非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备实验实验

实验材料雌性非洲爪蟾试剂、试剂盒OR2 培养液“5:1” 分离液分散剂仪器、耗材培养皿实验步骤1. 从麻醉了的雌性非洲爪蟾中取一块卵巢,放在盛有温度为 18~22℃ 的 OR2 培养液的培养皿(60 mm x 15 mm ) 中。OR2 培养液:82.5 mmol/L NaCl2.5 mmol/L KCI1.0 mmol/L CaCl21.0 mmol/L MgCl21.0 mmol/L Na2HPO45.0 mmol/L HEPES2. 用珠宝镊子分离单个卵母细胞或一小堆卵母细胞并转移到一个新鲜的 OR2 培养皿中。在 18~22℃(不是在4℃)放 18~24 小时。这段时间结束的时候,几乎所有卵母细胞,其至最大的卵母细胞都有转录活跃的含有大量灯刷染色体环的染色体。前面所推荐的使用促性腺素对雌性非洲爪蟾进行预处理并不是必需的。3. 选一个直径 1.0~1.1 mm 的卵母细胞放在盛有“5:1”分离液的小培养皿 (35 mm x......阅读全文

非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备实验实验

非洲爪蟾涂片的制备实验材料雌性非洲爪蟾                                                          试剂、试剂盒OR2 培养液                                                            

非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备实验实验

            实验材料 雌性非洲爪蟾 试剂、试剂盒 OR2 培养液 “5:1” 分离液 分散剂

非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备实验实验

实验材料雌性非洲爪蟾试剂、试剂盒OR2 培养液“5:1” 分离液分散剂仪器、耗材培养皿实验步骤1. 从麻醉了的雌性非洲爪蟾中取一块卵巢,放在盛有温度为 18~22℃ 的 OR2 培养液的培养皿(60 mm x 15 mm ) 中。OR2 培养液:82.5 mmol/L NaCl2.5 mmol/L

非洲爪蟾生发泡内含物的涂布制备实验

实验材料 雌性非洲爪蟾试剂、试剂盒 OR2 培养液“5:1” 分离液分散剂仪器、耗材 培养皿实验步骤 1. 从麻醉了的雌性非洲爪蟾中取一块卵巢,放在盛有温度为 18~22℃ 的 OR2 培养液的培养皿(60 mm x 15 mm ) 中。OR2 培养液:82.5 mmol/L NaCl2.5 mmo

非洲爪蟾环状RNA研究成果

作为最新的明星分子,环状RNA的热度与日俱增。环状RNA到底火到了什么程度?从云序客户捷报频传﹑研究成果不断就可见一斑:上期我们刚刚介绍云序客户发表了世界首个小鼠脑创伤模型外泌体环状RNA的研究,整合了外泌体和环状RNA两大科研热点。在探索新物种的环状RNA研究上,云序客户此前更是先后发表了全世界第

细菌细胞的制备实验实验——细胞抽提物的制备

实验材料细胞试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材弗氏破碎器实验步骤1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为 2 μ

关于涂布平板法的实验方法—涂布平板的介绍

  平板接种培养 平板接种培养有混合平板培养法和涂布平板培养法两种方法。  (1)混合平板培养法 :将无菌平板编上10-7、10-8、10-9号码,每一号码设置三个重复,用无菌吸管按无菌操作要求吸取10-9稀释液各1ml放入编号10-9的3个平板中,同法吸取10-8稀释液各lml放入编号10-8的3

核纤层和富含核纤层组分的制备实验——爪蟾卵母细胞

实验材料卵巢试剂、试剂盒NaClKClMgSO4Ca(NO3)2CaCl2NaHCO3苯青霉素硫酸链霉素Na-HEPES仪器、耗材培养皿实验步骤卵母细胞收集和制备1. 从成熟的雌性非洲爪蟾取整个或部分卵巢,在含 88 mmol/L NaCl,1 mmol/L KCl,0.9 mmol/L MgSO4

核提取物的制备实验

            实验方法原理 通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析,是物理变化,可复原。对于特定的蛋白质,影响蛋白质盐析的主要因素:无机盐的种类、浓度、温度和PH值。

酵母提取物的制备实验

实验方法原理酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如French加压罐)、研磨(玻璃珠振荡)和酶裂解(如Zymolase)等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨,是最简便的方法之一。这对于小体积(如<1mL的)和数升体积都很有效。经相差显微镜检测,细胞破碎率一般>95%。实验材料新鲜培养的酵母细胞

核提取物的制备实验

实验材料 哺乳动物试剂、试剂盒 PBS低渗缓冲液低盐缓冲液透析缓冲液仪器、耗材 转子离心机电导计透析膜匀浆机离心管实验步骤 1a.  收集转瓶培养的细胞:将浓度为5~10×108细胞/l 的培养液用1 L 的塑料瓶1 850 g 离心20 min,将细胞收入50 ml 锥形离心管中(每管收2~3 L

酵母提取物的制备实验

实验方法原理 酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如French加压罐)、研磨(玻璃珠振荡)和酶裂解(如Zymolase)等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨,是最简便的方法之一。这对于小体积(如<1mL的)和数升体积都很有效。经相差显微镜检测,细胞破碎率一般>95%。实验材料 新鲜培养的酵母

酵母提取物的制备实验

基本方案             实验方法原理 酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如French加压罐)、研磨(玻璃珠振荡)和酶裂解(如Zymolase)等。本方案讨论

非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统

            实验材料 成年雌性非洲爪蟾 抑肽酶 tRNA 蛋白酶 K 仪器、耗材

核提取物的制备实验(一)

