胶原酶解离组织实验
实验方法原理 切碎的组织放于含有胶原酶的完全培养基中孵育,组织分解后,通过离心去除胶原酶,高浓度接种、培养。实验材料 胶原酶DBSS仪器、耗材 培养基移液器皮氏平皿培养瓶离心管手术刀离心机实验步骤 1. 将组织移人新鲜、无菌的 DBSS 中,淸洗2. 转入另一培养皿(9 cm 皮氏平皿,非组织培养级別),切除多余组织,如脂肪或坏死组织。3. 将组织转移至第三个平皿中,用交叉的手术刀细切成大约 1 mm3 大小。4. 用 10~20 ml 广口移液管将组织移入 15 ml 或 25 ml 无菌离心管或常用的容器, 中(先用 DBSS 湿润移液管,否则组织块易贴壁)。5. 让组织块沉降。6. 用 DBSS 重悬清洗组织,组织块沉降后,去除上清液,重复此步骤两次以上。7. 将 20~30 个组织块接种于一个 25 cm2 的培养瓶中,另一瓶中接种 100~200 块。8. 吸净 DBSS,每瓶中加入 4.5 ml ......阅读全文
冻存活检组织实验
实验方法原理切取肿瘤,将肿瘤块浸于 DMSO,然后分量冻存于液氮中。实验材料活检标本试剂、试剂盒DBBS收集液二甲基亚砜仪器、耗材塑料冻存管解剖刀解剖镊培养皿实验步骤一、材料无菌 1. 活检标本 2. 1.2 ml 塑料冻存管(Nagle Nunc)3. DBBS4. 收集液5. 二甲基亚砜
植物成熟组织观察实验
实验方法原理1. 掌握植物各种成熟组织的形态、位置、结构及功能。 2. 了解不同组织间的相互联系,维管束的结构与类型,植物组织离析法。实验材料番薯叶片 楝树枝条
肌肉组织染色实验
实验方法原理 肌肉组织由肌细胞和肌纤维组成,带有横纹结构,通常选用 Mallory 磷钨酸-苏木精染色法(PTAH)显示横纹肌的变化情况。染色剂与所选择的组织成分能够牢固地结合,呈蓝色或棕红色。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 苏木精磷钨酸蒸馏水 高锰酸钾水溶液硫酸水溶液二甲苯乙醇中性树胶实验步骤
结缔组织染色实验
实验方法原理 胶原纤维是由胶原蛋白聚合与缠绕嫘旋排列而成的,具有双折光性,经过特殊染色后,能够在偏光显微镜下观察到四种不同型的胶原纤维。由于胶原纤维分子中含有碱性氨基酸,能够与酸性染料进行结合反应。常用丽春红-苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 丽春红 S 水
植物成熟组织观察实验
实验方法原理1. 掌握植物各种成熟组织的形态、位置、结构及功能。2. 了解不同组织间的相互联系,维管束的结构与类型,植物组织离析法。实验材料番薯叶片楝树枝条萝卜根尖马铃薯块茎横切片南瓜茎纵横切片椴树茎切片梨果实玉米茎横切片试剂、试剂盒蒸馏水番红间苯三酚盐酸仪器、耗材显微镜载玻片盖玻片镊子刀片纱布
结缔组织观察实验
1. 了解结缔组织的特点和分类。2. 掌握疏松结缔组织的纤维及各种细胞成分。3. 了解致密结缔组织、脂肪组织、软骨和骨的基本结构特点。实验材料大白鼠小白鼠试剂、试剂盒台盼蓝生理盐水溶液甘油瑞特染液仪器、耗材解剖器一套注射器及针头滴管载玻片盖玻片显微镜实验步骤一、材料和用具大白鼠或小白鼠。皮下结缔组织
植物组织的观察实验
[目的要求] 1.掌握植物细胞有丝分裂和减数分裂各时期的特征。 2.掌握植物分生组织和各种成熟组织的形态、位置、结构及功能。 3.学习简单地离析组织的方法。 [材料用品] 材料:蚕豆叶、烟草叶、玉米叶、小麦叶、水稻叶、椴树茎横切片
冻存活检组织实验
实验方法原理 切取肿瘤,将肿瘤块浸于 DMSO,然后分量冻存于液氮中。实验材料 活检标本试剂、试剂盒 DBBS收集液二甲基亚砜仪器、耗材 塑料冻存管解剖刀解剖镊培养皿实验步骤 一、材料无菌 1. 活检标本 2. 1.2 ml 塑料冻存管(Nagle Nunc)3. DBBS4. 收集液5. 二甲
解离常数的基本定义
pKa是一种特定类型的平衡常数。解离常数pKa是Ka的负对数。Ka越大,pKa越小。pH=pK+lg(质子受体/质子供体)以一元弱酸为例,其在水中的解离平衡式为:当向体积为 浓度为 的酸溶液加入体积为V浓度为 的强碱(如NaOH)溶液时,根据同离子效应,忽略弱酸电离出的 ,则溶液中的整理可得:
解离的概念和本质
