳钢金相试样一块,用金相显微镜观察自己制备的试样,要求试样在显微镜下观察应没有磨痕、组织清晰。  三、实验原理  要对金属材料的显微组织进行观察,首先就

血涂片的制备实验

实验材料血液试剂、试剂盒消毒酒精瑞特染色液蒸馏水仪器、耗材载玻片盖玻片脱脂棉刺血针油镜用油显微镜实验步骤一、血涂片的制备按以下各步骤进行操作。(一)采血采血之前先揉搓需要采血的部位,如耳垂或手指尖,使血流旺盛。用酒精消毒皮肤,待干。以左手拇指及食指夹持局部,再用消毒过的刺血针刺之,血液自然流出。如血

酪蛋白的制备实验

等电点沉淀法             实验方法原理 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛

反义RNA的制备实验

            实验材料 限制性内切核酸酶酶水解 模板 DNA 大肠杆菌 DNA 多聚酶 胰 DNaseⅠ 试剂、试剂盒

PAGE胶制备方法实验

实验试剂1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50%甘油,2ml 10%的SDS,0.5ml巯基乙醇,1ml 1%溴酚蓝,0.9ml蒸馏水。可在4℃保存数周,或在-20℃保存数月。2. 凝胶贮液:在通风橱中,称取丙烯酰胺30g,甲叉双丙烯

反义RNA的制备实验

RNA 也可以由线状 DNA 为模板,通过 RNA 聚合酶(如T3、T7 或 SP6 ) 在体外合成。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验材料限制性内切核酸酶酶水解模板 DNA大肠杆菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ试剂、试剂盒氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液转录缓冲液Tris-Cl盐

磷酸酶制备实验

蛋白丝/苏氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)             实验材料 细胞

营养琼脂平板制备实验

实验方法原理用于纯化菌种,保存菌种。实验步骤成分:蛋白胨:                  10 g牛肉膏:                  5 g氯化钠:                  5 g琼脂:                    20 g蒸馏水: