从果蝇胚胎中纯化核心组蛋白实验
实验材料0～12 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒脱色洗液胚胎洗液缓冲液 B缓冲液 ANaOHCaCl2EDTASDSNaCl氯仿 异戊醇T50E4 缓冲液核心组蛋白储存液仪器、耗材羟磷灰石树脂BCA 分析试剂盒细尼龙网Yamato LH－21 匀浆器Beckman 超速离心机MWCO 透析管实验步骤1. 实验前准备：1.1 材料0～12 h 果蜗胚胎1.2 试剂脱色洗液：50％（V/V）家用漂白剂的蒸馏水溶液胚胎洗液：0.7％（m/V）NaCl/0.04％（V/V）Triton X－100缓冲液 B缓冲液 A1 mol/L NaOH0.1 mol/L CaCl27200 U/ml 微球菌核酸酶储液10 mmol/L 和 500 mmol/L EDTA10％（m/V）SDS5 mol/L NaCl24：1 （V/V） 氯仿/异戊醇线形 5％～30％ 蔗糖梯度T50E4 缓冲液：50 mmol/L Tris·Cl（pH 7.9）......阅读全文
从果蝇胚胎中纯化核心组蛋白实验
实验方法原理 实验材料 0～12 h 果蜗胚胎 试剂、试剂盒 脱色洗液胚胎洗液缓冲液 B缓冲液 ANaOH CaCl2 EDTA SDSNaCl氯仿 异戊醇T50E4 缓冲液核心组蛋白储存液 仪器、耗材 羟磷灰石树脂BCA 分析试剂盒细尼龙网Yamato LH－21 匀浆器Beckman
从果蝇胚胎中纯化核心组蛋白实验
实验材料0～12 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒脱色洗液胚胎洗液缓冲液 B缓冲液 ANaOHCaCl2EDTASDSNaCl氯仿 异戊醇T50E4 缓冲液核心组蛋白储存液仪器、耗材羟磷灰石树脂BCA 分析试剂盒细尼龙网Yamato LH－21 匀浆器Beckman 超速离心机MWCO 透析管实验步骤1.
羟磷灰石层析法纯化核心组蛋白实验
实验材料精核试剂、试剂盒HAP 缓冲液BioGel HTP 粉（Bio－Rad）Bio－Rad 蛋白定量系统（可选）仪器、耗材2 cm×15 cm 柱及附件 Centriprep－10 浓缩器（Amicon； 可选）实验步骤1. 用 25 ml HAP 重悬约 2 ml 精核（约含有 6 mg DN
羟磷灰石层析法纯化核心组蛋白实验
实验方法原理 实验材料 精核试剂、试剂盒 HAP 缓冲液BioGel HTP 粉（Bio－Rad）Bio－Rad 蛋白定量系统（可选）仪器、耗材 2 cm×15 cm 柱及附件 Centriprep－10 浓缩器（Amicon； 可选）实验步骤 1. 用 25 ml HAP 重悬约 2 ml 精核（
纯化RNA实验——从组织中纯化总RNA
实验材料组织试剂、试剂盒RNA 抽提缓冲液氯仿实验步骤1. 从动物取下组织，直接进行第 2 步或在液氮中快速冷冻新鲜解剖的组织。冷冻后的组织可以贮存在 -70℃。2. 组织（0.05~0.3 g）在 2.0 ml RNA 抽提缓冲液中匀浆。3. 每管加 200 μl 氯仿，混合均匀，冰浴 15 分钟
从果蝇胚胎中提取总－RNA－或－poIy(A)－+RNA
试剂、试剂盒 0.lmol LNaOH 乙醇 3mol L 乙酸钠 苯酚 无 SDS 的结合缓冲液 含 SDS 的结合缓冲
从果蝇胚胎中提取总－RNA－或－poIy(A)－+RNA
试剂、试剂盒 0.lmol LNaOH 乙醇 3mol L 乙酸钠 苯酚 无 SDS 的结合缓冲液 含 SDS 的结合缓冲液 TE 缓冲液 SEVAG 漂白剂（Bleach) 含 MgCl2 的 PBS(pH7.2) 果蝇勻浆缓冲液实验步骤 一 材料与设备1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/
2.3.1－从果蝇胚胎中提取总－RNA－或－poIy(A)－+RNA
试剂、试剂盒0.lmol LNaOH乙醇3mol L 乙酸钠苯酚无 SDS 的结合缓冲液含 SDS 的结合缓冲液TE 缓冲液SEVAG漂白剂（Bleach)含 MgCl2 的 PBS(pH7.2)果蝇勻浆缓冲液实验步骤一 材料与设备1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/V) 乙醇3)3mol/
纯化RNA实验——从培养的细胞中纯化总RNA
