刀豆球蛋白A(ConA)凝集实验
实验方法原理 刀豆球蛋白属凝集素:凝集素(Lectin)是一类可结合特定糖基的蛋白质。每个凝集素分子有两个以上的结合位点。癌细胞和转化细胞所需凝集素的浓度比正常细胞低,这可能与细胞表面凝集素受体分布有关;正常细胞分散,癌细胞较集中,结合性增强。实验材料 细胞试剂、试剂盒 PBSConA仪器、耗材 振荡器玻璃板实验步骤 1. 细胞悬液制备用pH7.4的磷酸缓冲液(PBS)制成每毫升含10×104 个细胞的悬液;2. ConA PBS用PBS配制成0.59 %的ConA液;3. 凝集试验向若干凹孔玻璃板凹中加细胞悬液,每凹加0.1 ml,再分别加入ConAPBS 0.1 ml,使ConA的最终浓度依次为:100、50、25、12.5 和零(对照) μg;4. 置微型振荡器上振荡5~10 分钟后,观察凝集现象。5. 结果如细胞悬液变成絮状物,说明已发生凝集;细胞凝集反应是测试......阅读全文
凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验
刀豆素 A 亲和柱纯化蛋白质 实验方法原理 用于亲和层析的凝集素应根据它们结合的特异性和紧密度加以选择。例如,刀豆素 A(Con A)与糖蛋白含有的葡萄糖
血球凝集和血球凝集抑制实验——微量血凝及血抑
实验材料新城鸡瘟病毒试剂、试剂盒抗鸡瘟病毒血清生理盐水仪器、耗材大孔塑料板小孔塑料板注射器实验步骤1. 滴定血凝效价:先用定量滴头按下表,第1孔加8滴,其余每孔加2滴,然后用大号螺旋圈吸满病毒液顺次稀释至第10孔。每孔加0.5%鸡血球2滴。下表内的单位为滴数。 2. 室温静置30~40分钟后肉
t细胞增殖试验的原理
又称T细胞转化试验。T细胞在体外经某种物质刺激,细胞代谢和形态相继变化,在24~48h细胞内蛋白质和核酸的合成增加,产生一系列增殖的变化,如细胞变化、细胞浆扩大、出现空泡、核仁明显、核染色质疏松等,由淋巴细胞转变为淋巴母细胞。因此,这种淋巴细胞增殖又叫淋巴细胞转化。据此可判断出淋巴细胞对有关刺激
IL1生物学活性检测实验——小鼠胸腺细胞增殖法
白细胞介素-1(IL-1)主要是由活化的单核-巨噬细胞合成和分泌的一种细胞因子,具有活化淋巴细胞、协同刺激胸腺细胞增殖、参与抗体产生和促炎症反应等多种生物学功能。IL-1有IL-1α和IL-1β构成,结合同种受体,表现相同的生物学活性。实验方法原理IL-1与小鼠胸腺细胞共同培养时,IL-1可刺激小鼠
关于刀豆的繁殖方法
用种子繁殖。于4月上旬清明前后播种,由于种皮坚硬,吸水慢,要先用水浸泡一昼夜后再播。按行距60厘米,窝距45厘米,深10厘米挖窝,每窝播种子3-4颗,施猪粪水后,盖火灰及细土约厚4厘米。不能使用人粪,因易烂种烂根。
淋巴细胞转化实验1
[实验原理] T淋巴细胞表面具有植物血凝素(PHA)和刀豆蛋白(ConA)等非特异性有丝分裂原受体,在体内或体外遇到有丝分裂原刺激后,可转化为淋巴母细胞,依其细胞转化程度可测定T细胞的应答功能,称为淋巴细胞转化试验。 淋巴母细胞的主要特点: (1)形态学改变:细胞体积明显增大
T淋巴细胞转化试验的概述
T淋巴细胞转化试验:体外培养时,T淋巴细胞在有丝分裂原如植物血凝素(PHA)或刀豆素A(CONA)的刺激下,代谢活跃,增加蛋白质、RNA和DNA的合成,从而转化为母细胞,部分细胞发生有丝分裂。从而反应T淋巴细胞的免疫功能。T淋巴细胞转化试验(T lymphocyte transformation
T淋巴细胞转化试验介绍
T淋巴细胞转化试验:体外培养时,T淋巴细胞在有丝分裂原如植物血凝素(PHA)或刀豆素A(CONA)的刺激下,代谢活跃,增加蛋白质、RNA和DNA的合成,从而转化为母细胞,部分细胞发生有丝分裂。从而反应T淋巴细胞的免疫功能。T淋巴细胞转化试验(T lymphocyte transformation
凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验
实验方法原理 用于亲和层析的凝集素应根据它们结合的特异性和紧密度加以选择。例如,刀豆素 A(Con A)与糖蛋白含有的葡萄糖或甘露糖结合,而麦芽凝集素只与具 N-乙酰葡糖胺的蛋白质结合。胞膜糖蛋白常与麦芽凝集素结合,而可溶性糖蛋白却通常用 Con A 或扁豆凝集素亲和柱纯化。由于在许多情
细胞增殖检测:3H同位素渗入实例
一、原理 淋巴细胞在有丝分裂原PHA、ConA 等的刺激下,产生增殖反应,DNA和RNA合成明显增加,如在培养液中加入3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR),则可被转化中的细胞摄入。测定标记淋巴细胞的放射强度可反映淋巴细胞增殖的程度。 二、仪器和材料 RPMI-1640 细胞培养液、小牛血清、2-巯
妊娠测定实验_间接凝集抑制法
实验方法原理将待测样品与己知抗体混合并作用一定时间后,再将其与相应抗原致敏的乳胶颗粒混合,如待测样品中含有相应抗原,便可与加入的抗体结合。当再加入致敏乳胶颗粒后,就没有相应的抗体与乳胶颗粒表面的抗原结合,因而就不出现凝集现象,此为乳胶凝集抑制反应,所以不发生凝集者为阳性,表明待测样品中含有相应抗原;
间接凝集抑制反应的实验应用
该试验用于检测抗体、自身抗体、变态反应抗体,也可检测抗原。
肥达反应实验_定量凝集试验
实验方法原理用已知的伤寒杆菌H,O抗原和甲,乙型副伤寒杆菌H抗原,与病人血清作定量凝集试验,以测定患者血清中有无相应抗体,根据抗体含量的多少及增长情况,可帮助诊断伤寒及副伤寒。实验步骤1. 取小试管28支,分四排置于试管架上,每排7支,于每排第一管分别标记H,O,PA,PB 符号。2. 于各管内
关于红细胞凝集实验的介绍
血凝及血凝抑制试验 有些病毒具有凝集某种(些)动物红细胞的能力,称为病毒的血凝,利用这种特性设计的试验称血球凝集(HA)试验,以此来推测被检材料中有无病毒存在,是非特异性的,但病毒的凝集红细胞的能力可被相应的特异性抗体所抑制,即血球凝集抑制(HI)试验,具有特异性。通过HA-HI试验,可用已知
冷凝集实验知识及操作步骤
一、概念与临床意义冷凝集实验主要用于由肺炎支原体引起的原发性非典型性肺炎的辅助诊断。参考值:凝集价≤1:32;临床意义:由肺炎支原体感染引起的原发性非典型性肺炎患者的血清中常含有较高的寒冷红细胞凝集素,简称冷凝集素,它能与患者自身红细胞或“O”型人红细胞于4℃条件下发生凝集,在37℃时又呈可逆性完全
凝集吸收实验原理、材料和方法
一、原理肠道杆菌中的许多细菌都有部分相同的抗原结构。因之一种细菌可与另一种细菌相应的抗血清发生交叉凝集反应。用一种过量的细菌抗原与发生交叉凝集反应的抗血清相结合。可将其共同抗体吸去,剩下抗体只能与特异性抗原起反应,这种实验即称凝集吸收实验。利用凝集吸收实验可制备单价因子血清,以进行细菌抗原结构的分析
肺炎支原体冷凝集实验
【原理】 原发性非典型性肺炎患者血清中常产生冷凝集素。冷凝集素是一种自身抗体,在寒冷(4℃)情况下,可与红细胞抗原起反应,一般可与O型人红细胞或自身红细胞发生凝集反应,可用于该病的辅助诊断。冷凝集反应具有可逆性,若将已凝集的红细胞再放回37℃时,凝集现象即消失。【材料】1、患者血清:切勿将血液放
细菌鉴定实验——玻片凝集反应
实验方法原理玻片凝集反应(slide agglutirlation)是将已知的抗体直接与未知的颗粒性抗原物质(如细菌,立克次体,钩端螺旋体等)混合,在有适当电解质存在的条件下,如两者对应便发生特异性结合而形成肉眼可见的凝集物,即为阳性:如两者不对应便无凝集物出现,即为阴性。此法属定性试验,主要用于细
刀豆氨酸的分布情况
刀豆氨酸并不是在数量和质量上、时间和空间上会均匀的分布于整个植株,在不同的生长发育时期,其分布也在发生变化,其浓度也在不断的变化。1978年,Bell报道了L-刀豆氨酸普遍存在于豆科的240属,1200种植物中。在一些豆科植物种子中L-刀豆氨酸含量极高[26~28]。In Doo Hwang等报道指
刀豆氨酸的测定方法
Fearon等于1955年发现Pentacyanoammonioferrate(PCAF)能与刀豆氨酸发生特异性显色反应,生成比较稳定的品红色。后来这就成了鉴定刀豆氨酸特异反应的一种方法。根据已报道的测定刀豆氨酸的方法,主要是运用PCAF与L-刀豆氨酸的特异反应[59]的光电比色法和HPLC法以及氨
刀豆氨酸的分布介绍
刀豆氨酸并不是在数量和质量上、时间和空间上会均匀的分布于整个植株,在不同的生长发育时期,其分布也在发生变化,其浓度也在不断的变化。1978年,Bell报道了L-刀豆氨酸普遍存在于豆科的240属,1200种植物中。在一些豆科植物种子中L-刀豆氨酸含量极高[26~28]。In Doo Hwang等报
关于刀豆氨酸的简介
刀豆氨酸,从刀豆(Canavalia ensiformis)中分离的氨基酸,按照消旋性,分为 L-刀豆氨酸(L-canavanine)和 D-刀豆氨酸(D-canavanine)。自然界常见的是 L-刀豆氨酸。 L-刀豆氨酸(L-2-氨基-4-胍氧基—丁酸),是广泛存在于豆科植物及其种子中的天
关于刀豆的形态特征介绍
缠绕草本,长达数米,无毛或稍被毛。 羽状复叶具3小叶,小叶卵形,长8-15厘米,宽(4-)8-12厘米,先端渐尖或具急尖的尖头,基部宽楔形,两面薄被微柔毛或近无毛,侧生小叶偏斜;叶柄常较小叶片为短;小叶柄长约7毫米,被毛。 总状花序具长总花梗,有花数朵生于总轴中部以上;花梗极短,生于花序轴隆
凝集素亲和层析法纯化蛋白质实验
凝集素是能可逆性结合碳水化合物的蛋白质。因为绝大多数凝集素至少每个分子有两个碳水化合物结合部位,所以它们可以沉淀糖蛋白和凝集细胞。凝集素也就可以用作糖蛋白的亲和配基,具有单糖的糖蛋白可用温和的蛋白质冼脱条件分离。虽然凝集素亲和层折没有很高的选择性,但是无疑它已成为蛋白质纯化的一种常用方法。它通常作为
凝集素显示糖类细胞化学实验
实验方法原理 实验材料 组织样品试剂、试剂盒 凝集素-胶体金探针锇酸实验步骤 1. 制备或购买凝集素-胶体金探针。2. 组织常规固定,游离细胞打散,组织切片切薄。3. 漂洗 3 次。4. 5~25 μg/ml 凝集素-胶体金 15~25℃ 孵育 30~60 min。5. 漂洗、锇酸固定同常规注意事项
染色体提前凝集标本制备实验
实验方法原理七十年代初,由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异性,所以在细胞融合和染色体技术的基础上,建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期(I期)细胞融合,从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染色体称提前凝集的染色体(PrematurelyConde
染色体提前凝集标本制备实验
基本实验实验方法原理七十年代初,由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子,它无种属特异性,所以在细胞融合和染色体技术的基础上,建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期(I期)细胞融合,从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染色体称提前凝集的染色体(PrematurelyC
冷凝集素的临床实验
1、一般认为,病毒和其他微生物感染产生的免疫反应的副产物中就有冷凝集素,但常人并不发生溶血。在慢性淋巴增生疾病、感染和肿瘤潜在发病的老年人中很可能突破常规,并出现单克隆抗体的特征(一般为K轻链或A轻链型)。2.冷凝集素效价增高主要见于原发性冷凝集素综合征,其时效价可高达1:1000以上,而轻度增高常
凝集素显示糖类细胞化学实验
凝集素(lectin)是一种无免疫原性糖蛋白,与糖的结合有一定专一性,如伴刀豆凝集素只与葡萄糖、甘露糖结合,麦胚凝集素只与 N-乙酰葡萄糖结合。并且,凝集素还可与标记物结合,如胶体金、辣根过氧化物酶等,因此可将作为检测糖基的一种简单而具有选择性的探针。不过由于糖类的复杂性以及凝集素特异的相对性,凝集
乳胶凝集试验的实验目的和原理
中文名称乳胶凝集试验英文名称latex agglutination test定 义以乳胶颗粒作为载体的一种间接凝集试验。即吸附可溶性抗原于其表面,特异性抗体与之结合后,可产生凝集反应。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)