从实体组织中制备粗微体实验
实验材料 雄大鼠试剂、试剂盒 蔗糖蔗糖HM仪器、耗材 玻璃板实验步骤 1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠，大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝（6 g）大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体，所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液后，打开腹部和胸腔，切取肝，将它们放在盛有冰冷匀浆介质的烧杯中：匀浆介质（HM）：0.5 mol/L 蔗糖1 mmol/L DTT3. 用冰冷 HM 冲洗大鼠肝，将它们放在纸巾上，如果有结缔组织去掉之，迅速称重。4. 将肝放在干净的玻璃板上，用剃须刀片将其切成尽可能小的碎片，直到形成浆糊样稠状物。当肝在小烧杯里用剪刀剪碎时，不加HM 要容易些，因为 HM 妨碍剪切。5. 将切碎的肝放入盛有 4~5 倍体积冰冷 HM 的烧杯中，轻轻混旋，等碎片沉到底部后去掉液体以去除血液。6. 4 倍体积的 HM 在配套宽松的 Dounce 匀浆器......阅读全文
从实体组织中制备粗微体实验_从狗的胰脏中制备粗微体
实验材料胰脏试剂、试剂盒HM 缓冲液蔗糖-缓冲液三乙基氨基乙酸缓冲液实验步骤1. 从动物身体切下胰脏，立即用大约 50 ml 冷 HM 缓冲液冲洗，放置于干净的纸巾上，去除结缔组织：匀浆介质（HM）0.25 mol/L 蔗糖-缓冲液A缓冲液A：50 mmol/L 三乙基氨基乙酸缓冲液（TEA），pH
从实体组织中制备粗微体实验_从大鼠肝脏制备微体
实验材料雄大鼠试剂、试剂盒蔗糖蔗糖HM仪器、耗材玻璃板实验步骤1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠，大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝（6 g）大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体，所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液后，打开
从实体组织中制备粗微体实验
从大鼠肝脏制备微体从狗的胰脏中制备粗微体实验材料雄大鼠 试剂、试剂盒蔗糖
从实体组织中制备粗微体实验
从大鼠肝脏制备微体 从狗的胰脏中制备粗微体 实验材料 雄大鼠 试
从实体组织中制备粗微体实验
实验材料 雄大鼠试剂、试剂盒 蔗糖蔗糖HM仪器、耗材 玻璃板实验步骤 1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠，大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝（6 g）大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体，所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料细胞试剂、试剂盒环己酰亚胺匀浆缓冲液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 培养基中加入环己酰亚胺（溶于蒸馏水，贮存液浓度 0.1 mol/L，-20℃ 保存。如果不溶，试着加热到 40℃ 以帮助溶解）（终浓度 10 μmol/L)，37℃ 保温 5~10 分钟。2. 培养皿从 37℃ 转移到冷室，立
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料细胞 试剂、试剂盒环己酰亚胺 匀浆缓冲液
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料 细胞 试剂、试剂盒 环己酰亚胺 匀浆缓冲液
利用－Trizol－从植物组织中制备－RNA－实验
下述方案是经修改过的 Trizol 方案，用于从植物组织中分离 RNA，其中增加了一个高盐异丙酵沉淀步骤，以选择性地沉淀 RNA，而将多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态
利用－Trizol－从植物组织中制备－RNA－实验
实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态N2NaCl柠檬酸钠仪器、耗材 转子-定子均化器研钵和杵圆锥形管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇，70%，用焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的水配制DEPC 处
利用－Trizol－从植物组织中制备－RNA－实验
实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Trizol 氯仿 异丙醇 乙醇
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
实验材料 石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒 甲酰胺消化缓冲液乙醇肝糖异丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯仪器、耗材 微量离心管恒温箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂去离子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的水消化缓冲液（lmol/L 异硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巯基乙醇
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液（PMSF 在使用前添加），冰上放置。裂解缓冲液：0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液（RSB）0.25 mol/L 蔗糖（超级纯）10 mmol/ Tris-HCl (pH7
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
实验材料 石蜡包埋的组织样品 试剂、试剂盒 甲酰胺 消化缓冲液 乙醇 肝糖
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
该方案是由 Godfrey 等改进 Fisher 的方案发表的。此前已有从固定组织中纯化 RNA 的方案发表。Ambion 和 Roche 发明了从石蜡包埋的组织中纯化 RNA 的商品化试剂盒。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验材料石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒甲酰胺
细胞核连缀分析实验_从组织中制备细胞核
实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS蔗糖仪器、耗材电动匀浆器特氟隆研杵实验步骤一、用超速离心法从组织中分离细胞核1. 切下动物组织，放入置于冰上的平皿中，用冰冷的 PBS 冲洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液，用剪刀或剃须刀片将组织切碎，转入一个干净试管中，加蔗糖Ⅰ溶液至终体积为每克组织 10 ml。3. 用
从组织和培养细胞中制备轻线粒体组分
试剂和器材： 1. 匀浆介质：0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；2. 按要求向溶液加入蛋白酶抑制剂；3. 磷酸盐缓冲液；4. 低速冷冻离心机，配有30—40ml离心管的吊桶式离心转子；5. 高速离心机，配有30—40ml离心管
新鲜实体组织样本的制备（机械法）
剪碎法网搓法研磨法实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆，再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液；采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块，所以常与其他方法配合使用。实验材料组织
新鲜实体组织样本的制备（酶消化法）
实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面：① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等；② 可以水解组织间的黏多糖等物质；③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织酶仪器、耗材试管离心管尼龙网实验步骤1. 将适合于酶消化的组织置于离心管中。2. 将选好的酶溶掖 1~2 ml
新鲜实体组织样本的制备（酶消化法）
实验方法原理 对实体组织分散的作用原理主要有3个方面：① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等；② 可以水解组织间的黏多糖等物质；③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料 组织酶仪器、耗材 试管离心管尼龙网实验步骤 1. 将适合于酶消化的组织置于离心管中。2. 将选好的酶溶掖 1~
新鲜实体组织样本的制备（酶消化法）
实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面：① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等；② 可以水解组织间的黏多糖等物质；③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织
如何制备新鲜实体组织单细胞悬液
流式细胞术对细胞的各种参数分析必须基于单细胞的基础上，根据不同实体组织成分的特点可选择不同的分散细胞的方 法，以期达到单细胞产量高、细胞损伤小的目的。在实体组织分散为单细胞的过程中，解离的方法有可能瞬间或持久地影响细胞的性质，比如，形态上显而易见的细 胞膜破损，细胞表面上可出现泡状特征，还有一些是难
纯化RNA实验——从组织中纯化总RNA
实验材料组织试剂、试剂盒RNA 抽提缓冲液氯仿实验步骤1. 从动物取下组织，直接进行第 2 步或在液氮中快速冷冻新鲜解剖的组织。冷冻后的组织可以贮存在 -70℃。2. 组织（0.05~0.3 g）在 2.0 ml RNA 抽提缓冲液中匀浆。3. 每管加 200 μl 氯仿，混合均匀，冰浴 15 分钟
杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备
实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备
实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
新鲜实体组织样本的制备（机械法）——研磨法
实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆，再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液；采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块，所以常与其他方法配合使用。实验材料组织试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材研磨器尼龙网实
新鲜实体组织样本的制备（化学处理法）
实验方法原理化学处理法是将组织细胞间起黏着作用的钙、镁离子置换出来，从而使细胞分散开来。实验材料胰酶组织试剂、试剂盒EDTA仪器、耗材尼龙网实验步骤一、试剂的配制1. 0.2% EDTA 配制：称 EDTA 0.2 g，加入 Hank 液 100 ml，封装高压消毒。置 0~4℃ 保存。2. 胰酶加
新鲜实体组织样本的制备（化学处理法）
实验方法原理化学处理法是将组织细胞间起黏着作用的钙、镁离子置换出来，从而使细胞分散开来。实验材料胰酶 组织
利用－ConcertPlant－试剂从植物组织中纯化－RNA－实验
以下概述的是 ConcertPlant 试剂（Invitrogen) 所附带的方案。该方案不是以酚为基础的，但需要加氯仿。该试剂用于多种植物的组织中分离 RNA, 包括蓝叶云杉针、马铃薯块茎、玉米种子和棉花叶。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