实验材料细胞试剂、试剂盒RNA 提取缓冲液变性液水饱和酚仪器、耗材培养皿Falcon 2063 管实验步骤1. 取 1 个细胞已长满的 100 ml 培养皿，吸出培养液，加 2 ml RNA 提取缓冲液，用橡胶刮棒刮下细胞。RNA 提取缓冲液：变性液，20 mlβ-巯基乙醇，0.144 ml2 mo
从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
实验方法原理分子克隆技术能够使细菌高水平表达蛋白，因此原核表达是一个非常便利的获得重组蛋白的系统。遗憾的是这些蛋白在细菌中易于聚合和沉淀，形成难溶解的包含体，因而很难纯化。非细菌蛋白的包含体尤其普遍。虽然没有一种可用于所有蛋白的普适方法，还是有许多策略适用于包含体蛋白的溶解。本方案描述的就是这些策略
从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
实验方法原理 分子克隆技术能够使细菌高水平表达蛋白，因此原核表达是一个非常便利的获得重组蛋白的系统。遗憾的是这些蛋白在细菌中易于聚合和沉淀，形成难溶解的包含体，因而很难纯化。非细菌蛋白的包含体尤其普遍。虽然没有一种可用于所有蛋白的普适方法，还是有许多策略适用于包含体蛋白的溶解。本方案描述的就是这些策
从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
基本方案 实验方法原理 分子克隆技术能够使细菌高水平表达蛋白，因此原核表达是一个非常便利的获得重组蛋白的系统。遗憾的是这些蛋白在细菌中易于聚合和沉淀，形成难溶
利用－ConcertPlant－试剂从植物组织中纯化－RNA－实验
以下概述的是 ConcertPlant 试剂（Invitrogen) 所附带的方案。该方案不是以酚为基础的，但需要加氯仿。该试剂用于多种植物的组织中分离 RNA, 包括蓝叶云杉针、马铃薯块茎、玉米种子和棉花叶。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 实验材料
利用－ConcertPlant－试剂从植物组织中纯化－RNA－实验
实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Concert Plant RNA试剂NaCl氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水 实验步骤 一、材料 1.缓冲液、溶液和试剂 ConcertPlantRNA试剂(Invitrogen)，4°C预冷 NaCl,5mol/L(无RNA酶）
从琼脂糖凝胶中纯化－PCR－片段实验
试剂、试剂盒 乙醇溴化乙锭电泳缓冲液PCR 片段琼脂糖凝胶细胞和组织仪器、耗材 微量离心管解剖刀紫外灯真空装置实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂（1）乙酵（95%)（2）嵌入染料，如溴化乙锭（3）TAE 电泳缓冲液 40 mmol/L 三羟甲基氨基甲烷-醋酸盐,pH8.2
从琼脂糖凝胶中纯化－PCR－片段实验
试剂、试剂盒 乙醇 溴化乙锭 电泳缓冲液 PCR 片段 琼脂糖凝胶 细胞和组织
从琼脂糖凝胶中纯化－PCR－片段实验
Wizard SV 胶和 PCR 纯化系统是利用硅基法从琼脂糖凝胶中或从 PCR 扩增反应混合物中直接纯化 PCR 片段的方法。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇溴化乙锭电泳缓冲液PCR 片段琼脂糖凝胶细胞和组织仪器、耗材微量离心管解剖刀紫外灯真空装置实验
重组的果蝇－ACF－的表达和纯化实验
实验材料高滴度的 Acf1－FLAG 和 ISWI 杆状病毒储液晚对数期的悬浮培养的 Sf9 细胞试剂、试剂盒公磷酸缓冲盐溶液（PBS）裂解缓冲液 FFLAG-M2 树脂 1：1（V V）悬浮液（Sigma－Aldrich）稀释缓冲液 F洗涤缓冲液 F洗脱缓冲液 F液氮牛血清白蛋白 （BSA） 标准
重组的果蝇－ACF－的表达和纯化实验
实验方法原理 实验材料 高滴度的 Acf1－FLAG 和 ISWI 杆状病毒储液晚对数期的悬浮培养的 Sf9 细胞试剂、试剂盒 公磷酸缓冲盐溶液（PBS）裂解缓冲液 FFLAG-M2 树脂 1：1（V V）悬浮液（Sigma－Aldrich）稀释缓冲液 F洗涤缓冲液 F洗脱缓冲液 F液氮牛血清白蛋白
