二氢硫辛酰胺乙酰基转移酶实验

实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 Tris-HClCoA乙酰磷酸磷酸转乙酰酶DL-二氢硫辛酰胺仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30℃ 时,于 240 nm 处吸收值发生变化,需使用石英比色皿。注意事项 其他 试剂0.1 mol/L Tris-HCl,pH 7.60.01 mol/L CoA(游离酸,Mr=767.5,CoA·Li3,Mr=785.4;23 mg 溶于 3 ml 水中)1.0 mol/L 乙酰磷酸(LiK 盐,Mr=184.1;1.84 g 溶于 10 ml 水中)磷酸转乙酰酶(乙酰-CoA:正磷酸转乙酰酶,4000U/ml)0.2 mol/L DL-二氢硫辛酰胺(50 mg 溶于 1.25 ml 乙醇)。氧化型 DL-硫辛酰胺是可以购买到的(DL-6,8-硫辛酰胺,Mr=205.3),还原反应可以在 Reed 等(19......阅读全文

丙酮酸脱氢酶(硫辛酰胺)的测定实验

氰铁酸作为电子受体 二氯酚吲哚酚作为电子受体             实验方法原理 实验材料 酶样品

氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定

试剂、试剂盒 Tris-缓冲液 Tris 三硝基甲苯(Triton) CAT 稀释缓冲液CAT 酶标准物闪烁液 聚丙烯闪烁杯仪器、耗材 微量离心管微量离心机实验步骤 一、材料灭菌物品1. D-PBSA2. 多孔培养板:6 孔,35 mm非消毒物品1. Tris-缓冲液:Tris-HCl,0.1mol

丙酮酸脱氢酶(硫辛酰胺)的测定

实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 Tris-HClMgCl2丙酮酸二磷酸硫胺K3[Fe(CN)6]仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 时吸收值于 436 nm 处下降,吸收系数 ε436=755 l/(mo

DLAT基因的结构特点及主要作用

该基因编码多酶丙酮酸脱氢酶复合物(PDC)的组分E2PDC位于线粒体内膜,催化丙酮酸转化为乙酰辅酶A。该基因的蛋白质产物,二氢脂酰胺乙酰转移酶接受丙酮酸氧化脱羧基形成的乙酰基并将其转移到辅酶A。二氢硫酰胺乙酰转移酶是抗线粒体抗体的抗原。这些自身抗体存在于近95%的自身免疫性肝病原发性胆汁性肝硬化(P

什么是有机辅助因子?

有机辅助因子是指双成分酶中相对分子质量较小的有机化合物。它们在酶催化过程中起着传递电子、原子或基团的作用。(1)烟酰胺核苷酸(NAD+和NADP+) 烟酰胺是B族维生素的一员,烟酰胺核苷酸是许多脱氢酶的辅助因子,如乳酸脱氢酶、醇脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶等。起辅助因子作用的烟酰胺核苷酸主要

丙酮酸脱氢酶(硫辛酰胺)测定实验_氰铁酸为电子受体

实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HClMgCl2丙酮酸二磷酸硫胺K3[Fe(CN)6]仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 时吸收值于 436 nm 处下降,吸收系数 ε436=755 l/(mol·cm)。展开 注意

核磁共振氢谱实验(二)

点击: (or 键入指令 ↙)观察采样通道和氘锁通道,出现下图 2.3:图 2.3 观察采样通道和氘锁通道④:锁场点击: (or 键入指令 LOCK↙)锁定磁场,出现下图 2.4:图 2.4 溶剂选取对话框。选取 CDCL3(氘代氯仿)点击 OK。仪谱进行自动匀场。⑤: 探头调谐 注意事项

柠檬酸循环过程第二次脱氢的相关介绍

  在α-酮戊二酸脱氢酶系作用下,α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰-CoA、NADH·H+和CO₂,反应过程完全类似于丙酮酸脱氢酶系催化的氧化脱羧,属于α-氧化脱羧,氧化产生的能量中一部分储存于琥珀酰coa的高能硫酯键中。α-酮戊二酸脱氢酶系也由三个酶(α-酮戊二酸脱羧酶、硫辛酸琥珀酰基转移酶、二氢硫

DLAT基因突变与药物因子介绍

该基因编码多酶丙酮酸脱氢酶复合物(PDC)的组分E2PDC位于线粒体内膜,催化丙酮酸转化为乙酰辅酶A。该基因的蛋白质产物,二氢脂酰胺乙酰转移酶接受丙酮酸氧化脱羧基形成的乙酰基并将其转移到辅酶A。二氢硫酰胺乙酰转移酶是抗线粒体抗体的抗原。这些自身抗体存在于近95%的自身免疫性肝病原发性胆汁性肝硬化(P

