铁蛋白免疫电镜实验

实验方法原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。实验材料 马脾铁蛋白试剂、试剂盒 硫酸铵硫酸镉双异氰酸镉二甲苯硼盐酸缓冲液硫酸铵液 PBS蒸馏水仪器、耗材 离心机显微镜微孔滤膜实验步骤 一、材料与试剂准备 1. 马脾铁蛋白 2. 硫酸铵 3. 硫酸镉 4. 双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC):以0.30 mol/L pH9.5硼酸盐缓冲液将XC配制成1%溶液。注意配制的水及容器必须特别清洁,配制后放置4℃数天,以不出现沉淀为准。如出现沉淀XC的多聚体形成,应重配。 5. 0.30 mol/L pH9.5硼盐酸缓冲液 6. 0.1 mol/L 硫酸铵液 7. &......阅读全文

酶免疫电镜技术

(一)  原理 酶免疫电镜技术是利用酶的高效率的催化作用对其底物的反应形成不同的电子密度,借助于电子显微镜观察,证明酶的存在,从而对抗原进行定位。(二)材料与试剂1.PBS液  取NaCl 8.5g,Na2HPO40.85g,KH2PO40.54g,加水至1 000ml即可。2.DAB溶液  取5m

酶免疫电镜试剂

  1.PBS液 取NaCl 8.5g,Na2HPO40.85g,KH2PO40.54g,加水至1 000ml即可。   2.DAB溶液 取5mgDAB(3、3二氨基联苯胺)加入10mlTris-HCl缓冲液(0.05mMol/L pH 7.6),加1%H2O20.5ml~1ml。配制时,避光进行

免疫细胞电镜技术

免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原 抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗

扫描免疫电镜技术

实验概要本文介绍了扫描免疫电镜技术的具体操作步骤,扫描免疫电镜技术可为研究细胞或组织表面的三维结构与抗原组成的关系提供可能性。实验原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集

扫描免疫电镜技术

实验概要本文介绍了扫描免疫电镜技术的具体操作步骤,扫描免疫电镜技术可为研究细胞或组织表面的三维结构与抗原组成的关系提供可能性。实验原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集

非标记抗体免疫电镜实验——快速法(琼脂扩散法)

实验方法原理标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响;结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合,影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素,通过一系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织

大鼠铁蛋白(Ferritin)酶联免疫分析

大鼠铁蛋白(Ferritin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,组织及相关液体样本中铁蛋白(Ferritin)的含量。实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠铁蛋白(Ferritin)水平。用纯化的大鼠铁蛋白(Ferri

免疫铁蛋白技术的技术特点

中文名称免疫铁蛋白技术英文名称immunoferritin technique定  义将抗体以共价键与铁蛋白连接,利用电子密度大的铁蛋白在电子显微镜下为相应的抗原定位提供标记的方法。铁蛋白也可以标记抗原或其他蛋白质。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

人铁蛋白(Ferritin)酶联免疫分析

人铁蛋白(Ferritin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中铁蛋白(Ferritin)的含量。实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人铁蛋白(Ferritin)水平。用纯化的人铁蛋白(Ferritin)

免疫铁蛋白技术的技术特点

中文名称免疫铁蛋白技术英文名称immunoferritin technique定  义将抗体以共价键与铁蛋白连接,利用电子密度大的铁蛋白在电子显微镜下为相应的抗原定位提供标记的方法。铁蛋白也可以标记抗原或其他蛋白质。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

非标记抗体免疫电镜

原理 标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响;结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合,影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素,通过一系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织中的抗

冷冻蚀刻免疫电镜技术

实验概要本文介绍了冷冻蚀刻免疫电镜技术,包括:冷冻蚀刻表面标记免疫电镜技术和断裂—标记免疫电镜技术。实验原理冷冻蚀刻法(Freeze Ftching),也称冷冻复型法(Freeze Replica)或冷冻切断(Freeze Fracture),是研究生物膜结构的重要方法之一。其主要步骤首先是

冷冻蚀刻免疫电镜技术

实验原理 冷冻蚀刻法(Freeze Ftching),也称冷冻复型法(Freeze Replica)或冷冻切断(Freeze Fracture),是研究生物膜结构的重要方法之一。其主要步骤首先是将样品在液氮中冷冻,然后放到真空喷镀仪中切断,切断后的切面上有细胞器,其间还有冻成洋的水分。再加热使冰升华

调节免疫功能的独特成分乳铁蛋白的实验室检测方法

2020年新型冠状病毒疫情发展牵动着亿万公众,国家卫健委发布的治疗指南明确指出了自身免疫康复的重要性。免疫力是人体自身的防御机制,是人体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等)、处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为,提高免疫力是人体识

免疫铁蛋白技术的定义和应用

中文名称免疫铁蛋白技术英文名称immunoferritin technique定  义将抗体以共价键与铁蛋白连接,利用电子密度大的铁蛋白在电子显微镜下为相应的抗原定位提供标记的方法。铁蛋白也可以标记抗原或其他蛋白质。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

免疫荧光和免疫电镜有何异同?

