胶原酶解离组织实验
实验方法原理 切碎的组织放于含有胶原酶的完全培养基中孵育，组织分解后，通过离心去除胶原酶，高浓度接种、培养。实验材料 胶原酶DBSS仪器、耗材 培养基移液器皮氏平皿培养瓶离心管手术刀离心机实验步骤 1. 将组织移人新鲜、无菌的 DBSS 中，淸洗2. 转入另一培养皿（9 cm 皮氏平皿，非组织培养级別），切除多余组织，如脂肪或坏死组织。3. 将组织转移至第三个平皿中，用交叉的手术刀细切成大约 1 mm3 大小。4. 用 10~20 ml 广口移液管将组织移入 15 ml 或 25 ml 无菌离心管或常用的容器， 中（先用 DBSS 湿润移液管，否则组织块易贴壁）。5. 让组织块沉降。6. 用 DBSS 重悬清洗组织，组织块沉降后，去除上清液，重复此步骤两次以上。7. 将 20~30 个组织块接种于一个 25 cm2 的培养瓶中，另一瓶中接种 100~200 块。8. 吸净 DBSS，每瓶中加入 4.5 ml ......阅读全文
胶原酶的基本信息
胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase)，它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构，而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质，因此，它对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感，极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。
什么是胶原酶消化法
就是用胶原酶处理消化组织达到分离细胞的目的，所用胶原酶有不同类型：1、胶原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞，用于哺乳动细胞的分离。2、胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分，分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。3、胶原酶Ⅴ包含至少7种蛋白酶成分
什么是胶原酶消化法
就是用胶原酶处理消化组织达到分离细胞的目的，所用胶原酶有不同类型：1、胶原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞，用于哺乳动细胞的分离。2、胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分，分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。3、胶原酶Ⅴ包含至少7种蛋白酶成分
胶原酶的使用方法
1.将漂洗、修剪干净的组织剪成1~2mm3左右小块2.将组织块放入离心管（三角烧瓶）中加入30~50倍体积的胶原酶溶液，旋紧盖子（密封烧瓶）。3.将烧瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内，每隔3min振摇一次，如能放在37℃的恒温震荡水浴箱中则更好。消化时间与组织的类别有关，对于某些肿瘤组织或其他较致密
时空分辨单细胞测序技术中样本处理的一般流程
时空分辨单细胞测序技术中样本处理的一般流程示例，您可以根据具体实验需求和条件进行调整和优化：样本采集严格遵循临床操作规范，迅速且准确地采集目标样本，如肿瘤组织、血液、脑脊液等。记录样本采集的时间、部位、患者信息等详细数据。样本运输将采集的样本立即放入预冷的保存容器中，维持低温条件，尽快运输至实验室。
人体内源性胶原酶和药用胶原酶的功能对比
人体内源性胶原酶是指人体内部本身所具有的胶原酶，如牙龈、触膜等上皮组织和关节滑膜、椎间盘内都不同程度的存在着这种胶原酶，它在体内胶原蛋白的分解过程中发挥着不可或缺的作用。药用胶原酶是指利用生物制药的高科技手段从溶组织梭状芽孢杆菌的发酵液中提取、纯化并精制而得的白色或类白色无菌冻干粉针生物制剂。
如何优化胰蛋白酶的解离效果？
优化胰蛋白酶解离效果的方法：优化浓度和作用时间通过预实验确定最适的胰蛋白酶浓度和作用时间。可以设置一系列浓度梯度和时间梯度，观察细胞解离情况和细胞活力，找到最佳平衡点。控制温度和 pH保持反应体系在胰蛋白酶活性最佳的温度（约 37°C）和 pH 值（7.6 - 8.0）。可以使用恒温设备和适当的缓冲
人体活检组织实验
实验方法原理 与医院人员协商，提供已标记的装有培养基的容器，安排好从手术室或病理医生处取样品。仪器、耗材 样品管实验步骤 1. 提供含收集培养基的容器，标注明确，送进手术准备室或病理实验室。2. 做好准备，随时取材。3. 手术后装入收集容器，或派人收集后迅速送达，并告知确切的切取时间。4.
组织病理实验（二）
9. 展片、贴片打开水浴锅，使水温维持在40~45℃，另准备30%乙醇溶液。（1）切片时，将一碗30%乙醇溶液放于切片机旁的桌面上。（2）用小镊子夹取预先用刀片割开的蜡带，放在乙醇溶液的水面上，使切片展开。（3）小镊子轻轻地将连在一起的切片分开，用一个载玻片将切片完整，已展开的切片捞至温水中，使之
神经组织染色实验
实验方法原理 神经元细胞核周含有尼氏小体，在一定条件影响下或神经元受到损伤时，尼氏小体可减少或消失。常用 olszwski 法能够较好地显示尼氏小体。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 焦油紫乙酸钠蒸馏水冰醋酸二甲苯乙醇树胶实验步骤 焦油紫染色液：焦油紫 1 g，乙酸钠 2.2 g，蒸馏水 97 m
神经组织观察实验
1．观察神经元的结构特点及尼氏体的形态与分布。2．观察神经原纤维的形态与分布。3．观察突触的形态实验材料肋间肌脊髓灰质涂片脊髓横切片神经纵切及横切片神经纵切片肠系膜上的环层小体切片皮肤切片大脑皮质切片小脑皮质切片神经儿胞体突触有髓纤维运动终板仪器、耗材载玻片盖玻片眼科镊显微镜实验步骤一、材料和用具氯
组织病理实验（一）
实验方法原理 石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。实
神经组织观察实验
实验材料 肋间肌脊髓灰质涂片脊髓横切片神经纵切及横切片神经纵切片肠系膜上的环层小体切片皮肤切片大脑皮质切片小脑皮质切片神经儿胞体突触有髓纤维运动终板仪器、耗材 载玻片盖玻片眼科镊显微镜实验步骤 一、材料和用具氯化金法浸染的肋间肌。脊髓灰质涂片（Niss1染色）、脊髓横切片（Cajal银染色）、神经纵
组织的分离实验
机械分散法 胰蛋白酶消化消化分离法 胶原酶消化分离法 离心分离法 EDTA 消化分离法 试剂、试剂盒
组织的分离实验
试剂、试剂盒 Hanks仪器、耗材 镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤 一、切割分离法在进行组织块培养时，可采用剪切法，一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下：1. 无菌切取1 cm3组织一块，置入青霉素瓶或小烧杯中，左手斜持容器，右手持眼科尖剪或弯剪（剪柄较长为好）伸入容器中，反复剪切组
解离常数如何计算
解离常数(pKa)是水溶液中具有一定离解度的溶质的的极性参数。离解常数给予分子的酸性或碱性以定量的量度，Ka增大，对于质子给予体来说，其酸性增加；对于质子接受体来说，其碱性增加。pKa是Ka的负对数。Ka越大，pKa越小。pH=pK+lg（电子受体/电子供体）一元弱酸的解离平衡在一元弱酸HAc的水溶
解离常数如何计算
解离常数(pKa)是水溶液中具有一定离解度的溶质的的极性参数。离解常数给予分子的酸性或碱性以定量的量度，Ka增大，对于质子给予体来说，其酸性增加；对于质子接受体来说，其碱性增加。pKa是Ka的负对数。Ka越大，pKa越小。pH=pK+lg（电子受体/电子供体）一元弱酸的解离平衡在一元弱酸HAc的水溶
解离常数的意义
解离常数（pKa）是有机化合物非常重要的性质，决定化合物在介质中的存在形态，进而决定其溶解度、亲脂性、生物富集性以及毒性。对于药物分子，pKa还会影响其药代动力学和生物化学性质。 [2] 精确预测有机化合物的pKa值在环境化学、生物化学、药物化学以及药物开发等领域都有重要意义。
解离常数如何计算
解离常数(pKa)是水溶液中具有一定离解度的溶质的的极性参数。离解常数给予分子的酸性或碱性以定量的量度，Ka增大，对于质子给予体来说，其酸性增加；对于质子接受体来说，其碱性增加。pKa是Ka的负对数。Ka越大，pKa越小。pH=pK+lg（电子受体/电子供体）一元弱酸的解离平衡在一元弱酸HAc的水溶
解离常数的定义
解离常数（pKa）是水溶液中具有一定解离度的溶质的极性参数。解离常数给予分子的酸性或碱性以定量的量度，Ka增大，对于质子给予体来说，其酸性增加；Ka减小，对于质子接受体来说，其碱性增加。
什么是解离度
在化学中解离度（dissociation degree）是电解质达到解离平衡时已解离的分子数和原有分子数的比值，反映了电解质的解离程度。解离度常用希腊字母{\displaystyle \alpha }表示，它与范特霍夫系数{\displaystyle i}具有如下关系：{\displaystyle
为什么解离度与解离常数的关系是这样的
一、定义不同1、解离常数：解离常数（pKa）是水溶液中具有一定解离度的溶质的极性参数。2、解离平衡常数：对某一可逆反应，在一定温度下，无论反应物的起始浓度如何，反应达到平衡状态后，反应物与生成物浓度系数次方的比是一个常数，称为化学平衡常数。二、意义不同1、解离常数：解离常数（pKa）是有机化合物非常
胶原酶的作用和化学本质
胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase)，它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构，而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质，因此，它对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感，极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。
胶原酶的类型及消化类型
胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞专用胶原酶，要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。1、胶原酶Ⅰ用于上皮、肺，脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细 胞，用于哺乳动细胞的分离。2、胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分，分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。3
胶原酶的基本内容介绍
胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase)，它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构，而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质，因此，它对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感，极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。
实验动物组织标本的制备实验
实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物，禁食24 小时。击头致昏，以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔，取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧（或95%O2+5%CO2
细菌细胞的制备实验实验_将核糖体解离为大亚基/小亚基
实验材料核糖体试剂、试剂盒解离缓冲液贮存缓冲液实验步骤1. 通过将核糖体样品对解离缓冲液透析并用 7%~30% 的线性蔗糖梯度离心来将真细菌 70S 核糖体分离为 30S 和 50S 亚基。解离缓冲液：10 mmol/L Tris-HCl，pH 7.51 mmol/L MgOAc100 mmol/L
几招搞定原代细胞纯化方法
原代细胞分离的方法有多种，常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法，下面我们就介绍酶解聚方法获得纯化的原代细胞。（1）胰蛋白酶 纯化法●在去除不需要的组织后，使用无菌的解剖刀和剪子把剩余的组织切成3~4 mm小片，通过悬浮在无钙镁的平衡盐溶液中清洗组织碎片。让组织碎片沉淀，去除上清
细胞培养技术4
贴壁因子使用方法：①选择适宜的贴壁因子。②将贴壁因子贮存液用三蒸水或PBS液或D-Hanks液稀释成0．1毫克/毫升的工作液。③滤过除菌的工作液按50微升/平方厘米涂布培养器皿的细胞生长面。④室温静置5分钟(胶原基质延长24小时)。⑤除去多余溶液。⑥涂布面用灭菌三蒸水洗涤后，再经细胞培养基浸泡过渡，
组织病理实验_冰冻切片
组织病理实验广泛应用于生物学、解剖学、病理学、肿瘤学、法医学、临床诊断学等实验方法原理冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂，将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程，大大缩短了制片时间。同时，由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等