非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统（二）
(二）外源 mRNA 在非洲爪蟾卵母细胞提取物中的翻译1) 室温融化冻存的提取物，然后即置于冰上。2) 同时，应将用于翻译的 mRNA 分装于 0.5 ml 或 1.5 ml 离心管中，置于冰上3) 每 100ul 提取物应分別加入以下各成分：10ul 网织红细胞裂解液 S-100,1ul120 mmol/L 精胺，2.5ul350mol/L 磷酸肌氨酸和 lO0ulCi[35S]-甲硫氨酸。按 10〜50ul/管的量向盛有 mRNA 的离心管屮加入此种混合物，混合均匀后，置 21℃ 孵育 lh4) 如果具有高放射件活性的体外合成 mRNA 被用于翻译，则在反应结朿时应加入lOug/mlRNaseA 并置于 21°C 孵育 15 min，以除去由放射性 mRNA 带来的将会妨碍进一步分析的放射性背景。5) 如需储存，反应可在此步通过冷冻加以终止6）如用凝胶电泳分析或 TCA 沉淀反成，在加入等体积的 2XSDS 聚丙......阅读全文
非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统（二）
(二）外源 mRNA 在非洲爪蟾卵母细胞提取物中的翻译1) 室温融化冻存的提取物，然后即置于冰上。2) 同时，应将用于翻译的 mRNA 分装于 0.5 ml 或 1.5 ml 离心管中，置于冰上3) 每 100ul 提取物应分別加入以下各成分：10ul 网织红细胞裂解液 S-100,1ul120
非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统
实验材料 成年雌性非洲爪蟾 抑肽酶 tRNA 蛋白酶 K 仪器、耗材
非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统（一）
实验材料 成年雌性非洲爪蟾抑肽酶tRNA蛋白酶 K仪器、耗材 离心机 冷室实验步骤 一、材料与设备(一) 非洲爪蟾卵母细胞提取物的制备1) 成年雌性非洲爪蟾：数只。2) 高盐的 ModifiededBarth、X(MBS): 每升溶液中补加 1.28 gNaCl, 以使其终浓度达到 llOmmol/
4.3－非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统
非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统由于具有转移定位、信号肽的切除和糖篇化的能力，因此对于绝大多数的外源性 mRNA 都具冇持续性的修饰加工能力。由于其膜的稳定性高，因此可使用蔗糖密度梯度离心或蛋白酶保护反应等方法分析转录产物的定位。实验材料成年雌性非洲爪蟾抑肽酶tRNA蛋白酶 K仪器、耗材离心机冷室实验步
关于体外翻译翻译系统的选择介绍
虽然不是必须，但一般说，选用真核系统来翻译真核序列，选用原核系统来翻译原核序列。 如果一个系统存在功能上或抗原的交叉反应，就得选择另一个系统。使用微粒体膜进行翻译后修饰或加工一般只与兔网织红细胞系统兼容。仅在某些特定条件下麦胚芽翻译系统才与微粒体膜兼容。
原核细胞体外翻译系统
实验材料 适用于杯状 DNA 的 S30 提取物 适用于线状 DNA 的 S30 提取物 适用于环状 DNA 的 T7S30 提取物试剂、试剂盒 无核酸酶的水 [35S] 标记的甲硫氨酸 1 mmol L 缺少中硫氨酸的氨基酸混合物 缺少氨基酸的 S30 反应混合液仪器、耗材 —70℃ 冰箱 微量移
原核细胞体外翻译系统
实验材料 适用于杯状 DNA 的 S30 提取物 适用于线状 DNA 的 S30 提取物 适用于环状 DNA 的 T7S30 提取物 试剂、试剂盒 无核酸酶的水 [35S] 标记的甲硫氨酸 1 mmol L 缺少中硫氨酸的氨基酸混合物 缺少氨基酸的 S30 反应混合液 仪
原核细胞体外翻译系统
实验材料 适用于杯状 DNA 的 S30 提取物 适用于线状 DNA 的 S30 提取物 适用于环状 DNA 的 T7S30 提取物
非洲爪蟾环状RNA研究成果
