poly（A）+RNA的制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 NaOH寡聚脱氧胸苷纤维素poly（A）样品缓冲液LiClEDTATE乙酸钠仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 先用10 ml 5 mol/l NaOH清洗硅化的层析柱，然后用水冲洗。2. 取0.5 g oligo（dT）纤维素干粉加1 ml 0.1 mol/l NaOH中，倒入柱内，以约10 ml 水冲洗。 3. 用10~20 ml 加样缓冲液平衡柱子，至流出液pH约7.5。 4 于70℃加热含2 mg 总RNA的水溶液10 min，再用10 mol/l LiCl调节溶液中LiCl至终浓度0.5 mol/l。 5. 加RNA溶液至oligo（dT）柱，并以1 ml poly（A）加样缓冲液洗涤，将流出液重新上柱2次以上。 6. 用2 ml 中度洗脱缓冲液洗柱子，用盛有2 ml......阅读全文
poly（A）+－RNA的制备实验
利用cND A微阵列技术可用于：（1）并行分析检测成千上万个基因的表达情况；（2）在新基因的发现、基因组功能的研究、疾病的预测和诊断、药物靶标的确定和药物毒性预测等多方面发挥着重要的作用。实验方法原理大多数的信使RNA（mRNA）都带有poly（A）尾，而结构RNA没有。使用本工作方案，可以将带po
poly（A）+－RNA的制备实验
实验方法原理 大多数的信使RNA（mRNA）都带有poly（A）尾，而结构RNA没有。使用本工作方案，可以将带poly（A）的RNA从rRNA和tRNA中分离出来。 实验材料
poly（A）+－RNA的制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 NaOH寡聚脱氧胸苷纤维素poly（A）样品缓冲液LiClEDTATE乙酸钠仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 先用10 ml 5 mol/l NaOH清洗硅化的层析柱，然后用水冲洗。2. 取0.5 g oligo（dT）纤维素干粉加1 ml 0.1 m
酵母菌RNA制备实验—poly（A）+法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤一、热酸酚方案（基本方案1）1. TES及酸酚溶液的体积增加到4 ml。2. 操作时使用50 ml 聚丙烯离心管。3. 将得到大约10 mg RNA。 二、玻璃珠方案（备择方案1）1. 将体积增加到15 ml
Poly(A)+RNA－Isolation
Eukaryotic messenger RNA (mRNA) can be separated from the other RNA species in a total RNA preparation by affinity chromatography by virtue of the
Poly（A）＋RNA的分离纯化
1） Poligo(dT)-纤维素层析法提取poly(A)+RNA装柱与填柱1. 取oligo(dT)-纤维素0.5～1.0 g，用0.1 mol/L NaOH重悬。2. 用oligo(dT)-纤维素（0.5～1.0 ml柱体积）灌注DEPC处理过的一次性柱子（或塞以无
批量层析方法筛选－poly－(A)+－RNA
当处理许多 RNA 样品或处理小量的哺乳动物总 RNA 时（
批量层析方法筛选－poly－(A)+－RNA
实验方法原理 当处理许多 RNA 样品或处理小量的哺乳动物总 RNA 时（
Purification－of－poly(A)+－RNA－fromnb
0. (Optional)Before using Oligotex-dT30, I recommend to wash Oligotex-dT30 to remove fine particle of latex. To wash the latex, transfer appropriate a
批量层析方法筛选－poly－(A)+－RNA
实验方法原理 当处理许多 RNA 样品或处理小量的哺乳动物总 RNA 时（
细菌RNA制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期，加入1/20体积终止缓冲液，置于冰上。2. 于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3.
细菌RNA制备实验
革兰氏阴性细菌中提取 革兰氏阳性细菌中提取 实验材料 RNA 试
植物RNA的制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 TELiCl无水乙醇乙酸钠氯仿仪器、耗材 匀浆器离心管离心机水浴锅实验步骤 1. 研钵和研棒先用液氮冷却，称出15 g 冻结植物组织于研钵中（加液氮保持冻结）。2. 用研棒磨成粉末，立即转移到一个盛有150 ml，研磨缓冲液和50 ml TLE缓冲液平衡酚的500
反义RNA的制备实验
实验材料 限制性内切核酸酶酶水解 模板 DNA 大肠杆菌 DNA 多聚酶 胰 DNaseⅠ 试剂、试剂盒
反义RNA的制备实验
RNA 也可以由线状 DNA 为模板，通过 RNA 聚合酶（如T3、T7 或 SP6 ) 在体外合成。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验材料限制性内切核酸酶酶水解模板 DNA大肠杆菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ试剂、试剂盒氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液转录缓冲液Tris-Cl盐
反义RNA的制备实验
实验材料 限制性内切核酸酶酶水解模板 DNA大肠杆菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ试剂、试剂盒 氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液转录缓冲液Tris-Cl盐酸亚精胺NaCl胎盘RNase抑制物牛血清白蛋白RNA聚合酶DEPC仪器、耗材 DNA合成仪琼脂糖凝胶电泳微量离心管实验步骤 一、化学合成的 RN
植物RNA的制备实验
酚/SDS法 实验材料 RNA 试剂、试剂盒
酵母菌RNA制备实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材 离心管离心机摇床实验步骤 1. 酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期（OD600=1.0）。 2. 将培养液转移到50 ml，离心管，于4℃，1 500 g 离心3 min。 3. 弃上清，菌体沉淀用1 ml 冰冷的水
植物RNA的制备实验——酚/SDS法
由于RNA的种类来源很多，因而提取制备方法各异，一般有苯酚法，去污剂法和盐酸胍法，其中苯酚法实验室最常用。组织匀浆后用苯酚处理离心，RNA即溶于上层被酚饱和的水相中，向水相加冷乙醇后， RNA即以白色絮状沉淀析出。此法较好除去DNA和蛋白质，且获得生物活性的RNA。实验材料RNA试剂、试剂盒TELi
oligo(dT)纤维素层析法提取poly(A)－+－RNA
实验方法原理 与 rRNA, 5SRNA, 5.8 SRNA 和 tRNA 相比，大多数真核生物的 mRNA 在其 3' 端带有 poly(A) 尾巴。因此，mRNA 能用 oligo(dT)-纤维素亲和层析法从细胞总 RNA 中分离 (Edmonds et al. 1971; Av
oligo(dT)纤维素层析法提取poly(A)－+－RNA
实验方法原理 与 rRNA, 5SRNA, 5.8 SRNA 和 tRNA 相比，大多数真核生物的 mRNA 在其 3' 端带有 poly(A) 尾巴。因此，mRNA 能用 oligo(dT)-纤维素亲和层析法从细胞总 RNA 中
Oligo(dT)纤维素层析分离Poly(A)+－RNA
Selection of Poly(A)+ RNA by Oligo(dT)-Cellulose ChromatographyJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, Austra
oligo(dT)纤维素层析法提取poly(A)－+－RNA
与 rRNA, 5SRNA, 5.8 SRNA 和 tRNA 相比，大多数真核生物的 mRNA 在其 3' 端带有 poly(A) 尾巴。因此，mRNA 能用 oligo(dT)-纤维素亲和层析法从细胞总 RNA 中分离 (Edmonds et al. 1971; Aviv and Lede
RNA的制备
来源于任何细胞的RNA都可以通过反转录酶的作用拷贝成双链DNA并克隆化，获得相应的于特定细胞来源的cDNA文库。因此，RNA制备的意义有两个方面 * 获得特定细胞来源的cDNA文库，克隆目的基因 * 分析基因的表达，阐明基因调控的特性，了解从基因转录产生RNA的结构，数量，水平及合成的速率抑制RNA
寡聚脱氧胸苷纤维素纯化带－poly(－A)+RNA
试剂、试剂盒 NaOH.寡聚脱氧胸苷 (oligo(dT) ] 纤维素DEPC 处理的水1X 加样缓冲液洗脱缓冲液 NaAc(pH5.2)乙醇 TE 缓冲液。。实验步骤 一 材料与设备1 ) 5 mol/L NaOH2 ) 寡聚脱氧胸苷 (oligo(dT) ] 纤维素3) DEPC 处理的水4)
寡聚脱氧胸苷纤维素纯化带－poly(－A)+RNA
试剂、试剂盒 NaOH.寡聚脱氧胸苷 (oligo(dT) ] 纤维素 DEPC 处理的水 1X 加样缓冲液 洗脱缓冲液 NaAc(pH5.2)
寡聚脱氧胸苷纤维素纯化带－poly(－A)+RNA
大多数哺乳动物的信使 RNA( mRNA) 都带冇 poly( A)+ 尾 ，使用本方案可以将带Poly ( A) +的 RNA 从总 RNA 中分离出來。试剂、试剂盒NaOH.寡聚脱氧胸苷 (oligo(dT) ] 纤维素DEPC 处理的水1X 加样缓冲液洗脱缓冲液NaAc(pH5.2)乙醇TE
RNA干涉实验——采用RNaseⅢ制备siRNA分子实验
实验方法原理首先在体外以长为 200~1000 bp 的 cDNA 为模板转录合成正义与反义的单链 RNA 分子，然后通过退火形成长的 dsRNA 分子，再用Diccr 核酸酶进行切割得到 siRNA 分子的混合物，通过纯化去除没有被切割的双链 RNA 分子和 DNA 模板以后，siRNA 分子就可
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
实验材料 石蜡包埋的组织样品 试剂、试剂盒 甲酰胺 消化缓冲液 乙醇 肝糖
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
实验材料 石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒 甲酰胺消化缓冲液乙醇肝糖异丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯仪器、耗材 微量离心管恒温箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂去离子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的水消化缓冲液（lmol/L 异硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巯基乙醇