从琼脂糖凝胶中纯化PCR片段实验
试剂、试剂盒 乙醇溴化乙锭电泳缓冲液PCR 片段琼脂糖凝胶细胞和组织仪器、耗材 微量离心管解剖刀紫外灯真空装置实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂（1）乙酵（95%)（2）嵌入染料，如溴化乙锭（3）TAE 电泳缓冲液 40 mmol/L 三羟甲基氨基甲烷-醋酸盐,pH8.2 1mmol/LEDTA或（4）TBE 电泳缓冲液 90 mmol/L 三羟甲基氨基甲烷-硼酸盐,pH8.3 2 mmol/LEDTA2. 核酸和寡核苷酸来自琼脂糖凝胶中的 PCR 片段3. 胶琼脂糖凝胶（常规或低熔点）4. 特殊设备微量离心管，1.5 ml解剖刀或剃须刀片长波长紫外灯真空装置和......阅读全文
从琼脂糖凝胶中纯化－PCR－片段实验
Wizard SV 胶和 PCR 纯化系统是利用硅基法从琼脂糖凝胶中或从 PCR 扩增反应混合物中直接纯化 PCR 片段的方法。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇溴化乙锭电泳缓冲液PCR 片段琼脂糖凝胶细胞和组织仪器、耗材微量离心管解剖刀紫外灯真空装置实验
从琼脂糖凝胶中纯化－PCR－片段实验
试剂、试剂盒 乙醇 溴化乙锭 电泳缓冲液 PCR 片段 琼脂糖凝胶 细胞和组织
从琼脂糖凝胶中纯化－PCR－片段实验
试剂、试剂盒 乙醇溴化乙锭电泳缓冲液PCR 片段琼脂糖凝胶细胞和组织仪器、耗材 微量离心管解剖刀紫外灯真空装置实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂（1）乙酵（95%)（2）嵌入染料，如溴化乙锭（3）TAE 电泳缓冲液 40 mmol/L 三羟甲基氨基甲烷-醋酸盐,pH8.2
从琼脂糖凝胶(Agaros－gel)中回收DNA片段实验
实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后，按分子量大小被分开，排列在琼脂糖凝胶中，可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来，加热或用特殊的试剂熔解凝胶，使DNA溶回到溶液中，再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。实验试剂1. 电泳缓冲液2. 荧光染料3. 电泳级琼脂糖粉4. 10
从琼脂糖凝胶(Agaros－gel)中回收DNA片段
目的学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。2．原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后，按分子量大小被分开，排列在琼脂糖凝胶中，可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来，加热或用特殊的试剂熔解凝胶，使DNA溶回到溶液中，再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。3．器材旋涡混合器，
从琼脂糖凝胶(Agaros－gel)中回收DNA片段
实验概要学会从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的基本技术。实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后，按分子量大小被分开，排列在琼脂糖凝胶中，可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来，加热或用特殊的试剂熔解凝胶，使DNA溶回到溶液中，再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。主要试剂1. 电
从琼脂糖凝胶（Agaros－gel）中回收DNA片段
实验原理限制性内切酶切割后的DNA片断经过电泳后，按分子量大小被分开，排列在琼脂糖凝胶中，可以将特定的某条DNA带所在的凝胶切下来，加热或用特殊的试剂熔解凝胶，使DNA溶回到溶液中，再经过乙醇沉淀或过柱即可获得目的 DNA酶切片段。实验试剂1. 电泳缓冲液2. 荧光染料3. 电泳级琼脂糖粉4. 10
纯化RNA实验——从组织中纯化总RNA
实验材料组织试剂、试剂盒RNA 抽提缓冲液氯仿实验步骤1. 从动物取下组织，直接进行第 2 步或在液氮中快速冷冻新鲜解剖的组织。冷冻后的组织可以贮存在 -70℃。2. 组织（0.05~0.3 g）在 2.0 ml RNA 抽提缓冲液中匀浆。3. 每管加 200 μl 氯仿，混合均匀，冰浴 15 分钟