作为最新的明星分子，环状RNA的热度与日俱增。环状RNA到底火到了什么程度？从云序客户捷报频传﹑研究成果不断就可见一斑：上期我们刚刚介绍云序客户发表了世界首个小鼠脑创伤模型外泌体环状RNA的研究，整合了外泌体和环状RNA两大科研热点。在探索新物种的环状RNA研究上，云序客户此前更是先后发表了全世界第
4.4－原核细胞体外翻译系统
S30 提取物系列产品共分为三类：适用于对环状 DNA 进行体外翻译的大肠杆菌 S30 提取物系统、适用于对线状 DNA 进行体外翻译的大肠杆菌 S30 提取物系统和适用于对环状 DNA 进行休外翻译的大肠杆菌 T7S30 提取物系统。实验材料适用于杯状 DNA 的 S30 提取物适用于线状 DNA
体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
实验材料 质粒 DNA 模板 试剂、试剂盒 无核酸酶污染的水 [35S] 标记的甲硫氧酸 TN
体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
实验材料 质粒 DNA 模板试剂、试剂盒 无核酸酶污染的水 [35S] 标记的甲硫氧酸 TNT 快速超级混合液 T7TNTPCR 增强液仪器、耗材 一 70°C 冰箱 冰浴 微量移液器 离心机 水浴槽 聚丙烯酰胺凝胶电泳装置实验步骤 ―、材料与设备1) 无核酸酶污染的水。2)[35S] 标记的甲硫氧
4.5－体外转录与体外翻译耦联的快速反应系统
TNT 耦联网织红细胞裂解物系统乂可以分为：TNTT7 系统、TNTSP6 系统和 TN 下 PCR 系统。其屮，TNTT7 系统可以从线状和环状 DNA 中翻译蛋白质，SP6 系统只能使用环状 DNA 进行翻译，而 PCR 模板可使用 TNTPCR 系统迸行翻译实验材料质粒 DNA 模板试剂、试剂
非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备实验
实验材料 雌性非洲爪蟾试剂、试剂盒 OR2 培养液“5:1” 分离液分散剂仪器、耗材 培养皿实验步骤 1. 从麻醉了的雌性非洲爪蟾中取一块卵巢，放在盛有温度为 18~22℃ 的 OR2 培养液的培养皿（60 mm x 15 mm ) 中。OR2 培养液：82.5 mmol/L NaCl2.5 mmo
非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备实验实验
非洲爪蟾涂片的制备实验材料雌性非洲爪蟾 试剂、试剂盒OR2 培养液
非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备实验实验
实验材料 雌性非洲爪蟾 试剂、试剂盒 OR2 培养液 “5:1” 分离液 分散剂
世界首篇非洲爪蟾环状RNA研究成果发表！
作为最新的明星分子，环状RNA的热度与日俱增。环状RNA到底火到了什么程度？从云序客户捷报频传﹑研究成果不断就可见一斑：上期我们刚刚介绍云序客户发表了世界首个小鼠脑创伤模型外泌体环状RNA的研究，整合了外泌体和环状RNA两大科研热点。在探索新物种的环状RNA研究上，云序客户此前更是先后发表了全世
世界首篇非洲爪蟾环状RNA研究成果发表！
作为最新的明星分子，环状RNA的热度与日俱增。环状RNA到底火到了什么程度？从云序客户捷报频传﹑研究成果不断就可见一斑：上期我们刚刚介绍云序客户发表了世界首个小鼠脑创伤模型外泌体环状RNA的研究，整合了外泌体和环状RNA两大科研热点。在探索新物种的环状RNA研究上，云序客户此前更是先后发表了全世
非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备实验实验
实验材料雌性非洲爪蟾试剂、试剂盒OR2 培养液“5:1” 分离液分散剂仪器、耗材培养皿实验步骤1. 从麻醉了的雌性非洲爪蟾中取一块卵巢，放在盛有温度为 18~22℃ 的 OR2 培养液的培养皿（60 mm x 15 mm ) 中。OR2 培养液：82.5 mmol/L NaCl2.5 mmol/L
关于体外翻译的基本介绍
体外翻译，有两种体外翻译的基本方法：以RNA为模板，或以DNA为模板（即偶联的转录/翻译）。RNA模板可以是总RNA、mRNA或体外合成的转录子。 有两种体外翻译的基本方法：以RNA为模板，或以DNA为模板（即偶联的转录/翻译）。RNA模板可以是总RNA、mRNA或体外合成的转录子。DNA模板
