脂肪来源干细胞的取材与分离实验
实验方法原理 人和小鼠的脂肪组织均可用于分离ASC,可以获得相当数目的ASCs。人脂肪组织通常来源于抽脂。小鼠脂肪组织则取自腹股沟处脂肪垫。实验材料 小鼠 4〜6只试剂、试剂盒 Hank’s缓冲盐溶液(HBSS)ASC培养基胶原酶溶液聚乙烯吡咯酮碘溶液麻醉剂:三溴乙醇 37℃水浴仪器、耗材 Petris培养皿 9 cm离心管 50 ml组织培养瓶 25 cm2剪刀(2把)镊子(2把)实验步骤 (a)37℃水浴中预热HBSS和ASC培养基。(b)麻醉动物后处死。(c)转移动物至层流净化罩中。(d)70%酒精消毒腹部。(e)采用低位横向切口打开腹腔。(f)用镊子取出性腺/附睾和腹股沟处的脂肪垫。(g)将脂肪置于培养皿中,加入HBSS。(h)待所有动物脂肪取出后,将脂肪转移至新的培养皿中。(i)加人含有5%聚乙烯吡咯烷碘酮的HBSS 2〜3 min。(j)漂洗组织并用HBSS洗涤脂肪。(k)用无菌镊子将脂肪转移至50 ml离心管中。(......阅读全文
脂肪来源干细胞的取材与分离实验
从小鼠腹股沟脂肪垫获取ASCs实验方法原理人和小鼠的脂肪组织均可用于分离ASC,可以获得相当数目的ASCs。人脂肪组织通常来源于抽脂。小鼠脂肪组织则取自腹股沟处脂肪垫。实验材料小鼠 4〜6只试剂、试剂盒Hank’s缓冲盐溶液(HBSS) ASC培养基 胶原酶溶液 聚乙烯吡咯酮碘溶液 麻醉剂:三溴乙醇
脂肪来源干细胞的取材与分离实验
实验方法原理 人和小鼠的脂肪组织均可用于分离ASC,可以获得相当数目的ASCs。人脂肪组织通常来源于抽脂。小鼠脂肪组织则取自腹股沟处脂肪垫。实验材料 小鼠 4〜6只试剂、试剂盒 Hank’s缓冲盐溶液(HBSS)ASC培养基胶原酶溶液聚乙烯吡咯酮碘溶液麻醉剂:三溴乙醇 37℃水浴仪器、耗材 Petr
脂肪来源干细胞的取材与分离实验
从小鼠腹股沟脂肪垫获取ASCs实验方法原理人和小鼠的脂肪组织均可用于分离ASC,可以获得相当数目的ASCs。人脂肪组织通常来源于抽脂。小鼠脂肪组织则取自腹股沟处脂肪垫。实验材料小鼠 4〜6只试剂、试剂盒Hank’s缓冲盐溶液(HBSS)ASC培养基胶原酶溶液聚乙烯吡咯酮碘溶液麻醉剂:三溴乙醇 37℃
脂肪来源干细胞ASCs特征及分化实验—脂肪干细胞脂肪分化
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒脂肪诱导培养基脂肪细胞生长培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入脂肪诱导培养基,将培养瓶放回温箱。(d)三天后,将诱导培养基更换成脂肪细胞生长培养。注意事项其他培养基配方:成脂诱导培养基:DMEM/F12 1×、胎
脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验—脂肪干细胞骨分化
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒成骨诱导培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加人成骨诱导培养基,将培养瓶放回温箱。注意事项其他培养基配方:成骨诱导培养基:DMEM(高糖)1×、胎牛血清10%、β-甘油磷酸10 mmol/L、抗坏血酸-2-磷酸盐0.