一种从凝胶中直接回收DNA进行PCR的方法
分子生物学实验中，常常需要从琼脂糖凝胶或聚丙酰胺凝胶中回收DNA，进行纯化、探针标记或进一步扩增等。鉴于PCR反应具有高度敏感性，微量模板即可扩增出阳性产物。我们从琼脂糖凝胶中直接回收DNA进行PCR，取得较满意的结果，报道如下。 1 材料和方法 1.1 试剂 Taq DNA聚合酶、dNTP、琼
从聚丙烯酰胺凝胶中回收－RNA－片段
试剂、试剂盒 溴化乙锭 洗脱缓冲液 储存液 8mol LLiCl 溶液 异丙醇 70% 乙醇 1XTBE 缓冲液仪器、耗材 聚丙烯酰胺凝胶电泳槽 金属小铲 Whatman3 MM 滤纸 玻璃棒 表面皿 保鲜膜 透射紫外灯 刀片 Texta 笔 射线胶片实验步骤 一材料与设备1) 溴化乙锭：10 mg
从聚丙烯酰胺凝胶中回收－RNA－片段
试剂、试剂盒 溴化乙锭 洗脱缓冲液 储存液 8mol LLiCl 溶液 异丙醇 70% 乙醇 1XT
PCR扩增产物鉴定与纯化
实验概要通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物，并对获得的产物进行割胶纯化回收，为接下来的DNA重组和转化实验提供外源DNA片段。实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。（原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验） 本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒（Agarose Gel DNA Purifi
PCR扩增产物鉴定与纯化
实验原理 琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。（原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验） 本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统，结合DN
PCR扩增产物鉴定与纯化
实验原理 琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。（原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验） 本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统，结合DN
PCR扩增产物鉴定与纯化
实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。（原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验）本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统，结合DNA制
PCR扩增产物鉴定与纯化实验原理及实验过程
实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。（原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验）本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统，结合DNA制备膜技
PCR扩增产物鉴定与纯化实验原理及实验过程
实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。（原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验）本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒（Agarose Gel DNA Purification Kit），该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统，结合DNA制
凝胶纯化实验
试剂、试剂盒蒸馏水乙醇甲酰胺胶的缓冲液亚甲基蓝十二烷基硫酸钠储存液TAE 缓冲液Tris 乙酸盐乙酸纳EDTA蓝色葡聚糖TEN 缓冲液40mer聚丙烯酰胺胶仪器、耗材解剖刀UV 灯过滤 UV 的安全破璃实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂蒸馏水乙醇，95%甲酰胺 (使用安珀莱特单床离子交换树脂
凝胶纯化实验