从包涵体中纯化表达蛋白
实验材料 表达靶蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒 细胞裂解缓冲液 I细胞裂解缓冲液Ⅱ脱氧胆酸浓盐酸包涵体溶解缓冲液 I包涵体溶解缓冲液ⅡKOHPMSFSDS 凝胶加样缓冲液含尿素的 Tris-ClDNaseI溶菌酶SDS-聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 Sorvall GSA 转头或相当的转头pH 试纸磨光
从包涵体中纯化表达蛋白
实验方法原理蛋白质在大肠杆菌中的高水平表达，常常导致形成相差显微镜下可见的细胞质颗粒或包涵体。这些由表达蛋白聚集成的包涵体很容易与可溶性蛋白和膜结合蛋白分离。高水平表达外源蛋白的细菌经离心浓缩后，可通过机械法、超声处理法或溶菌酶加去污剂的方法进行裂解。包涵体经离心沉淀后，可用Triton X-100
从包涵体中纯化表达蛋白
实验方法原理 蛋白质在大肠杆菌中的高水平表达，常常导致形成相差显微镜下可见的细胞质颗粒或包涵体。这些由表达蛋白聚集成的包涵体很容易与可溶性蛋白和膜结合蛋白分离。高水平表达外源蛋白的细菌经离心浓缩后，可通过机械法、超声处理法或溶菌酶加去污剂的方
果蝇胚胎电生理学记录
1.首先要选择测温范围合适的温度计，防止被测物体温度过高时，液柱将温度计胀裂。若无法估计被测物体的温度，则应先用测温范围较大的温度计，然后再挑选合适的温度计，并使其最小分度能符合实验精确度的要求。为减小温度计对实验系统的影响，要求实验系统应有足够大的热容量，这样才能得出较准确的实验结果。2.在测温时
重组的果蝇－NAP－1－的表达和纯化实验
实验方法原理 实验材料 晚对数期的悬浮培养的SFP细胞试剂、试剂盒 高滴度的 His－NAP－1 杆状病毒储液（Orbigen）磷酸缓冲盐溶液（PBS）裂解缓冲液 H洗涤缓冲液 H洗脱缓冲液 HHEGD 缓冲液NAP－1 纯化缓冲液 Ni－NTA牛血清白蛋白（BSA）标准 乙醇液氮仪器、耗材 离心机
高冠军/戴俊彪合作果蝇组蛋白H3/H4系统解析组蛋白剂量
组蛋白（Histone）在真核生物染色体中扮演着重要的角色，是染色体结构单元核小体的重要组成部分。由核心组蛋白H3，H4，H2A，H2B形成的八聚体是DNA缠绕的主要承载体【1】。除了用以装配染色体外，组蛋白的另外一个重要功能是参与基因组信息的表达调控。组蛋白氨基酸残基上的翻译后修饰如乙酰化、甲
重组的果蝇－NAP－1－的表达和纯化实验2
实验材料见基本方案试剂、试剂盒见基本方案咪唑的 Superflow 层析缓冲液仪器、耗材见基本方案NTA Superflow 树脂（Qiagen）FPLC 柱实验步骤1. 实验前准备主要材料见基本方案附加材料含有 20 mmol/L 和 500 mool/L 咪唑的 Superflow 层析缓冲液N
重组的果蝇－NAP－1－的表达和纯化实验1
实验材料晚对数期的悬浮培养的SFP细胞试剂、试剂盒高滴度的 His－NAP－1 杆状病毒储液（Orbigen）磷酸缓冲盐溶液（PBS）裂解缓冲液 H洗涤缓冲液 H洗脱缓冲液 HHEGD 缓冲液NAP－1 纯化缓冲液 Ni－NTA牛血清白蛋白（BSA）标准乙醇液氮仪器、耗材离心机Wheaton 杜恩斯
利用－ConcertPlant－试剂从植物组织中纯化－RNA
实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Concert Plant RNA试剂 NaCl 氯仿
果蝇实验技术
一、实验原理 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有2500个种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。果蝇优点： 1. 饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。 2.
重组蛋白纯化的基本策略
及的具体步骤最终取决于样品的性质。但也有共同可参考的阶段 捕获阶段：目标是澄清、浓缩和稳定目标蛋白。 中度纯化阶段：目标是除去大多数大量杂质，如其它蛋白、核酸、内毒素和病毒等。 精制阶段：除去残余的痕量杂质和必须去除的杂质。 分离方法的选择 根据蛋白质的特殊性质采用不同的分离方法：蛋白质