解离是指化合物或分子在溶剂中释放出离子的过程。解离的程度可以用解离度K来表示。通常来说,解离是吸热反应。
解离常数的测定方法
电位滴定法电位滴定法是测定物质解离常数pK最常用的方法之一。以一元弱酸为例,其在水中的解离平衡式为:根据上式,将加入碱的体积V和测得的溶液pH代入后就能得到物质的pKa,通常将溶液pH对 作图就得到物质的pKa。因此,实验过程中只需记录一定温度下,累积加入碱的体积和每加入一定体积的碱后所测得的溶液p
解离的目的是什么
解离的目的是用药液溶解细胞间质,使组织细胞相互分离开。解离充分是实验成功的必备条件。解离的步骤:用刀片切下长约2到3毫米的根尖,放入盛有百分之十五盐酸和体积分数为百分之九十五的酒精溶液的混合液的培养皿中解离三到五分钟,使根尖组织的细胞相互分开,待根尖透明酥软即停止解离。解离是指化合物或分子在溶剂中释
醋酸解离常数怎么算
醋酸是一元弱酸,在水溶液中存在以下电离平衡:HAC==H++AC-在一定的温度下,这个过程很快达到了平衡,平衡常数的表达式为:K=[H+][AC-]/[HAC]此时,电离度 α%=[H+]/c式中 [H+]、[AC-]、[HAC]分别为H+、AC-、HAC的平衡浓度。严格地说,离子浓度应该用活度来代
肌组织细胞培养实验——神经组织细胞培养实验
实验方法原理神经组织主要由两种神经细胞(神经元)和神经胶质细胞组成。神经元为高度分化的细胞,在组织发生晚期已失掉增殖能力,对生存条件要求高,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或在加入神经生长因子(NGF)和胶质细胞因子时,才能生存,并可能出现一定程度的分化现象,如长出突起等,但却难使之增殖;即使
硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA蛋白质解离常数实验
利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合,该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合,如果蛋白质和核酸结合,那么该复合物也可以与硝酸纤维素滤膜结合,但是这种结合必须能够承受过滤压力,并且蛋白质在结合到硝酸纤维素滤膜上时还能够保持与核酸的结合。在本实验来源「RNA 实验指
硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA蛋白质解离常数实验
实验方法原理 利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合,该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合,如果蛋白质和核酸结合,那么该复合物也可以与硝酸纤维素滤膜结合,但是这种结合必须能够 承受过滤压力,并且蛋
硝酸纤维素滤膜结合实验确定RNA蛋白质解离常数实验
实验方法原理 利用硝酸纤维素滤膜结合可以测定蛋白与 DNA、RNA 间的结合,该方法的基础在于大多数蛋白可以与硝酸纤维素滤膜结合,如果蛋白质和核酸结合,那么该复合物也可以与硝酸纤维素滤膜结合,但是这种结合必须能够 承受过滤压力,并且蛋白质在结合到硝酸纤维素滤膜上时还能够保持与核酸的结合,
肌肉组织染色实验——早期心肌组织病变染色
实验方法原理早期心肌组织病变染色,是 Lie 和 Nagar-Olsen 利用缺氧心肌对酸性复红的亲和力,称为嗜酸性复红染色法;利用其对碱性复红的亲和力,称为亲碱性复红染色法。能够较好地显示心肌缺氧的变化情况。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒苏木精硫酸铝铵黄色氧化汞甘油冰醋酸蒸馏水碱性复红苦味酸纯丙
肌肉组织染色实验——横纹肌组织染色
肌肉组织由肌细胞和肌纤维组成,可分为骨骼肌、心肌和平滑肌。骨骼肌含有横纹,肌纤维被结缔组织连接与包围,纤维成束排列,而每条肌纤维周围含有网状纤维和少贵的结缔组织。心肌纤维也含有横纹,纤维之间相互连接成网状结构。平滑肌纤维的外表面含有网状纤维和胶原纤维成分。根据需要通过不同的特殊染色和组织化学方法,能
胶原酶消化用什么浓度edta终止
胶原酶消化用血清或者含血清的培养基终止。胶原酶一般浓度在百分之0.2左右,使用它来消化细胞时,注意它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶,而且不能被终和。终止是用血清蛋白,血清含有非特异性胰蛋白酶抑制剂。保存于负20度。
细胞分离技术
1. 从原代组织中分离细胞 将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,zui常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。 从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持zui大的活性。下列步骤可以解聚整个组织,获得较高产量的有活性细胞。 (1
细胞培养的基本方法细胞分离技术(一)
细胞分离技术一、从原代组织中分离细胞 将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织,获得较高产量的有活性细胞。1.胰蛋
详解离子色谱仪测定水中阴离子的实验流程
离子色谱仪的离子色谱是色谱法的一个分支,离子色谱法(IC)是利用被分离物质在离子交换树脂(固定相)上交换能力的不同,从而连续对共存多种阴离子或阳离子进行分离、定性和定量的方法。 阴阳离子的交换方程可以表示为: 阴离子交换:R+Y-+X-=R+X-+Y- 阳离子交换:R-Y++X+=R-X
从原代组织细胞和原培养容器分离细胞的技术
一、从原代组织中分离细胞 将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。 从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织,获得较高产量的有活性细胞。
植物组织水势的测定实验
实验方法原理水势表示水分的化学势。象电流是由高电位向低电位处移动一样,水从水势高处流向水势低处。植物体细胞之间以及植物体有环境间的水分移动方向都由水势差决定。当植物细胞或组织放在溶液中时,如果植物细胞的水势小于溶液的渗透势(溶质势),则组织吸水而使溶液浓度变大,反之,则植物细胞内水分外流而使溶液浓度
冰冻组织制备及切片实验
实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材 滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤 1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰冻,烧杯中加CryoKwik(或异戊烷)。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签,用镊子将样品放于另一端。 3.
冷冻组织切片的制作实验
实验试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇实验设备载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
冰冻组织制备及切片实验
实验材料冰冻组织试剂、试剂盒异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶(或敞口聚苯乙烯盒)中冰冻,烧杯中加CryoKwik(或异戊烷)。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签,用镊子将样品放于另一端。 3. 保证C
肌肉组织的观察实验
实验材料平滑肌、骨骼肌、心肌仪器、耗材载玻片盖玻片脱脂棉刺血针油镜用油显微镜。实验步骤平滑肌(一)平滑肌分离装片(H-E染色)的观察1.低倍镜观察 先用低倍镜寻找,找到平滑肌后换用高倍镜2.高倍镜观察 可见平滑肌纤维的整体形态。平滑肌纤维为长梭形,胞核长椭圆形,位于细胞的中部。在常规染色标本上肌原纤
植物成熟组织观察实验(四)
四、输导组织 1. 木质部中的输导组织取南瓜茎纵切片置低倍镜下观察,切片中央两侧有一些细胞壁被染成红色具有各种加厚花纹的成中管状细胞,它们是多种类型的导管(组织)。每个导管分子,均以端壁形成的穿孔相互连接,上下贯通。仔细观察,臂径较小,其壁具有螺旋形加厚并木质化的为螺纹导管,管径较大,具有网状加厚