鸡胚分离实验

实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤 材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮氏培养皿 非灭菌材料孵化 10 天的受精卵70%乙醇棉签 孵箱(非 C02) 操作步骤1. 在湿润的环境中于 38.5℃:条件下孵卵,每天转动 180°,然鸡卵孵育也需要 20?21 天,但它们的发育阶段不同于鼠胚。分离整个胚胎进行细胞培养,需在大约第 8 天时进行。若分离器官则大约在第 10?13 天(在英国第 10 天是要许可证的最后期限)。2. 用 70% 乙醉棉签消毒鸡卵,钝端向上放于小烧杯内(图 12.4a)。3. 用无菌镊打破卵壳(图 12.4b), 剥离卵壳直到气旗的边缘(图 1......阅读全文

病毒的鸡胚培养法的注意事项有哪些

注意事项有:  (1)防止污染:接种全过程要求无菌操作。为减少污染,要求方法简单、操作迅速 。  (2)温度要适宜在室温较低 的冬季要采取保温措施才能进行鸡胚接种,以减少死亡。接种过的鸡胚,要根据所接种的病原体生长增殖所需要的温度,置温箱中孵育。1、接种前的准备(1)鸡胚的准备接种前用检卵灯观察鸡胚

衣原体培养基-鸡胚培养基的配制

[用途]培养增殖和分离鹦鹉热、性病淋巴肉芽肿和沙眼等衣原体。 [配法] 7日龄鸡胚3~5只。 精选产后10天内并10℃左右保存的受精鸡卵孵育,置38~39℃、相对湿度40%~60%的孵卵箱中孵育,4天后用检卵灯检视发育情况,挑出未受精及死亡者。生活鸡胚检视时可见清晰血管小团或花纹,其中有

微生物学技术:病毒的鸡胚培养

一、目的要求掌握鸡胚尿囊腔接种培养新城疫病毒的操作技术。二、器材1.鸡胚 应选用健康鸡群的受精蛋,接种鸡的鸡胚应无母源抗体,以免影响病毒在胚胎中的增殖。实验用的鸡胚多采用9—10日龄的活胚。2.接种材料 新城疫I系疫苗3.各种器械 孵卵器、照蛋箱、蛋架、打孔器、1ml结核菌素注射器、41/2号注射针

病毒的鸡胚培养法的注意事项有哪些

注意事项有:  (1)防止污染:接种全过程要求无菌操作。为减少污染,要求方法简单、操作迅速 。  (2)温度要适宜在室温较低 的冬季要采取保温措施才能进行鸡胚接种,以减少死亡。接种过的鸡胚,要根据所接种的病原体生长增殖所需要的温度,置温箱中孵育。1、接种前的准备(1)鸡胚的准备接种前用检卵灯观察鸡胚

简述人用狂犬病纯化疫苗(鸡胚细胞)的禁忌

  a) 暴露前免疫  对于患有需要治疗的急性病的个体建议暂不进行暴露前接种(预防接种)。  免疫接种后发生并发症者,在查明引起并发症的原因之前不应再接种此疫苗。  已知对本品中任一成分有过敏的人,禁忌使用本品。  b) 暴露后免疫  事实表明狂犬病是致命的,所以暴露后没有禁忌症(见“特殊预防的用法

关于人用狂犬病纯化疫苗(鸡胚细胞)的简介

  人用狂犬病纯化疫苗(鸡胚细胞),适应症为狂犬病的主动免疫。活性物质:灭活狂犬病毒  1小瓶含1 免疫剂量(1ml)的冻干疫苗粉末和溶剂,成分包括:  灭活狂犬病毒(Flury LEP毒株),效价 ≥2.5 IU.  培养系统:原代鸡胚成纤维细胞培养扩增  其他成分:  Tris- (羟甲基) -

鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF1)及操作规程

细胞介绍该细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株,自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养;传代直到衰老;在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满;不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增殖,说明这些细胞是永生化而没有转化。该细胞可作为病毒增殖、重

鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF1)及操作规程

  鸡胚成纤维细胞(UMNSAH/DF-1)   细胞介绍   该细胞是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株,自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养;传代直到衰老;在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满;不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增

使用人用狂犬病纯化疫苗(鸡胚细胞)的不良反应

  如果产生不良反应,特别是以下未提到的不良反应,应于医生或药师联系。  注射部位可能有轻微反应,如疼痛、红肿、肿胀或硬化。偶尔可能发生较严重的局部反应、发热、头疼、肌痛、淋巴结肿大、疲乏、关节炎、胃肠功能紊乱。罕见循环系统反应、出汗、寒战、感觉异常和过敏反应;这些反应在特殊情况下需要治疗(见“使用

