用PHA刺激淋巴细胞
实验材料 添加10%FBS的培养液或自体血清植物血凝素秋水仙酰胺试剂、试剂盒 KCl仪器、耗材 试管或普通容器显微镜下使用的载玻片实验步骤 1. 取在方案 27.1 中步骤 7 清洗的细胞,用 HEPES 或 CO2 缓冲的 DMEM、CMRL 1066 或添加 10 % 自体血清或 FBS 的 RPMI 1640 培养,细胞密度为 2×106 个/ml,培养深度为 1.5~2.0 cm。2. 按 5 μg/ml 终浓度加入 PHA,刺激有丝分裂 24~72 h。3. 分别在 24、36、48、60 和 72 h 收集细胞,制备涂片或离心制备细胞玻片,以确定最佳培养时间(即最大分裂指数)。4. 按 0.001 μg/ml 终浓度加人秋水仙酰胺(用 BSS 配制),处理 2 h。有丝分裂高峰的出现比在步骤 3 所观察到的提前 [ Berger, 1979 ]。5. 在秋水仙酰胺处理后,将细胞离心。然后,用 0.075 mol/L ......阅读全文
用-PHA-刺激淋巴细胞
实验材料 添加10%FBS的培养液或自体血清 植物血凝素 秋水仙酰胺 试剂、试剂盒 KCl
用-PHA-刺激淋巴细胞
实验材料 添加10%FBS的培养液或自体血清植物血凝素秋水仙酰胺试剂、试剂盒 KCl仪器、耗材 试管或普通容器显微镜下使用的载玻片实验步骤 1. 取在方案 27.1 中步骤 7 清洗的细胞,用 HEPES 或 CO2 缓冲的 DMEM、CMRL 1066 或添加 10 % 自体血清或 FBS 的 R
方案27.2-用-PHA-刺激淋巴细胞
实验材料 添加10%FBS的培养液或自体血清 植物血凝素 秋水仙酰胺 试剂、试剂盒 KCl
方案27.2-用-PHA-刺激淋巴细胞
实验材料添加10%FBS的培养液或自体血清植物血凝素秋水仙酰胺试剂、试剂盒KCl仪器、耗材试管或普通容器显微镜下使用的载玻片实验步骤1. 取在方案 27.1 中步骤 7 清洗的细胞,用 HEPES 或 CO2 缓冲的 DMEM、CMRL 1066 或添加 10 % 自体血清或 FBS 的 RPMI
什么是PHA淋巴细胞转化试验
PHA淋巴细胞转化试验 是 T淋巴细胞与有丝分裂原在体外共同培养时,受到后者的刺激可发生形态学和生物化学的变化,部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细胞,并进行有丝分裂的试验方法。
PHA淋巴细胞转化试验的临床意义
PHA淋巴细胞转化率下降,是细胞免疫功能降低的反应。此项检查,皮肤科多用于疾病分型(如麻风)、病情判断(如皮肤恶性肿瘤)、药物疗效观察,以及某些免疫缺陷性和变态反应性皮肤病的研究。 异常结果: 免疫功能降低引发的各种症状 需要检查的人群: 疑似麻风、皮肤恶性肿瘤症状的病人
PHA淋巴细胞转化试验的正常值
计数淋巴细胞200个,识别淋巴母细胞(超过正常淋巴细胞2-4倍,核膜清晰,核染质疏松而成细网状,核仁明显,胞浆丰富,呈嗜碱性)、过渡型淋巴细胞(体积变化不大,仅为上述明显核变化)、小淋巴细胞(体积稍大于红细胞,核染质致密,无核仁),统计其转化率。皮肤科转化率正常值大于58%。
PHA淋巴细胞转化试验的注意事项
1.培养基成分对转化率影响较大,注意其有效期。 2.小牛血清用前需灭活。 3.培养时要保证有足够的气体,一般10ml培养瓶内液体总量不要超过2ml。 4.PHA剂量过大对细胞有毒性,太小不足以刺激淋巴细胞转化,试验前应先测定PHA转化反应剂量。 5.实验中要严格无菌操作,防止污染。 不
PHA淋巴细胞转化试验的检查过程
操作方法: 1.取无菌肝素抗凝血0.lml,加入1.8ml细胞培养液中,同时加入1 000μg/m1 PHA 0.1m1,对照管不加PHA,将细胞置37℃、5%CO2培养3d,每天摇动1次。 2.培养结束时吸弃大部分上清液,加入8.5g/L NH4Cl 4ml混匀,置37℃水浴10min。
免疫学实验PHA淋巴细胞转化试验介绍
PHA淋巴细胞转化试验介绍: PHA淋巴细胞转化试验 是 T淋巴细胞与有丝分裂原在体外共同培养时,受到后者的刺激可发生形态学和生物化学的变化,部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细胞,并进行有丝分裂的试验方法。 PHA淋巴细胞转化试验正常值: 计数淋巴细胞200个,识别淋巴母细
