酵母菌四分体的制备与剖分实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 酵母裂解酶山梨糖仪器、耗材 解剖显微镜解剖针实验步骤 1a. Glusulase酶处理：用无菌水洗涤孢子3次，再用5 ml 无菌水重悬并取30 μl 稀释在270 μl 无菌水中。在光学显徽镜下观察细胞，检测完整的子囊，加3 μl 稀释的Glusulase酶到孢子制备液中，用旋涡混合器轻轻振荡混匀，室温温育2 min，然后在显微镜下观察细胞，继续于室温温育，直到Glusulase酶处理完全。 1b. 酵母裝解酶-100T处理：细胞用50 μl 酵母裂解酶-100T溶液重悬。在光学显微镜 下观察完整的子囊。30℃温育10 min，沿试管壁缓缓地加入0.8 ml 无菌水。 2. 将消化管置于冰浴中，用接种环蘸取处理过的孢子在YPD剖分平板表面划两条平行线。3. 在解剖显微镜下观察倒置平板，可观察......阅读全文
酵母菌细胞密度检测实验
实验材料酵母菌仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 在培养基中细胞的密度可以通过分光光度计测定的菌液在600 nm 波长的光密度OD600值来放映。2. 要得到可靠的测量结果，菌液最好稀释到OD600值1以下，在这个范围内，毎0.1OD600相对于约3×105细胞/ml。如此推算，1OD600
酵母菌细胞融合实验
实验概要学习酵母菌原生质体制备和再生技术，为了解酵母菌为材料的外源基因转移等技术奠定基础。实验原理酵母菌如酿酒酵母，在遗传学和分子生物学的研究中有很大作用，尤其是近些年来，随着科技的进步，酵母菌的遗传操作如转化、基因克隆和外源基因在酵母受体中的表达等技术都有了突破性的进展。作为受体系统的酵母菌原生质
DYF30分体式液压拔轮器工作原理及其使用与注意事项
工作原理 DYF-30分体式液压拔轮器是以液压起动杆直接前进移动，故推动杆本身不作转动。钩爪座又可随螺纹直接作前进后退之调距，操作时只要把手前后小幅度摆动，油压起动杆前移，钩爪相对应后退，把被拉物体拉出。 使用方法与注意事项 1、使用时先把手柄的开槽端套入回油阀杆，并将回油阀杆按顺时针方向旋紧。 2
RNAi实验原理与制备方法（二）
3.用RNase III 消化长片断双链RNA制备siRNA其他制备siRNA的方法的缺陷是需要设计和检验多个siRNA序列以便找到一个有效的siRNA。而用这种方法——制备一份混合有各种siRNAs “混合鸡尾酒” 就可以避免这个缺陷。选择通常是200—1000碱基的靶mRNA模版，用体外转录
RNAi实验原理与制备方法（一）
实验原理通过生化和遗传学研究表明，RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段，加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。证据表明；一个称
固体样品的制备（四）
工业硅中的成分测定 称取0.5000g的样品，置于250m聚四氟乙烯烧杯中，用少量纯水润湿，加入10ml氢氟酸，缓慢滴加硝酸(1+1)至试样基本溶解，置于电热板上加热15分钟后取下，加入5毫升高氯酸，继续加热至冒高氯酸白烟取下，用水冲洗杯壁，再加热蒸发至近干，取下。加入5毫升(1+1)硝酸，用少
四硼酸钠的制备
使硼酸与碱作用即生成硼酸盐，当溶液为强碱性(pH=11～12)时，主要生成偏硼酸盐： H3BO3+NaOH=NaBO2+2H2O 碱性较弱(pH
油田堵水调剖技术
根据我们多年的经验，目前大部分油田已进入中高含水期，油田早期的开发技术已不再适用，关键是改善注水开发效果，以增加驱油效率、提高产量、延长稳产期，zui终提高注水采收率。生产实践证明，调剖堵水技术是提高注水采收率的重要技术之一。油田堵水技术从50年代开始在现场使用，至今已有四十多年的历史，其发展经历了
乙二胺四乙酸的实验室制备方法
称取一氯乙酸94.5g（1.0mol）于1000mL圆底烧瓶中，慢慢加入50%碳酸钠溶液，直至二氧化碳气泡发生为止。加入15.6g（0.2mol）乙二胺，摇匀，放置片刻，加入40%NaOH溶液100mL，加水至总体积为600mL左右，装上空气冷却回流装置，于50℃水浴上保温2h，再于沸水浴上保温回流
乙二胺四乙酸的实验室制备方法
称取一氯乙酸94.5g（1.0mol）于1000mL圆底烧瓶中，慢慢加入50%碳酸钠溶液，直至二氧化碳气泡发生为止。加入15.6g（0.2mol）乙二胺，摇匀，放置片刻，加入40%NaOH溶液100mL，加水至总体积为600mL左右，装上空气冷却回流装置，于50℃水浴上保温2h，再于沸水浴上保温回流
酵母菌子囊孢子的观察实验
实验方法原理 酵母菌的子囊孢子生成与否及其形状，是酵母分类上的重要依据。一部分酵母菌只有当它在最适条件下，才能观察到形成的子囊孢子，不同种属的酵母菌，形成子囊孢子的条件不同。葡萄糖-醋酸盐培养基特别有利于酿酒酵母子囊孢子的形成。本实验用生长在此培养基上的酿酒酵母为材料，进行子囊孢子的观察。实验材料
实验常用试剂的几种制备与储藏方法
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）:溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸
大肠杆菌与酵母菌的区别
1、从分类上说，大肠杆菌是细菌，属于原核生物；酵母菌是真菌，属于真核生物。2、从大小上说，大肠杆菌细胞小，大小约为0.7×13微米；酵母菌细胞大，一般为1-5微米×5-30微米。3、从细胞壁成分说，大肠杆菌细胞壁主要是由肽聚糖；酵母菌细胞壁的主要成分是葡聚糖和甘露聚糖，占壁干重的85%以上，几丁质含
酵母菌基因克隆实验——互补法