活体生理检测仪NMT验证NRT1.5的钾转运功能
2017年，中国农业大学的王毅教授课题组在植物科学领域的顶级期刊Plant Cell上发表了题为NRT1.5/NPF7.3 Functions as a Proton-Coupled H+/K+ Antiporter for K+ Loading into the Xylem in Arabidop
关于真核生物的基因调控—基因扩增的介绍
另一种改变基因数量而调节基因表达的方式称为基因扩增。基因扩增是细胞短期内大量产生出某一基因拷贝的一种非常手段。某些脊椎动物和昆虫的卵母细胞能够专一性地增加编码核糖体RNA的DNA(rDNA）序列。例如非洲爪蟾(Xenopus laevis）的卵母细胞中的rDNA的拷贝数可由平时的 1500急剧增
核纤层和富含核纤层组分的制备实验——爪蟾卵母细胞
实验材料卵巢试剂、试剂盒NaClKClMgSO4Ca（NO3）2CaCl2NaHCO3苯青霉素硫酸链霉素Na-HEPES仪器、耗材培养皿实验步骤卵母细胞收集和制备1. 从成熟的雌性非洲爪蟾取整个或部分卵巢，在含 88 mmol/L NaCl，1 mmol/L KCl，0.9 mmol/L MgSO4
3.1.3－合成－5＇加帽转录物
一些 RNA 转录物要求其 5＇末端有 m7 G(5＇)Ppp(5＇）G 帽子，它们在无细胞抽提物或在非洲爪蟾卵母细胞中才具有较高的翻译效率。也有报道表明具有甲基化帽子的转录物在体外剪切时具有较高的效率，并对核抽提物中的核酸酶具有更大的抗性试剂、试剂盒DEPC处理的水转录缓冲液lOOmmol LDT
Sapphire双模式多光谱成像系统扫描仪八个功能的应用
最近电视剧《三十而已》热播，里面顾佳的角色很受大家喜欢，她上得厅堂，下得厨房，能屈能伸，不卑不亢，有学识，有魄力，面对威胁很从容，打完架依然可以妆容精致、不慌不忙地戴上手表穿上高跟鞋，有条不紊，这女人太酷，小编也忍不住安利一下。但是这么完美的一个人，背后付出的努力可想而知，三十而已，她对待人生、对待
Sapphire双模式多光谱成像系统扫描仪八个功能的应用
最近电视剧《三十而已》热播，里面顾佳的角色很受大家喜欢，她上得厅堂，下得厨房，能屈能伸，不卑不亢，有学识，有魄力，面对威胁很从容，打完架依然可以妆容精致、不慌不忙地戴上手表穿上高跟鞋，有条不紊，这女人太酷，小编也忍不住安利一下。但是这么完美的一个人，背后付出的努力可想而知，三十而已，她对待人生、
非洲爪蟾立大功！戊型肝炎病毒感染机制助力新疗法开发
肝炎病毒一直是人类健康的大敌之一。在过去几十年中，人类在对抗甲肝、乙肝以及丙肝等多种肝炎过程中取得了极大成就。但是对于戊型肝炎目前尚没有一种对应的疗法被批准。而据世界卫生组织统计，每年全球有2000万人感染戊型肝炎病毒，这种病毒主要通过被污染的食物和水进行传播。这些患者绝大部分分布在东非和南非地
Science子刊匡延平团队发现命名了一种全新人类遗传疾病
上海交通大学医学院附属第九人民医院（上海九院）、西北妇女儿童医院、复旦生物医学研究院、复旦大学附属妇产科医院以及中科院神经所等机构的研究人员首次命名了一种全新的孟德尔遗传疾病（卵子死亡），并在培养细胞、非洲爪蟾卵母细胞、小鼠卵母细胞和利用一位患者（Q392*）的突变衍生的过表达工程小鼠等模型中深
Science：匡延平团队发现命名了一种全新的人类遗传疾病
上海交通大学医学院附属第九人民医院（上海九院）、西北妇女儿童医院、复旦生物医学研究院、复旦大学附属妇产科医院以及中科院神经所等机构的研究人员首次命名了一种全新的孟德尔遗传疾病（卵子死亡），并在培养细胞、非洲爪蟾卵母细胞、小鼠卵母细胞和利用一位患者（Q392*）的突变衍生的过表达工程小鼠等模型中深
体外翻译的基本方法和决定因素
有两种体外翻译的基本方法：以RNA为模板，或以DNA为模板（即偶联的转录/翻译）。RNA模板可以是总RNA、mRNA或体外合成的转录子。DNA模板可以是一个质粒，或一个PCR/RT-PCR产物，这个PCR/RT-PCR产物在转录启动子和翻译起点下游含有需要翻译的基因。选择哪一个体外翻译系统取决于许多