试剂、试剂盒 蒸馏水 乙醇 甲酰胺 胶的缓冲液 亚甲基蓝 十二烷基硫酸钠储存液 TAE 缓冲液 Tris
凝胶纯化实验
试剂、试剂盒 蒸馏水乙醇甲酰胺胶的缓冲液亚甲基蓝十二烷基硫酸钠储存液TAE 缓冲液Tris 乙酸盐乙酸纳EDTA蓝色葡聚糖TEN 缓冲液40mer聚丙烯酰胺胶仪器、耗材 解剖刀UV 灯过滤 UV 的安全破璃实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂蒸馏水乙醇，95%甲酰胺 (使用安珀莱特单床离子交换
2.9－从聚丙烯酰胺凝胶中回收－RNA－片段
从聚内烯酰胺凝胶中回收 RNA 片段最好的方法是粉碎浸泡法。此法能从变性胶屮很好的回收高纯度的单链 RNA。但是此法不适用于长转录产物，因为它既费时间效率又低，例如: 超过 3kb 的 RNA 的回收效率不到30%。但是对于回收小片段 RNA 此方法是十分有效的。试剂、试剂盒溴化乙锭洗脱缓冲液储存液
电泳分析法琼脂糖凝胶电泳的应用
琼脂糖凝胶电泳是分离蛋白质，DNA或RNA的常规方法。 DNA分子大小的估计 分析PCR产物，例如在分子遗传学诊断或遗传指纹分析中 在进行Southern分析之前，先对限制性基因组DNA进行分离，在进行Northern分析之前，先对RNA进行分离。 琼脂糖凝胶电泳广泛用于评估限制酶消化后
纯化RNA实验——从培养的细胞中纯化总RNA
实验材料细胞试剂、试剂盒RNA 提取缓冲液变性液水饱和酚仪器、耗材培养皿Falcon 2063 管实验步骤1. 取 1 个细胞已长满的 100 ml 培养皿，吸出培养液，加 2 ml RNA 提取缓冲液，用橡胶刮棒刮下细胞。RNA 提取缓冲液：变性液，20 mlβ-巯基乙醇，0.144 ml2 mo
线虫unc22突变基因的克隆实验原理和操作步骤1
【实验原理】 外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组，这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA 连接酶的作用下，有Mg2+ 、ATP存在的连接缓冲系统中，将载体分子与外源DNA分子进行连接。Taq DNA聚合酶扩增的PCR产物，其DNA双链前后末端都有一
直接从PCR产物回收纯化DNA
1)直接加90-100μl纯化缓冲液于1.5ml离心管，再加入30～300μl PCR反应物，Vortex混合；2)加入1ml树脂轻轻Vortex 3次，每次间隔1分钟；3)将取出拉杆的注射器筒（3ml）装在纯化柱上，加入上述DNA与树脂混合液，然后装上拉杆，慢慢将混合液推进纯化柱内；4)卸下注射器
从果蝇胚胎中纯化核心组蛋白实验
实验材料0～12 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒脱色洗液胚胎洗液缓冲液 B缓冲液 ANaOHCaCl2EDTASDSNaCl氯仿 异戊醇T50E4 缓冲液核心组蛋白储存液仪器、耗材羟磷灰石树脂BCA 分析试剂盒细尼龙网Yamato LH－21 匀浆器Beckman 超速离心机MWCO 透析管实验步骤1.
从果蝇胚胎中纯化核心组蛋白实验
实验方法原理 实验材料 0～12 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒 脱色洗液胚胎洗液缓冲液 B缓冲液 ANaOH CaCl2 EDTA SDSNaCl氯仿 异戊醇T50E4 缓冲液核心组蛋白储存液仪器、耗材 羟磷灰石树脂BCA 分析试剂盒细尼龙网Yamato LH－21 匀浆器Beckman 超速离心机 M
制备克隆用PCR产物的纯化
实验方法原理 PCR 产物经酚:氯仿抽提、乙醇沉淀及其他一些常用方法纯化后，DNA 样品内还往往残留了一些具有酶活性的 Taq DNA 酶与另外一些热稳定 DNA 聚合酶（Cioweetal. 1991; Bamesl992)。这些残余的
制备克隆用PCR产物的纯化
实验方法原理 PCR 产物经酚:氯仿抽提、乙醇沉淀及其他一些常用方法纯化后，DNA 样品内还往往残留了一些具有酶活性的 Taq DNA 酶与另外一些热稳定 DNA 聚合酶（Cioweetal. 1991; Bamesl992)。这些残余的 DNA 聚合酶连同一些残余的 dNTP 的持续存
PCR需要注意的一些问题
扩增长目的片段当扩增大于5kb的目的片段时，可以使用用于超长PCR的酶或酶混合物以获得最佳产量（图24）。Taq DNA聚合酶并不能有效扩增较长目的片段（大于5kb），可能是因为其缺少3'-5'外切核酸酶活性，不能纠正dNTP错误掺入。错误配对的延伸几率大大降低，减少了较长产物的产量