实验材料酵母菌实验步骤1. 用含LEU 2作为选择标志的酵母菌DNA文库转化lea 2 cdc 101-1酵母菌株，在23℃培养，依据插入片段的大小，筛选2 000~20 000个Leu+转化体。 2. 影印平板转化体，将其转印到预热的选择性平板，并于37℃培养筛选互补温感突变的表型。过夜培养之
粗糙脉胞菌顺序四分子分析实验
实验方法原理 粗糙脉胞菌的菌株具有两种不同的接合型(matingtype),用A、a或mt+、mt-表示。接合型是由一对等位基因控制的,并符合孟德尔分离定律。不同接合型菌株的细胞接合后可以进行有性生殖。在有性生殖过程中,不同接合型的菌丝相接触,两核配对,但不融合,形成双核体,随着双核体菌丝的发育,子
粗糙脉胞菌顺序四分子分析实验
实验方法原理粗糙脉胞菌的菌株具有两种不同的接合型(matingtype),用A、a或mt+、mt-表示。接合型是由一对等位基因控制的,并符合孟德尔分离定律。不同接合型菌株的细胞接合后可以进行有性生殖。在有性生殖过程中,不同接合型的菌丝相接触,两核配对,但不融合,形成双核体,随着双核体菌丝的发育,子囊
石蜡切片的制备指南（四）
前言:制备高质量的病理切片需要一定的技巧和经验。该教程的目的是协助初学者熟悉石蜡切片的制备，以及作为经验更丰富的技术专家的进修课程。涵盖轮转式切片机制备石蜡切片的设置和操作相关的基本内容。同时对切片过程中的部分常见故障进行具体说明，并提供故障排除建议。06 设定最佳刀片间隙角刀片间隙角可调,必须进行
酵母菌基因组DNA的提取实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 SE缓冲液山梨醇EDTA溶菌酶PVP蛋白酶K缓冲液 Tris仪器、耗材 高速冷冻离心机台式离心机恒温水浴低温冰箱冷冻真空干燥器取液器电泳仪水平电泳槽紫外观测仪实验步骤 1. 1.5 ml 对数生长期细菌细胞。2. 离心，12 000 rpm，1-2 min。3.
酵母菌基因组DNA的提取实验
基本方案 实验材料 酵母菌 试剂、试剂盒
蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验（四）
小规模大肠杆菌细胞裂解规程1.去垢剂为基础的裂解试剂10 mL 裂解试剂溶液的配方：10 mLB-Per 或 BugBuster,20/iLLysonaseBioprocessingReagent。如果需要减少蛋白质水解和增加目标蛋白质可溶性及稳定性可以添加，如 EDTA、蛋白酶抑制剂、
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU）是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中进行DNA复制时，BrdU可专一替代胸腺嘧啶核苷，而掺入到新复制的DNA核苷酸链中。因此只要通过两个复制周期，就可使姊妹染色单体中一条单体的DNA链中，
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
姐妹染色单体是由一个着丝点连着的并行的两条染色单体，是在细胞分裂的间期由同一条染色体经复制后形成的，在细胞分裂的间期、前期、中期成对存在，其大小、形态、结构及来源完全相同。实验方法原理5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU）是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
基本方案 实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU）是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中
姊妹染色单体互换标本制备与分析实验
基本方案 实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU）是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中
DCCIK的制备方法（四）
4. DC 细胞的培养及鉴定4.1 步骤 3.2 中剩下的贴壁细胞 （主要是 CD14+的单核细胞），加入含重组人 GM-CSF500-1,000U/ml 和重组人 IL-4 500U/ml 的无血清培养液，37℃，5%CO2 培养箱中 培养，诱导单核细胞向 DC 细胞分化。4.2 每 3d 半量换
粮食分样器对比四分法的好处
扦样、分样是粮食、油料和油脂进行样品试验前常会做的工作。简单来说，就是将它们均匀地分为几个等份。粮食油料的分样方法有很多种，过去，人们常会利用四分法进行分样，但是经过长期实践下来，人们发现这种方法花费的时间很长，不适合做大批量试验。因此，后来人们就设计了粮食分样器，让仪器代替手工，还降低了主
细菌细胞的制备实验实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基 实验材料
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞 试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液
酵母菌细胞的诱变实验——紫外光诱变
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD刀豆氨酸仪器、耗材紫外光杀菌灯紫外光放射量测定器实验步骤1. 将过夜培养的酵母菌培养液接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养。离心5~10 s，用1 ml 无菌水重悬沉淀细胞，重复洗涤1次，再用1 ml 无菌水重悬。 2. 检查细胞密度，记录数据后将细胞密度调