脂肪来源干细胞ASCs特征及分化实验——脂肪干细胞软骨分化
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒成软骨诱导培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a) 吸去培养基(b) 加人PBSA润洗细胞。(c) 加人成软骨诱导培养基,将培养瓶放回温箱注意事项其他培养基配方:成软骨诱导培养基:DMEM(低糖)1×、丙酮酸钠110 mg/L、ITS+ 1%、抗坏血酸-2-磷酸盐0
脂肪来源干细胞ASCs特征及分化实验—脂肪干细胞神经分化
在培养过程中,ASCs 可在很长时间内保持未分化状态。ASCs 具有成纤维细胞样形态,胞内缺乏脂肪细胞中所见的脂滴。体外扩增后,ASCs 的表型会发生改变,主要体现在细胞表面蛋白和细胞因子表达的变化。ASCs 的表型与骨髓和骨骼肌来源的干细胞相似。免疫组化染色发现,诱导的 ASCs 可以表达神经细胞
脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验
脂肪干细胞的神经分化脂肪干细胞的脂肪分化脂肪干细胞的骨分化脂肪干细胞的软骨分化实验方法原理实验材料脂肪干细胞 试剂、试剂盒神经诱导
脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验
实验方法原理 实验材料 脂肪干细胞试剂、试剂盒 神经诱导培养基PBSA仪器、耗材 培养瓶实验步骤 (a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入神经诱导培养基,将培养瓶放回温箱其他 培养基配方:DMEM 1×、EtOH溶的丁基羟基苯乙醚36μg/ml(0.2 mol/L)、氯化钾5 m
脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验
脂肪干细胞的神经分化脂肪干细胞的脂肪分化脂肪干细胞的骨分化脂肪干细胞的软骨分化实验方法原理实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒神经诱导培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入神经诱导培养基,将培养瓶放回温箱其他培养基配方:DMEM 1×、EtOH溶的丁
小鼠脂肪间充质干细胞的原代取材
实验概要小鼠脂肪间充质干细胞的原代取材主要试剂含2% SP的DPBS、1 mg/mL胶原酶Ⅰ、间充质干细胞培养液主要设备眼科剪、眼科镊、摇床、400目细胞筛、15 mL离心管、3.5 cm培养皿实验步骤冰上预冷含2% SP的DPBS。断颈法处死小鼠,取出其腹部脂肪组织,用预冷的含2%SP(Pen S
脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源胚胎样干细胞分离
实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌培养基TPOFLK细胞因子混合物(10 ng mL促血小板生成素50 ng mL Flt-3配体和20 ng mL c-kit配体)ACD-A缓冲液小鼠抗人CD45CD33CD47单克隆抗体抗血型糖蛋白A抗体2%人丙种球蛋白(HAG。用P
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_从脐静脉分离干细胞
实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶培养基仪器、耗材导管实验步骤(a)在正常分娩后6〜12h内收集和处理脐带。(b)在脐静脉内插入导管,用PBSA完全地洗2次。(c)夹住远端脐带。(d)用0.1%胶原酶溶液充满静脉。(e)夹住近端脐带。(f)将脐带在37℃孵育20min。(g)轻轻按摩脐带,收集含有内皮和
脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源多能前体细胞分离
实验材料脐血来源的MNCs。试剂、试剂盒灭菌培养基0.05%胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材T25培养瓶实验步骤(a)分离和制备脐血来源的MNCs。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养,不需要其他分离步骤。(c)细胞复苏后在30 min内,用台盼蓝染色进行活细胞计数。(d)
脂肪酶的性质与来源
脂肪酶在生物体内的作用包括:消化分解外来的脂肪以便投过动物的细胞膜被充分吸收,该酶是动物体内脂肪储藏、动用的基础和前提,还能促进细胞内脂类的代谢过程。脂肪酶具体来说是由氨基酸和一条多肽链组成的,其自身的蛋白质结构直接关系着它的催化活性的能力。在油水界面的前提下,脂肪酶可以促进三酰甘油的水解,其水解产
脂肪酶的性质与来源
脂肪酶的性质与来源 脂肪酶在生物体内的作用包括:消化分解外来的脂肪以便投过动物的细胞膜被充分吸收,该酶是动物体内脂肪储藏、动用的基础和前提,还能促进细胞内脂类的代谢过程。脂肪酶具体来说是由氨基酸和一条多肽链组成的,其自身的蛋白质结构直接关系着它的催化活性的能力。在油水界面的前提下,脂肪酶可
关于脂肪干细胞实验的仪器与材料的介绍
倒置荧光显微镜(IX71, Olympus);数字彩色摄像系统(Sony3CCD);图像分析软件(Image-pro-plus);离心机(Z23, Herm 德国);Transwell (3450-clear, corning, Costar 美国);纯水机(Millipore-Q-Synthe
关于脂肪干细胞的分离和培养介绍
将脂肪组织冲净,称重后消化。当消化完成后,弃掉上层未消化的脂肪组织,将下层的细胞悬液以1500 r/min(375g),离心10 min 后弃上清,得到离心管底部的脂肪干细胞团,将其重悬,密度调整到1×105mL-1,然后接种在培养面积为25 cm2 的细胞培养瓶中。 当干细胞长满培养瓶后按一
脂肪间充质干细胞原代分离
实验概要本实验方法介绍了脂肪间充质干细胞原代分离所需试剂及操作流程。主要试剂所用试剂盒:小鼠脂肪干细胞分离和培养试剂盒 货号:MADS-000-001大鼠脂肪干细胞分离和培养试剂盒 货号:RADS-000-001兔子脂肪干细胞分离和培养试剂盒
实验室的干细胞的来源?
脐带、脐血、胎盘中的干细胞因其更年轻、原始、更大的分化潜能和多能性,其数量、种类也远远高于骨髓,因此具有更大的应用价值。新生儿附属物为医疗废弃物,来源绿色环保,采集方便,对新生儿和产妇均无损伤。同时也可以来自自体脂肪、骨髓、宫内膜和外周血等。
脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的原代培养
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基仪器、耗材组织培养瓶 25cm2实验步骤(a)待细胞贴壁生长2〜4天后换液。(b)换液时通过弃去培养基,从而去除未贴壁的细胞。(c)以后每周更换培养基2次。
反式脂肪的来源
反式脂肪的名字来源于他的化学结构,其分子包含位于碳原子相对两边的反向共价键结构,和“顺式脂肪”比较起来此反向分子结构较不易扭结。食物包装上一般食物标签 列出成份如称为“部分氢化植物油”、“氢化脂肪” 、“氢化菜油”、“固体菜油”、“酥油”、“人造酥油”、“雪白奶油”或“shortening”即含有反
皮肤干细胞的分离与鉴定
皮肤干细胞的分离 皮肤干细胞的分离主要利用发现的相对特异的表面标志(如整合素家族成员和角蛋白家族成员)结合流式细胞术进行。 皮肤干细胞的鉴定 利用皮肤干细胞一些相对特异的标志建立了一系列的皮肤干细胞鉴别方法。最初,一些学者是从研究细胞黏附特性入手的。他们发现,在表皮基底细胞定向分化时,它会
脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的传代培养
分离获得ASC后,可以通过连续传代使其生长和扩增。原代培养后,传代2〜3次,ASCs呈现单层,大而扁的细胞形态,其直径在25〜30μm。待细胞达到汇合时,它们形态上呈纺锤体形,类似于成纤维细胞。来源:《人干细胞培养》实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基PBSA胰蛋白酶仪器、耗材组织培养瓶 25
关于胰脂肪酶的来源与分布介绍
胰脂肪酶主要由胰腺腺泡细胞分泌,并在十二指肠中起到消化脂肪的作用,包括经典的甘油三酯脂酶(pancreatic triglyceride lipase,PTL)与其相关蛋白1(pancreatic lipase-related protein 1, PLRP1)和2(PLRP2)、胆盐刺激性脂酶
脂肪酶的来源
脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中。植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子,如蓖麻籽、油菜籽,当油料种子发芽时,脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类,提供种子生根发芽所必需的养料和能量;动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织,在肠液中含有少量的脂肪酶,用于补充胰脂肪酶对脂
胚胎干细胞的分离与培养
分离囊胚的内细胞群(ICM)细胞,再进行体外培养即可取得胚胎干细胞。目前,取得胚胎干细胞的方法已有一定改进,但仍无可避免地会杀死胚胎。囊胚由两大部分构成:处于外围的滋养层以及处于内部的内细胞群。滋养层细胞会分化为胚胎外的组织(胎盘等),而内细胞群则会分化为胚胎的各种结构。最早期分离胚胎干细胞的方法是
脂肪干细胞实验细胞培养的介绍
将吸脂来源的脂肪组织用D-Hanks 冲洗,去除残留的血细胞和组织碎片,把脂肪组织放入离心管中,记录原始体积。向组织中加入等体积的0.1%Ⅰ型胶原酶,放入37℃气浴振荡器中消化30 min。然后将消化好的组织静置5 min,待其分层后,用吸管吸取位于悬液上层的脂肪细胞,将含有脂肪细胞的悬液以10
脐带和脐血来源干细胞的培养实验
脐带和脐血的准备 从脐静脉分离干细胞 种植法从Wharton胶中分离干细胞 种植法从Wharton胶中分离干细胞 酶消化法从Wharton胶中分离干细胞
脂肪干细胞培养和扩增实验
脂肪干细胞的原代培养 脂肪干细胞的传代培养 实验方法原理 实验材料 脂肪干细胞