鹦鹉热衣原体的细胞培养法介绍

  常见有两种方法,一种是利用HeLa229细胞或McCoy细胞等进行分离培养,另一种则是通过鸡胚卵黄囊接种培养,随后均经过姬姆萨染色或荧光染色,最终利用显微镜鉴定包涵体。  细胞分离培养一直被视为衣原体检测的标准方法。该法的敏感性显著高于鸡胚培养法,而且某标本接种细胞的盲传培养可提高分离率。衣原体

简述人用狂犬病纯化疫苗(鸡胚细胞)的药物相互作用

  接受免疫抑制治疗(减弱人体防御系统的治疗)的患者,或患有先天性或获得性免疫缺乏症的人,预防接种常减弱或效果不可靠(见“剂量和用法”)。  暴露于狂犬病后治疗期间应避免使用免疫抑制剂和抗疟药成分。  狂犬病免疫球蛋白只能按推荐剂量进行给药。其用量既不能超过也不能少于推荐剂量,也不能重复给药,因为这

生化培养箱对鸡胚背根神经节组织块的培养

 主要用于神经生长因子(NGF)等神经营养因子的生物活性测定。在差倒置显微镜下观察以神经突起的生长长度和密度为指标半定量评估NGF的活性。1、材料和方法(1)选正常受精的鸡蛋,置于37℃生化培养箱内孵化,每日翻动鸡蛋一次。(2)取孵化8-12 d 的鸡蛋, 用70% 酒精消毒蛋壳,从气室端敲开蛋壳,

新生大鼠、新生小鼠及鸡胚背根神经节分散细胞培养

   背根神经节(DRG)细胞起源于神经嵴,NGF Levi-Montalcini的实验表明,外原性NGF能刺激DRG细胞生长发育并形成广泛的神经网络。在体外,分离培养的神经节在NGF存在的情况下,神经突起的生长在一天之内可长达数毫米,因此,利用培养的DRG细胞,进行轴突生长发育的研究,是最为经典而

鸡胚胎成肌细胞的分离和培养实验——细胞培养物的制备

试剂、试剂盒HBSS胰酶溶液胶原溶液仪器、耗材解剖显微镜不锈钢深盘Dumom 5 号钳子柳叶刀精细弹簧剪纸巾大烧杯试管架移液管血细胞计数板实验步骤器材准备1. 在培养室实验台上放置下列物品:解剖显微镜表面和透射照明用的显微镜灯泡装有 70% 酒精的带盖不锈钢深盘Dumom 5 号钳子,至少两把柳叶刀

鸡血采集方法+血清分离和保存技术

第一、先用微火加热到50摄氏度左右用洁净的餐具装好制冷第二、用保鲜袋密封第三、保存致0摄氏度,结冰保存。以上步骤最多只能保存两周左右的时间,时间长了会变味。有点甜味和腥味。展开全部去鸡血,室温下放置,血清基本就可以自然析出了啊!也可以采集后放置离心机里直接离心就可以了啊!鸡血采集后加抗凝剂放在离心机

病毒的培养方法实验

实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1.  鸡胚的检查将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察

鸡卵类粘蛋白的实验流程

卵类粘蛋白的抽提(活力测定)→分子筛层析(凝胶预处理→装柱→平衡→上样→洗脱→收集蛋白峰→活力测定)→离子交换层析(活力测定)→透析→丙酮沉淀→离心(活力测定)

跳跃病的诊断方法

  单凭临床症状、病理变化和流行病学资料很难作出诊断,必须靠实验室诊断才能确诊。  1.标本采集  主要采取病山羊初次发热期的血液,濒死期的脑和脊髓作10%一20%病毒悬液分离标本。采急性发病期和恢复期双份血清做血清学诊断的标本。  2.病毒分离  经鸡胚绒尿膜和卵黄囊接种或乳鼠脑内接种做病毒分离。

中和试验(neutralization-tests)检测应用

病毒或毒素与相应的抗体结合后,失去对易感动物的致病力,谓之中和试验。本试验主要用于:(1)从待检血清中检出抗体,或从病料中检出病毒,从而诊断病毒性传染病;(2)用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型;(3)测定抗病毒血清或抗毒素效价;(4)新分离病毒的鉴定和分型,中和试验不仅可在易感的实验

跳跃病的病理变化及诊断方法

  病理变化  本病没有特征性病理变化。组织病理学检查可见弥漫性非化脓性脑炎。神经细胞,特别是小脑浦肯野氏细胞变性,血管周围出现单核细胞和少数多形核细胞构成的浸润灶—血管套。延脑和脊髓也有神经细胞变化,脑膜充血。  诊断方法  单凭临床症状、病理变化和流行病学资料很难作出诊断,必须靠实验室诊断才能确

农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验——幼胚的接种

实验材料幼胚盾片试剂、试剂盒Silwet农杆菌菌液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 幼胚盾片接种于侵染培养基后,从摇床上取出一管菌液(见注 9),向管中加入  60 μl 1%(V/V)的 Silwet,至终浓度为 0.015%。2. 完成 3.2 节的步骤 3 后,立即将离心管中所有的农杆菌菌液(4 

桑椹胚的胚泡形成过程

桑椹胚增殖、分裂,当卵裂球数达到100个左右时,细胞间开始出现小的腔隙,最后融合成一个大腔,桑椹胚细胞继续发育为胚泡腔。此时,实心的桑椹胚演变为中空的泡状,称胚泡( blastor-cyst)。胚泡壁为1层扁平细胞,称滋养层;腔内的一侧有一细胞团,称内细胞群( inner-cellmass)。覆盖在

新方法实现鸭胚肝脏原代细胞快速分离和培养

  近日,中国农业科学院饲料研究所科研人员研究创新了一种简单、快速的鸭胚肝脏原代细胞分离和培养方法,并研究了鸭胚肝脏原代细胞胆碱缺乏模型中的基因可变剪切,为鸭胆碱与基因结构的相关性研究提出了新的见解。相关研究结果发表于《动物生物科学》(Animal Bioscience)。  该研究从鸭胚日龄、分离

从鸡胗提取钙调蛋白实验

从鸡胗提取钙调蛋白实验             试剂、试剂盒 鸡胗 2-巯基乙醇 缓冲液 H(10X)

从鸡胗提取钙调蛋白实验

试剂、试剂盒 鸡胗2-巯基乙醇缓冲液 H(10X)仪器、耗材 聚丙烯烧杯匀浆器聚碳酸酯离心管超速离心机带刻度的聚丙烯量筒粗棉布聚丙烯漏斗实验步骤 材料与设备鸡胗(25 个;保存于-20°C)(如,Pel-Freez,Inc.)2-巯基乙醇(2-ME; 分子量 78.13Da; 密度 1.114)聚丙

从鸡胗提取钙调蛋白实验

试剂、试剂盒鸡胗2-巯基乙醇缓冲液 H(10X)仪器、耗材聚丙烯烧杯匀浆器聚碳酸酯离心管超速离心机带刻度的聚丙烯量筒粗棉布聚丙烯漏斗实验步骤材料与设备鸡胗(25 个;保存于-20°C)(如,Pel-Freez,Inc.)2-巯基乙醇(2-ME; 分子量 78.13Da; 密度 1.114)聚丙烯烧杯

细胞浸润生长性检测实验

实验方法原理 浸润性生长是细胞浸入或穿透其它组织增殖生长能力,浸润生长性检测是检测癌性细胞的一项有意义的指标。检测方法需用其它正常组织和癌细胞共同培养,观察癌细胞向正常组织浸润生长的情况。实验材料 鸡胚试剂、试剂盒 Bacto仪器、耗材 玻璃圈CO2温箱福尔马林实验步骤 常用鸡胚皮肤或心肌组织块,作

分离核仁实验——分离核仁

实验材料肝脏试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 制备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl

正粘病毒分离和鉴定

正粘病毒诊断 根据流感的典型临床症状及其高度的接触传染性、急性发作和迅速传播等特点,常可作出初步诊断。但为了弄清是由哪一型或哪一亚型病毒引起的,则必须进行实验诊断,即必须进行病毒分离和鉴定或作血清学检查,才能获得确诊,尤其是在首次发现疫情的地区。 (1)病毒的分离和鉴定 A.标本的采集和处理〓

细胞浸润生长性检测实验

            实验方法原理 浸润性生长是细胞浸入或穿透其它组织增殖生长能力,浸润生长性检测是检测癌性细胞的一项有意义的指标。检测方法需用其它正常组织和癌细胞共同培养,观察癌细胞向正常组织浸润生长的情况。