分隔式自我复制（聚合酶和其他酶的定向进化的一个新...
分隔式自我复制（聚合酶和其他酶的定向进化的一个新方法）实验实验材料 E.coli 抑制菌株 TG1试剂、试剂盒 脱水四环素四甲基氯化铵CSR 油相仪器、耗材 TYE 平板磁力搅拌器实验步骤 下面的实验流程详细描述用 CSR 在 E.coli 中对 Taq 聚合酶突变体的筛选。这个方法保证在标准的 PCR 反应条件下，聚合酶突变体是有活性的。用来产生文库的方法是核苷酸类似物 [27] 和易错 PCR [28]，这里不再描述。引物 1 ( 5'-C A G G A A A C A G C T A T G A C A A A A A T C T A G A T A AC G AG G G C AA-3' ) 针对表达载体 pASK75 [29] 是特异的，用 XbaI 和 SalⅠ将 Taq 基因连接到载体 pASK75。引物 2（5&......阅读全文
分隔式自我复制（聚合酶和其他酶的定向进化的一个新...
分隔式自我复制（聚合酶和其他酶的定向进化的一个新方法）实验实验材料 E.coli 抑制菌株 TG1试剂、试剂盒 脱水四环素四甲基氯化铵CSR 油相仪器、耗材 TYE 平板磁力搅拌器实验步骤 下面的实验流程详细描述用 CSR 在 E.coli 中对 Taq 聚合酶突变体的筛选。这个方法保证在标准的
分隔式自我复制（聚合酶和其他酶的定向进化的
分隔式自我复制（聚合酶和其他酶的定向进化的一个新方法） 实验材料 E.coli 抑制菌株 TG1
分隔式自我复制实验
实验材料E.coli 抑制菌株 TG1试剂、试剂盒脱水四环素四甲基氯化铵CSR 油相仪器、耗材TYE 平板磁力搅拌器实验步骤下面的实验流程详细描述用 CSR 在 E.coli 中对 Taq 聚合酶突变体的筛选。这个方法保证在标准的 PCR 反应条件下，聚合酶突变体是有活性的。用来产生文库的方法是核苷
复制聚合酶的基本特性
中文名称复制聚合酶英文名称replication polymerase定 义编号：EC 2.7.7.7。大肠杆菌细胞内真正负责重新合成DNA的DNA聚合酶Ⅲ。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
复制聚合酶的基本信息
中文名称复制聚合酶英文名称replication polymerase定 义编号：EC 2.7.7.7。大肠杆菌细胞内真正负责重新合成DNA的DNA聚合酶Ⅲ。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
RNA的自我复制
进一步的研究还发现一些RNA病毒如R17、f2、MS2等，可以以RNA为模板直接复制新的RNA。这些病毒都属于最简单的类型。例如，MS2的RNA只含有大约350个核苷酸，仅编码三种蛋白质：外壳蛋白，附着蛋白（attachment protein，其功能主要是使病毒能附着于寄主细胞并进入其内部）、RN
DNA聚合酶与复制的保真性
DNA复制的保真性是遗传信息稳定传代的保证。生物体至少有3种机制实现保真性：①遵守严格的碱基配对规律；②5’—3’聚合酶活性中心对底物的选择，使核苷酸的错配率仅为10-4~10-5；③3’—5’外切酶活性中心在复制出错时的即时校对，使错配率降至10-6~10-8。
全球首个能自我复制的新冠疫苗获批
近日，日本批准了一种针对新冠病毒的自扩增RNA（saRNA）疫苗——ARCT-154。 据《自然》报道，该疫苗由美国创新RNA疗法研发公司Arcturus Therapeutics与澳大利亚生物技术公司CSL合作开发，是世界上第一种完全获批的saRNA疫苗。 saRNA是使用RNA研发新药和
全球首个！能自我复制的新冠疫苗获批
近日，日本批准了一种针对新冠病毒的自扩增RNA（saRNA）疫苗——ARCT-154。 据《自然》报道，该疫苗由美国创新RNA疗法研发公司Arcturus Therapeutics与澳大利亚生物技术公司CSL合作开发，是世界上第一种完全获批的saRNA疫苗。 saRNA是使用RNA研发新药
RNA的自我复制的方法介绍