从培养细胞中分离的细胞核制备成的提取物在体外转录和mRNA加工中具有精确的功能,(1)纯化蛋白质(2)核提取物。实验方法原理通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析,是物理变化,可复原。对于特定的蛋白质,影响蛋白质盐析的主要因素

核提取物的制备实验(二)

从培养细胞中分离的细胞核制备成的提取物在体外转录和mRNA加工中具有精确的功能,(1)纯化蛋白质(2)核提取物。实验材料细胞核试剂、试剂盒KCl高盐缓冲液仪器、耗材透析膜离心机实验步骤1.  按基本方案中歩骤1~7操作。 2.  将细胞核悬液分成5等份。在冷室内不断搅拌,按如下方法在每份悬液中加入1

世界首篇非洲爪蟾环状RNA研究成果发表!

  作为最新的明星分子,环状RNA的热度与日俱增。环状RNA到底火到了什么程度?从云序客户捷报频传﹑研究成果不断就可见一斑:上期我们刚刚介绍云序客户发表了世界首个小鼠脑创伤模型外泌体环状RNA的研究,整合了外泌体和环状RNA两大科研热点。在探索新物种的环状RNA研究上,云序客户此前更是先后发表了全世

非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统(一)

实验材料 成年雌性非洲爪蟾抑肽酶tRNA蛋白酶 K仪器、耗材 离心机 冷室实验步骤 一、材料与设备(一) 非洲爪蟾卵母细胞提取物的制备1) 成年雌性非洲爪蟾:数只。2) 高盐的 ModifiededBarth、X(MBS): 每升溶液中补加 1.28 gNaCl, 以使其终浓度达到 llOmmol/

世界首篇非洲爪蟾环状RNA研究成果发表!

  作为最新的明星分子,环状RNA的热度与日俱增。环状RNA到底火到了什么程度?从云序客户捷报频传﹑研究成果不断就可见一斑:上期我们刚刚介绍云序客户发表了世界首个小鼠脑创伤模型外泌体环状RNA的研究,整合了外泌体和环状RNA两大科研热点。在探索新物种的环状RNA研究上,云序客户此前更是先后发表了全世

非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统(二)

(二)外源 mRNA 在非洲爪蟾卵母细胞提取物中的翻译1) 室温融化冻存的提取物,然后即置于冰上。2) 同时,应将用于翻译的 mRNA 分装于 0.5 ml 或 1.5 ml 离心管中,置于冰上3) 每 100ul 提取物应分別加入以下各成分:10ul 网织红细胞裂解液 S-100,1ul120

4.3-非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统

非洲爪蟾卵母细胞体外翻译系统由于具有转移定位、信号肽的切除和糖篇化的能力,因此对于绝大多数的外源性 mRNA 都具冇持续性的修饰加工能力。由于其膜的稳定性高,因此可使用蔗糖密度梯度离心或蛋白酶保护反应等方法分析转录产物的定位。实验材料成年雌性非洲爪蟾抑肽酶tRNA蛋白酶 K仪器、耗材离心机冷室实验步

实验室用热熔胶涂布贴合机

  实验室用热熔胶涂布贴合机/实验室熔胶涂布机/小型熔胶涂布机   机台电源:220(单相) VAC   机台功率:980 W   机台电机:25W 调速电机1:50比   涂布速度:最大3M m/min   涂布精度:0.01 mm   机台控温PID (K-type) 逻辑控制  

微生物固体培养实验——涂布法

实验材料细菌仪器、耗材涂布棒培养箱培养皿实验步骤一、实验准备 1.  涂布棒 (1)加热并弯曲一支直径4 mm 的玻璃管或巴斯德吸管制备涂布棒。(2)灭菌,将涂布棒的三角部分浸没于酒精中,从容器中取出后再通过灯焰,点燃其上的乙醇。 (3)待涂布棒上的火焰熄灭后,将其触碰无菌琼脂平板的表面使其冷却。 

实验室涂布机的安装原理介绍

   实验室涂布机是近些年发展起来的一种新兴实验室仪器;    它是电气控制和机械有机结合的成功创新,在涂布生产领域中它可大量节省原料,改进生产工艺技术;    关键是在实验的基础上极大程度上提高了涂布的重现性。    过去一般涂布实验中大多采用手工涂布,涂布不均匀,且总体效果差。    为

关于涂布平板法的实验原理和器材介绍

  一、涂布平板法的实验原理:  在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。  二、涂布平板法的实验器材:  1.活材料:苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)菌剂。  2.培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基  3.器材:90

实验室涂布机的安装原理介绍

   实验室涂布机是近些年发展起来的一种新兴实验室仪器;    它是电气控制和机械有机结合的成功创新,在涂布生产领域中它可大量节省原料,改进生产工艺技术;    关键是在实验的基础上极大程度上提高了涂布的重现性。    过去一般涂布实验中大多采用手工涂布,涂布不均匀,且总体效果差。    为

细菌细胞的制备实验实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基             实验材料

细菌细胞的制备实验实验

细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞                                                          试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液                        

培养细胞标记和裂解物的制备实验

实验材料 培养细胞试剂、试剂盒 DMEMHClTBSTris仪器、耗材 微量离心管Plexiglas盒吸头细胞刮子冷冻离心机实验步骤 1.  培养待标记的细胞至适当的生长期。 对于贴壁细胞: 2a.  吸去培养液,用37℃的含血清不加标记物的标记培养液洗尽残存的含磷酸盐培养液,吸尽该培养液。 3a.