DLAT基因编码功能及结构描述

该基因编码多酶丙酮酸脱氢酶复合物(PDC)的组分E2PDC位于线粒体内膜,催化丙酮酸转化为乙酰辅酶A。该基因的蛋白质产物,二氢脂酰胺乙酰转移酶接受丙酮酸氧化脱羧基形成的乙酰基并将其转移到辅酶A。二氢硫酰胺乙酰转移酶是抗线粒体抗体的抗原。这些自身抗体存在于近95%的自身免疫性肝病原发性胆汁性肝硬化(P

糖分解代谢异常是什么?

糖分解代谢途径先天代谢异常可有:1.丙酮酸激酶(PK)缺乏病成熟红细胞中不含线粒体,完全依赖糖酵解供能。在糖酵解过程中,丙酮酸激酶催化磷酸烯醇式丙酮酸医学。育网收集整理生成烯醇式丙酮酸,同时产生ATP,用于维持红细胞内外的离子梯度,特别是通过Na+-K+ATP酶维持细胞内外Na+-K+浓度梯度,以维

关于原发性乳酸酸中毒的病因分析

  引起儿童原发性乳酸性酸中毒的原因:  (一) 丙酮酸脱氢酶复合体缺乏症:  1.E1(丙酮酸脱羧酶)缺陷;  2.E2(二氢硫辛酰乙酰转移酶)缺陷;  3.E3(硫辛酰胺脱氢酶)缺陷;  4.丙酮酸脱羧酶磷酸酶缺陷。  (二)糖异生途径异常:  1.丙酮酸羧化酶缺陷;  2.单纯的丙酮酸羧化酶缺

维生素与酶的辅助因子的关系

从酶的组成来看,有些酶仅由蛋白质或核糖核酸组成,这种酶称为单成分酶。而有些酶除了蛋白质或核糖核酸以外,还需要有其他非生物大分子成分,这种酶称为双成分酶。蛋白类酶中的纯蛋白质部分称为酶蛋白。核酸类酶中的核糖核酸部分称为酶RNA。其他非生物大分子部分称为酶的辅助因子。双成分酶需要有辅助因子存在才具有催化

酶的辅助因子介绍

从酶的组成来看,有些酶仅由蛋白质或核糖核酸组成,这种酶称为单成分酶。而有些酶除了蛋白质或核糖核酸以外,还需要有其他非生物大分子成分,这种酶称为双成分酶。蛋白类酶中的纯蛋白质部分称为酶蛋白。核酸类酶中的核糖核酸部分称为酶RNA。其他非生物大分子部分称为酶的辅助因子。双成分酶需要有辅助因子存在才具有催化

关于三羧酸循环的循环过程

  乙酰-CoA进入由一连串反应构成的循环体系,被氧化生成H₂O和CO₂。由于这个循环反应开始于乙酰CoA与草酰乙酸(oxaloaceticacid)缩合生成的含有三个羧基的柠檬酸,因此称之为三羧酸循环或柠檬酸循环(citratecycle)。在三羧酸循环中,柠檬酸合成酶催化的反应是关键步骤,草酰乙

三羧酸循环的循环过程

乙酰-CoA进入由一连串反应构成的循环体系,被氧化生成H₂O和CO₂。由于这个循环反应开始于乙酰CoA与草酰乙酸(oxaloaceticacid)缩合生成的含有三个羧基的柠檬酸,因此称之为三羧酸循环或柠檬酸循环(citratecycle)。在三羧酸循环中,柠檬酸合成酶催化的反应是关键步骤,草酰乙酸的

三羧酸循环的循环过程介绍

乙酰-CoA进入由一连串反应构成的循环体系,被氧化生成H₂O和CO₂。由于这个循环反应开始于乙酰CoA与草酰乙酸(oxaloaceticacid)缩合生成的含有三个羧基的柠檬酸,因此称之为三羧酸循环或柠檬酸循环(citratecycle)。在三羧酸循环中,柠檬酸合成酶催化的反应是关键步骤,草酰乙酸的

柠檬酸循环的循环过程

乙酰-CoA进入由一连串反应构成的循环体系,被氧化生成H₂O和CO₂。由于这个循环反应开始于乙酰CoA与草酰乙酸(oxaloaceticacid)缩合生成的含有三个羧基的柠檬酸,因此称之为三羧酸循环或柠檬酸循环(citratecycle)。在三羧酸循环中,柠檬酸合成酶催化的反应是关键步骤,草酰乙酸的