进一步的研究还发现一些RNA病毒如R17、f2、MS2等，可以以RNA为模板直接复制新的RNA。这些病毒都属于最简单的类型。例如，MS2的RNA只含有大约350个核苷酸，仅编码三种蛋白质：外壳蛋白，附着蛋白（attachment protein，其功能主要是使病毒能附着于寄主细胞并进入其内部）、RN
关于RNA的自我复制的介绍
进一步的研究还发现一些RNA病毒如R17、f2、MS2等,可以以RNA为模板直接复制新的RNA。这些病毒都属于最简单的类型。例如,MS2的RNA只含有大约350个核苷酸,仅编码三种蛋白质：外壳蛋白,附着蛋白（attachment protein,其功能主要是使病毒能附着于寄主细胞并进入其内部）、
基因复制的其他功能
复制基因的另一个可能的命运是两个拷贝同样可以自由地积累退行性突变，只要任何一方突变造成的缺陷能由另一个拷贝补充，这种现象称为中性的“亚功能化”。这两个基因都不会丢失，因为它们现在都执行重要的非冗余功能，但最终都无法实现新功能。亚功能化可以通过中性过程发生，其中突变积累既没有害处也没有益处。但是，在某
聚合酶链[式]反应
中文名称聚合酶链[式]反应英文名称polymerase chain reaction;PCR定 义通过DNA互补双链解链、退火和聚合延伸的多次循环来扩增DNA特定序列的方法。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
聚合酶链[式]反应的定义
中文名称聚合酶链[式]反应英文名称polymerase chain reaction;PCR定 义通过DNA互补双链解链、退火和聚合延伸的多次循环来扩增DNA特定序列的方法。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
关于聚合酶连式反应的简介
聚合酶链式反应(polymerase chain reaction PCR) 又称为无细胞克隆系统或特异性DNA 序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。PCR 是利用单链寡核苷酸引物对特异DNA 片段进行体外快速扩增的一种方法。该反应是一个指数式反应，可在短时间内使极微量的目
新技术修正30亿年来的遗传错误，大大提高测序精度
DNA聚合酶将DNA复制成相同的新链DNA，逆转录酶将RNA复制成DNA，与DNA聚合酶不同，大多数逆转录酶属于古老进化起源的单一蛋白家族，这些酶本身很容易出现错误，因为它们缺乏一个校对区域（3′ -5′核酸外切酶），由于没有校对功能，RNA复制产物中的错误无法被检测到。因而30亿年来，人体RN
遗传错误修正技术使得测序精准度大幅度提高
DNA聚合酶将DNA复制成相同的新链DNA，逆转录酶将RNA复制成DNA，与DNA聚合酶不同，大多数逆转录酶属于古老进化起源的单一蛋白家族，这些酶本身很容易出现错误，因为它们缺乏一个校对区域（3′- 5′核酸外切酶），由于没有校对功能，RNA复制产物中的错误无法被检测到。因而30亿年来，人
复制酶的来源和特性介绍
是从感染RNA型噬菌体或癌病毒的细胞分离出来的。(一)一种依赖于RNA的RNA聚合酶。以RNA为模板，由RNA聚合酶催化核苷5'-三磷酸合成RNA。(二)在DNA复制时与新生DNA链延长有关的酶。原核细胞复制酶包括DNA聚合酶I，Ⅱ和DNA聚合酶III全酶。DNA聚合酶III全酶是体内DNA
何谓巢式聚合酶链反应？
巢式聚合酶链反应(nested polymearse chain reaction, nPCR)也称套式PCR。在这种技术中，首先用一对外引物进行第1轮PCR，然后再使用第1对引物扩增的DNA序列内部的一对引物再次扩增，所以称为巢式PCR。由于使用了两对引物并且进行了两轮扩增反应，因此试验的
DNA聚合酶的用途和缺陷
用途聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶扩增的PCR产物，3’末端总是带有1个非模板依赖型的突出碱基，而这个碱基几乎总是A，因为Taq酶对dATP具有优先聚合活性，故可用T载体克隆。缺点无3’→5’阅读校正功能，在PCR扩增过程可引起错配，30次循环
可自我复制的活体机器人问世
从萌芽植物到有性动物再到入侵病毒等，在数十亿年的时间里，生物体已经进化出多种复制方式。现在，美国佛蒙特大学、塔夫茨大学和哈佛大学威斯生物启发工程研究所(以下简称威斯研究所)的科学家发现了一种全新的生物复制形式——在运动中产生后代，并将这一发现应用于创造有史以来第一个可自我复制的活体机器人。 这
关于聚合酶链反应引物的量和TaqDNA聚合酶的量的介绍
（一）引物的量 引物在PCR反应中的浓度一般在0.1～1μmol/L之间。浓度过高易形成引物二聚体且产生非特异性产物。一般来说用低浓度引物经济、特异，但浓度过低，不足以完成30个循环的扩增反应，则会降低PCR的产率。 （二）TaqDNA聚合酶的量 典型PCR反应混合物中，所用酶浓度为2.5
关于聚合酶连式反应的操作体系介绍
(1)模板:其中包含有目的基因片段，PCR反应的模板是待检测核酸(DNA或RNA)分子，双链DNA可直接用于反 应，而RNA则需要用反转录酶反转录成为cDNA,然后用作聚合酶反应的模板。 (2)DNA聚合酶:最初的聚合酶链反应是用DNA聚合酶I的Klenow片段或T4DNA聚合酶催化的。但是由
聚合酶链反应的用途和特性
PCR反应扩增出了高的拷贝数，下一步检测就成了关键。荧光素（溴化乙锭，EB）染色凝胶电泳是最常用的检测手段。电泳法检测特异性是不太高的，因此引物两聚体等非特异性的杂交体很容易引起误判。但因为其简捷易行，成为了主流检测方法。近年来以荧光探针为代表的检测方法，有逐渐取代电泳法的趋势。
DNA聚合酶的特性、用途和缺点
特性良好的热稳定性;70℃ 2h，残留90%活性;93℃ 2h，残留60%活性;94℃ 2h，残留40%活性。5'→3'聚合酶活性，对dATP有优先聚合活性;5'→3'外切酶活性;无3'→5'外切酶活性。用途聚合酶链反应(polymerase chai
滚环式复制的定义和应用特点
滚环式复制（rolling circle replication）是噬菌体中常见的DNA复制方式。许多病毒DNA的复制、质粒、F因子在接合（conjugation）转移时其DNA的复制，以及许多基因扩增时都采用这种方式。
病毒能欺骗宿主细胞实现自我复制
美国宾西法尼亚大学医学院研究人员表示，他们发现Kaposi肉瘤相关疱疹病毒（KSHV）能够欺骗受其感染的细胞完成病毒遗传物质复制。KSHV的这种复制手段能使其不被人体免疫系统察觉。过去，人们认为KSHV需要病毒蛋白质启动复制，新的研究结果显示病毒能够独立地从宿主细胞中获取蛋白质实现自我复制。
聚合酶的分类
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶；(2)依赖RNA的DNA聚合酶；(3)依赖DNA的RNA聚合酶；(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶，它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ，PolⅡ和PolⅢ等)；DNA
聚合酶的分类
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶；(2)依赖RNA的DNA聚合酶；(3)依赖DNA的RNA聚合酶；(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶，它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ，PolⅡ和PolⅢ等)；D
巢式聚合酶链反应的方法及应用介绍
中文名称巢式聚合酶链反应英文名称nested PCR定 义由两次相继进行的聚合酶链反应组成的一种PCR技术，其中第二次PCR是在第一次PCR反应产物序列范围内进行扩增的，借以提高PCR的成功率和分析的特异性。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）