临床化学检查方法介绍PHA淋巴细胞转化试验介绍
PHA淋巴细胞转化试验介绍: PHA淋巴细胞转化试验 是 T淋巴细胞与有丝分裂原在体外共同培养时,受到后者的刺激可发生形态学和生物化学的变化,部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细胞,并进行有丝分裂的试验方法。PHA淋巴细胞转化试验正常值: 计数淋巴细胞200个,识别淋巴母细胞(超过正常淋巴细胞2-4
PHA淋巴细胞转化试验的正常值及临床意义
正常值 计数淋巴细胞200个,识别淋巴母细胞(超过正常淋巴细胞2-4倍,核膜清晰,核染质疏松而成细网状,核仁明显,胞浆丰富,呈嗜碱性)、过渡型淋巴细胞(体积变化不大,仅为上述明显核变化)、小淋巴细胞(体积稍大于红细胞,核染质致密,无核仁),统计其转化率。皮肤科转化率正常值大于58%。 临床意
PHA淋巴细胞转化试验的注意事项及检查过程
注意事项 1.培养基成分对转化率影响较大,注意其有效期。 2.小牛血清用前需灭活。 3.培养时要保证有足够的气体,一般10ml培养瓶内液体总量不要超过2ml。 4.PHA剂量过大对细胞有毒性,太小不足以刺激淋巴细胞转化,试验前应先测定PHA转化反应剂量。 5.实验中要严格无菌操作,防止
PHA淋巴细胞转化试验的临床意义及注意事项
临床意义 PHA淋巴细胞转化率下降,是细胞免疫功能降低的反应。此项检查,皮肤科多用于疾病分型(如麻风)、病情判断(如皮肤恶性肿瘤)、药物疗效观察,以及某些免疫缺陷性和变态反应性皮肤病的研究。 异常结果: 免疫功能降低引发的各种症状 需要检查的人群: 疑似麻风、皮肤恶性肿瘤症状的病人 注意
淋巴细胞增殖功能的测定
淋巴细胞增殖和分化是机体免疫应答过程的一个重要阶段。因此,检测淋巴细胞增殖水平是细胞免疫研究和临床免疫功能检测的一种常用方法。 (一) 原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD
T淋巴细胞转化试验的注意事项
检测方法可分为3H-TdR掺入法、形态学法和MTT法等。 1、3H-TdR掺入法 T淋巴细胞受PHA或特异性抗原刺激后,发生有丝分裂,细胞进入S期,且伴随新的DNA合成,若此时加入氚标记的胸腺嘧啶核苷3H-TdR,则3H-TdR可被淋巴细胞作为合成DNA的原料摄入,根据3H-TdR的摄入量,可
淋巴细胞增殖功能的测定实验
淋巴细胞增殖和分化是机体免疫应答过程的一个重要阶段。因此,检测淋巴细胞增殖水平可用于(1)细胞免疫研究(2)临床免疫功能研究测定。实验方法原理T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、
淋巴细胞转化实验
淋巴细胞转化实验在临床上应用可用于(1)反映出受试者T细胞总体水平的应答功能,判断细胞免疫状态和探讨发病机制(2)选择适宜的移植供体(3)寻找迟发型变态反应的原因(4)估计疾病的疗效和预后。实验方法原理正常机体的T淋巴细胞在体外培养过程中受到特异性抗原或有丝分裂原刺激。可转化为淋巴母细胞。细胞免疫缺
淋巴细胞转化试验方法
T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)或特异性抗原刺激后,可出现代谢旺盛、蛋白质和核酸合成增加、细胞体积增大并能进行分裂的淋巴母细胞,此称为淋巴细胞转化现象。淋巴细胞转化率的高低,可以反映机体的细胞免疫水平,因此,可作为测定机体免疫功能的指标之一。本实验采用形态学方法进行淋
淋巴细胞增殖功能的测定实验
实验方法原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、抗CD3 McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖;而抗IgM、含葡萄球菌A蛋白的菌体(SAC)、脂多糖(LPS
T淋巴细胞转化试验的临床意义及注意事项