  相同点:两者都是应用免疫组织化学的原理,标记并检查组织中的目的蛋白(抗原)。  不同点:免疫荧光技术是用带有荧光的抗体去标记和检测目的蛋白(抗原),标记后用荧光显微镜观察。属于光镜、细胞水平的观测;免疫电镜技术,是使用带有过氧化物酶或金颗粒的抗体去标记组织中目的蛋白,进而制成电镜标本,最终用电子

断裂标记免疫电镜技术(2)

)超薄切片法步骤:①至⑤同临界点干燥法。⑥1%锇酸,室温固定2h,系列酒精或丙酮脱水,常规电镜包埋。⑦切半薄片,光镜定位合适的断裂部位,再切超薄切片,铀铅染色,透射电镜观察。断裂标记法目前文献报告应用较多的是植物凝集素-胶体金免疫标记技术,常用的如刀豆球蛋白(Con A)-- 胶体金免疫标记技术.C

非标记抗体免疫电镜技术

(一)  原理标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响;结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合,影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素,通过一系统的非标记抗体的免疫学反应,对组

断裂标记免疫电镜技术(1)

断裂-标记免疫电镜技术此法是先进行冷冻断裂,再做免疫标记,从而可以对断裂开的各种膜结构及胞浆断面进行标记。(1)临界点干燥法①固定:1.0%~2.5%戊二醛PBS液4℃1~2h,PBS冲洗3min×3。如为细胞悬液,可加入30%BSA后加入1%戊二醛,使BSA凝胶化,将凝胶切成2mm左右的小块,用3

免疫电镜(Immune-electron-microscopy)原理

(一)  原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结合,在电子

非标记抗体免疫电镜技术

一、原理 标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响;结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合,影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素,通过一系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织

免疫电镜术的定义

中文名称免疫电镜术英文名称immunoelectron microscopy;IEM定  义一种与免疫化学方法相结合的电镜法。样品先作免疫化学染色,再用电镜观察。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

免疫电镜原理和影响因素

(一) 原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结合,在电子显

免疫电镜(Immune-electron-microscopy)原理

(一)  原理 免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结合,在电

断裂—标记免疫电镜技术介绍

此法是先进行冷冻断裂,再做免疫标记,从而可以对断裂开的各种膜结构及胞浆断面进行标记。(1)临界点干燥法①固定:1.0%~2.5%戊二醛PBS液4℃1~2h,PBS冲洗3min×3。如为细胞悬液,可加入30%BSA后加入1%戊二醛,使BSA凝胶化,将凝胶切成2mm左右的小块,用30%的甘油—PBS浸透

免疫电镜术的定义

中文名称免疫电镜术英文名称immunoelectron microscopy;IEM定  义一种与免疫化学方法相结合的电镜法。样品先作免疫化学染色,再用电镜观察。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

病毒透射电镜病毒标本制备实验——免疫吸附法

实验方法原理有时由于病毒量少,用普通悬滴法在电镜下难以发现稀少散在的病毒粒子,则可用免疫吸附电镜法。主要是利用相应的病毒抗血清来吸附病毒,用本法检测病毒,快速、灵敏、特异性强,是可靠的电镜病毒诊断技术之一,也可用于病毒快速诊断。实验材料病毒试剂、试剂盒磷钨酸仪器、耗材透射电镜实验步骤将抗病毒血清分别

人乳铁蛋白(LT)酶联免疫分析(ELISA)

人乳铁蛋白(LT)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。药品名称:通用名:人乳铁蛋白(LF)酶联免疫分析试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中乳铁蛋白(LF)的含量。实验原理本试剂盒应用酶联免疫竞争法测定标本中人乳铁蛋白(LF)水平。用纯化的人乳铁蛋白

人转铁蛋白(TRF)酶联免疫分析(ELISA)

人转铁蛋白(TRF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中转铁蛋白(TRF)含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人转铁蛋白(TRF)水平。用纯化的人转铁蛋白(TRF)抗体包被微孔板,制成固相抗体

乳铁蛋白的酶联免疫法检测介绍

  酶联免疫法是一种基于抗原抗体特异性反应的检测方法,具有反应灵敏、特异性强等优点。在微孔板中包被抗乳铁蛋白抗体(一抗),加入目标物乳铁蛋白后,乳铁蛋白与一抗结合,再加入乳铁蛋白抗体(二抗)与之形成夹心结构,最后加入显色剂,利用酶标仪测定特定波长的吸光度值,其吸光度值与乳铁蛋白含量成正比,可绘制标准