简述二氢黄酮和二氢黄酮醇

  与黄酮和黄酮醇相比,其结构中C环C2-C3位双键被饱和,他们在植物体内常与相应的黄酮和黄酮醇共存。如甘草中的甘草素、橙皮中的橙皮苷均属于二氢黄酮类;满山红中的二氢槲皮素、桑枝中的二氢桑色素均属于二氢黄酮醇类。

冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂盒使用说明

主要用途冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂是一种旨在使用人工电子受体染料二甲基噻唑二苯基四唑嗅蓝(MTT),受到NADH心肌黄酶催化还原,产生不溶性蓝黑色色素沉淀,来分析冰冻组织样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于动物组织细胞的心肌黄酶活性定性

肝胆疾病的生物化学与实验诊断(三)

  (一)第一相反应  大多数毒物、药物等进入肝细胞后,常先进行氧化反应,有些可被水解,少数物质被还原。经过氧化、还原和水解作用,一般能使非极性的化合物产生带氧的极性基团,从而使其水溶性增加以便于排泄,同时也改变了药物或毒物分子原有的某些功能基团,或产生新的功能基团使毒物解毒或活化,使某些药物的药理

简述槭糖尿病的发病机制

  支链-α-酮酸脱氢酶缺失,导致体内支链-α-酮酸在体内蓄积产生的毒性反应。常染色体隐形遗传。  支链氨基酸在氨基转移后所形成的α-支链酮酸(KICKMVKⅣ)必须由线粒体中的支链α-酮酸脱氢酶进一步催化脱羧该酶是一个复合酶系统(BCKAD complex)由脱羧酶(E1包括E1αE1β两个亚单位

冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂盒使用说明

  冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂盒产品说明书(中文版)   主要用途   冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂是一种旨在使用人工电子受体染料二甲基噻唑二苯基四唑嗅蓝(MTT),受到NADH心肌黄酶催化还原,产生不溶性蓝黑色色素沉淀,来分析冰冻组织样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术

磷酸二氢钠

鉴别(1)本品的水溶液加碳酸钠即泡沸。(2)本品的水溶液显钠盐与磷酸盐的鉴别反应(通则0301)。性状本品为无色结晶或白色结晶性粉末;无臭;微有潮解性。本品在水中易溶,在乙醇中几乎不溶检查酸度取本品2.0g,加水40m1溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为4.1~4.5。溶液的澄清度与颜色取

蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 蛋白质 二甲亚胺

蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验

这种方法在各种交联反应中具有代表性,是最古老和最实用的方法之一。它可以使蛋白质间形成分子间桥梁,也可以令不同蛋白质相连。它更是研究蛋白亚基间作用的有效工具。交联程度取决于反应基团间距离和反应速度。通过控制交联反应时间可研究蛋白质聚合步骤,获得空间结构信息,还可获得许多链长不同的同源结合体,用于研究蛋

蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验

这种方法在各种交联反应中具有代表性,是最古老和最实用的方法之一。它可以使蛋白质间形成分子间桥梁,也可以令不同蛋白质相连。它更是研究蛋白亚基间作用的有效工具。交联程度取决于反应基团间距离和反应速度。通过控制交联反应时间可研究蛋白质聚合步骤,获得空间结构信息,还可获得许多链长不同的同源结合体,用于研究蛋

蛋白质与二甲基辛二亚酰胺的交联实验

实验方法原理 实验材料 蛋白质二甲亚胺试剂、试剂盒 三乙醇胺盐酸盐中性缓冲液实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」混合二甲亚胺溶液,终浓度为 1~12 mg/ml,蛋白质溶于 0.2 mol/L pH 8.5 的三乙醇胺盐酸盐中,浓度为 0.4~5 mg/ml,室温放置 3 h。用中性缓冲液透析。

二氢黄酮和二氢黄酮醇的概念差异

与黄酮和黄酮醇相比,其结构中C环C2-C3位双键被饱和,他们在植物体内常与相应的黄酮和黄酮醇共存。如甘草中的甘草素、橙皮中的橙皮苷均属于二氢黄酮类;满山红中的二氢槲皮素、桑枝中的二氢桑色素均属于二氢黄酮醇类。

丙二酰胺的用途

丙二胺用途广泛可用于选矿剂、金属钝化剂、作物保护剂、燃料油和润滑油添加剂、用于染料、电镀和分析试剂(汞、铜和银的检定),还可用作航空用树脂固化剂、橡胶硫化促进剂及生产1,2-丙二胺四乙酸作为抗癌药丙亚胺的中间体。丙二酰胺主要用于有机合成的原料,可以合成医药中间体、农药中间体等。