临床意义 1、T淋巴细胞在体外培养过程中受有丝分裂原刺激,可转化成为体积较大的母细胞。计数转化的细胞可反映机体的细胞免功能。 2、细胞免疫功能缺陷或低下者,其转化率可明显低于正常,如运动失调性毛细血管扩张症。此外,恶性肿瘤、霍奇金病、淋巴瘤、淋巴肉芽肿、重症真菌感染、重症结核转化率可低于正常
T淋巴细胞转化试验的详细介绍
样本要求 肝素抗凝血5ml,室温 参考值 形态学检测法:60.1%±7.6%。 3H-TdR渗入法:0~2%。 刺激指数(SI)>2为有意义。 临床意义 1、T淋巴细胞在体外培养过程中受有丝分裂原刺激,可转化成为体积较大的母细胞。计数转化的细胞可反映机体的细胞免功能。 2、细胞免疫功
淋巴细胞增殖功能的测定实验
实验方法原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、抗CD3 McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖;而
淋巴细胞增殖功能的测定实验
实验方法原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、抗CD3 McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖;而
淋巴细胞转化试验
实验方法原理 T、B细胞在抗原或有丝分裂原的刺激下可转化为淋巴母细胞,借此可了解淋巴细胞对异物刺激的反应性。仪器、耗材 试管吸管细胞培养物PHA瑞氏染液载玻片实验步骤 1. 取肝素抗凝血1~2毫升,用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞;2. 调整细胞浓度为2×106/毫升;3. 加PHA,使终浓度为1%;4
淋巴细胞转化试验
实验方法原理T、B细胞在抗原或有丝分裂原的刺激下可转化为淋巴母细胞,借此可了解淋巴细胞对异物刺激的反应性。仪器、耗材试管吸管细胞培养物PHA瑞氏染液载玻片实验步骤1. 取肝素抗凝血1~2毫升,用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞;2. 调整细胞浓度为2×106/毫升;3. 加PHA,使终浓度为1%;4. 5
细胞增殖检测:3HTdR渗入法原理和操作步骤
一、原理 T细胞、B细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生增殖。植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA),抗CD2、抗CD3McAb作为多克隆刺激剂可选择性地刺激T细胞增殖;而抗IgM、含葡萄球菌A蛋白的菌体(SAC)、脂多糖(LPS,对小鼠有
t细胞增殖试验的原理
又称T细胞转化试验。T细胞在体外经某种物质刺激,细胞代谢和形态相继变化,在24~48h细胞内蛋白质和核酸的合成增加,产生一系列增殖的变化,如细胞变化、细胞浆扩大、出现空泡、核仁明显、核染色质疏松等,由淋巴细胞转变为淋巴母细胞。因此,这种淋巴细胞增殖又叫淋巴细胞转化。据此可判断出淋巴细胞对有关刺激
人B淋巴细胞刺激因子(BAFF)ELISA试剂盒
人B淋巴细胞刺激因子(BAFF)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 BAFF(BAFF/BLyS/TNFSF13B) 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 BAFF与单抗结合,加入生物素化的抗人BAFF,形成免
小鼠B淋巴细胞刺激因子(BAFF)ELISA试剂盒
小鼠B淋巴细胞刺激因子(BAFF)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 BAFF(BAFF/BLyS/TNFSF13B) 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 BAFF与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠BAFF,